沈慧玲
- 作品数：68 被引量：164H指数：6
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- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- NB4细胞诱导分化过程中WT1、RbAp46及IGFBP-rP1基因表达水平的变化被引量：2
- 2006年
- 目的:探讨WT1、RbAp46及IGFBP-rP1基因与NB4细胞诱导分化的关系。方法:利用实时定量RT-PCR方法检测NB4细胞诱导分化不同时间点WT1、RbAp46和IGFBP-rP1基因的表达水平,并用流式细胞仪检测NB4细胞表面抗原CD11b的变化