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罗朝兵: 作品数：10 被引量：6H指数：2; 供职机构：北京林业大学更多>>; 发文基金：国家自然科学基金转基因生物新品种培育专项国家科技重大专项更多>>; 相关领域：生物学农业科学轻工技术与工程更多>>

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一种绿色溶剂快速、高得率分离木质素的方法: 本发明提供了一种绿色溶剂快速、高得率分离木质素的方法，包括以下步骤：(1)将第一氢键供体、第二氢键供体与氢键受体混合加热得到均相透明的三元低共熔溶剂；(2)将木质纤维素原料加入步骤(1)所述三元低共熔溶剂中进行加热处理后...; 游婷婷李海潮许凤罗朝兵李德强; 文献传递

青杄类伸展蛋白基因PwELP1的克隆及表达分析: 2016年; 【目的】克隆青杄类伸展蛋白（extensin-like proteins,ELPs）基因PwELP1并分析该基因的表达特性,为研究ELP基因家族的功能奠定基础。【方法】以青杄cDNA文库为模板,用RACE-PCR方法克隆青杄类伸展蛋白编码基因PwELP1的cDNA全长,利用DNAMAN确定PwELP1的编码框及蛋白氨基酸的翻译,运用clustalx软件与Espript工具进行多序列比对,利用MEGA 5软件的邻位相连法构建系统树,并对编码蛋白进行生物信息学分析;利用RT-qPCR检测PwELP1基因在青杄不同组织中表达的特异性、花粉和种子不同萌发时期及幼苗受到不同逆境处理时的表达差异,分析该基因的组织发育及逆境响应表达特点。【结果】PwELP1基因全长832bp,其编码一个由159个氨基酸组成的蛋白,该蛋白的N端与C端均有比较保守的结构域;此蛋白二级结构由1个α-螺旋、5个β-折叠与3个β-转角结构构成,对其三级结构的预测印证了这一结果,同时发现该蛋白中还存在部分无规则卷曲。其分子质量为17.03ku,理论等电点为5.81。PwELP1在青杄花粉中的表达量较高,且在花粉萌发后期（30-36h）以及种子萌发初期（第2天）表达量高;PwELP1的表达不同程度地受低温、高温、茉莉酸甲酯（MeJA）、H2O2、脱水以及脱落酸（ABA）等非生物逆境胁迫处理的诱导,尤其是H2O2、高温和ABA,处理初期表达量就显著升高。【结论】PwELP1在青杄花粉和种子萌发过程中可能发挥重要功能,并可参与青杄对非生物逆境胁迫的响应过程。; 郜银涛周燕妮罗朝兵张凌云陈坤明; 关键词：非生物胁迫

一种绿色溶剂快速、高得率分离木质素的方法: 本发明提供了一种绿色溶剂快速、高得率分离木质素的方法，包括以下步骤：(1)将第一氢键供体、第二氢键供体与氢键受体混合加热得到均相透明的三元低共熔溶剂；(2)将木质纤维素原料加入步骤(1)所述三元低共熔溶剂中进行加热处理后...; 游婷婷李海潮许凤罗朝兵李德强

青杄PwNAC1及其拟南芥同源基因ANAC018转录活性及功能分析: NAC转录因子是一个植物特有、功能多样性的基因家族，它们在植物生长发育、衰老、激素响应以及生物应答过程中发挥重要的作用。本研究基于对青杄基因PwNACl的研究，找到拟南芥同源基因ANAC018，并对ANAC018的转录活...; 罗朝兵; 关键词：拟南芥转录活性盐胁迫衰老调控

青杄CYP1基因的克隆与表达被引量：1: 2015年; 以青杄(Picea wilsonii)的c DNA文库为模板,根据青杄基因Pw CYP1的EST序列设计引物,通过RACE-PCR方法获取Pw CYP1的全长c DNA序列。生物信息学分析表明:Pw CYP1全长c DNA为962 bp,编码框为516 bp组成,编码一个171氨基酸的多肽,Protparam工具预测蛋白的分子量约为17.98 k Da,理论等点为8.34。组织特异性试验表明,Pw CYP1在青杄花粉中的表达量最高,种子中最少。花粉萌发试验显示,Pw CYP1在青杄花粉萌发中表达量先下降,在后期表达量重新上调。在青杄种子萌发试验中,Pw CYP1表达量先下降,在第4天达到最低值后表达量被上调。同时,Pw CYP1受脱落酸(abscisic acid,ABA)、茉莉酸甲酯(methyl jasmonate,Me JA)、赤霉素(Gibberellin,GA)、干旱和盐胁迫的诱导且表达量上调,这些结果显示Pw CYP1参与了发育及多种逆境胁迫和对激素的响应过程。; 罗朝兵鞠丹刘中帅张凌云; 关键词：植物激素

拟南芥AtNAC018蛋白及其编码基因在植物耐逆及抗衰老中的应用: 本发明公开了拟南芥AtNAC018蛋白及其编码基因在植物耐逆及抗衰老中的应用。本发明提供了AtNACO18蛋白或其编码基因的应用，为如下(a1)和/或(a2)：(a1)调控植物耐逆性；(a2)调控植物衰老过程；所述AtN...; 张凌云罗朝兵孙帆张鹤华; 文献传递

青杄生长素抑制蛋白基因PwARP-1的克隆及表达分析被引量：3: 2014年; 从青杄的cDNA文库中筛选出一个生长素抑制蛋白基因PwARP-1(Auxin-repressed protein 1),并通过RACE-PCR技术获得PwARP-1 cDNA全长。生物信息学分析显示,PwARP-1基因编码155个氨基酸残基的蛋白,分子量为17.1 kD,理论等电点为10.07,富含无规则卷曲。以多年生青杄和青杄幼苗为研究材料,通过RT-qPCR技术检测PwARP-1的组织特异性表达、激素的响应模式及种子萌发过程中的表达量模式。结果表明,PwARP-1在青杄各个组织中均有表达,在花粉中表达量最高,在种子中的表达量最低。PwARP-1在种子萌发过程中表达量呈先上升,在第10天表达量达到最高后开始下降。进一步试验表明,PwARP-1能响应多种逆境胁迫和激素处理。在赤霉素(GA)和生长素(IAA)处理下PwARP-1的表达量被抑制。在干旱胁迫和油菜素内酯(BR)激素处理下PwARP-1的表达量逐渐升高,而在在盐胁迫、茉莉酸甲酯(MeJA)和脱落酸(ABA)等激素处理下PwARP-1的表达量先下降后上升。这些结果显示PwARP-1可能参与了植物种子萌发、多种逆境胁迫和激素响应过程。; 孙帆罗朝兵周燕妮张凌云; 关键词：植物激素

青杄转录因子PwERF8及其启动子序列的克隆与分析: 2018年; 【目的】AP2/ERF是植物的转录因子家族之一,广泛参与生物胁迫和非生物胁迫过程。从青杄中克隆ERF类转录因子PwERF8及其启动子序列,研究PwERF8基因的表达特性、启动子序列功能,并进一步分析其对非生物胁迫的响应模式,为深入了解青杄的耐逆调控机制提供理论基础。【方法】通过RACE-PCR技术获得青杄PwERF8编码区全长序列。通过染色体步移技术克隆PwERF8启动子序列。通过PlantCARE在线软件和BDGP在线软件预测启动子序列上的顺式作用元件、基础启动子和转录起始位点,构建pBI121-PwERF8 promoter∷GUS启动子表达载体,采用农杆菌注射法瞬时转化烟草叶片来验证启动子的功能。构建PGBKT7-PwERF8载体,转化AH109酵母菌株验证其转录激活活性。构建35S∷PwERF8-GFP融合表达载体,通过PEG介导瞬时转化拟南芥原生质体进行基因表达的亚细胞定位分析,应用RT-qPCR技术分析该基因的组织特异性和在非生物胁迫下的时空表达特征。【结果】PwERF8基因的编码区全长序列共1 191 bp,开放阅读框共765 bp,开放阅读框翻译成255个氨基酸。在肽链的N端具有1个保守的由58个氨基酸组成的AP2结构域,在C端含有1个EAR转录抑制基序(DLNLPP)。组织特异性表达分析表明,PwERF8在茎、根、针叶、花粉、种子中均有表达,但在花粉中,PwERF8的表达量最高,其次为种子,在茎中的表达量最少。酵母单杂交试验表明,PwERF8蛋白不具有转录激活活性。亚细胞定位分析发现PwERF8蛋白主要定位于细胞核。将启动子序列进行在线分析显示PwERF8含有GA、ABA、JA和SA等激素的顺式作用元件。进一步在烟草中瞬时过表达PwERF8启动子并用GUS染色显示,PwERF8启动子能响应GA、ABA、MeJA和SA等外源激素的处理。GA、ABA、MeJA和SA分别处理青杄幼苗3、6、12 h后,PwERF8的表达量均显著高于对照,干旱、4℃和42℃处理均能诱导PwERF8表达,但盐胁迫不能诱导�; 张鹤华刘嘉欣罗朝兵张凌云; 关键词：ERF转录因子激素启动子基因表达

一种基于植物cDNA文库的基因全长cDNA的批量分离方法: 本发明公开了一种从生物中批量分离基因全长cDNA的方法。该方法包括如下步骤：1）提取生物总RNA；2）将总RNA反转录得到双链cDNA，将所述双链cDNA与文库载体连接，连接产物转化受体菌，得到全长cDNA文库；3）将c...; 张凌云李长江孙帆罗朝兵; 文献传递

拟南芥AtNAC018蛋白及其编码基因在植物耐逆及抗衰老中的应用: 本发明公开了拟南芥AtNAC018蛋白及其编码基因在植物耐逆及抗衰老中的应用。本发明提供了AtNACO18蛋白或其编码基因的应用，为如下(a1)和/或(a2)：(a1)调控植物耐逆性；(a2)调控植物衰老过程；所述AtN...; 张凌云罗朝兵孙帆张鹤华

罗朝兵

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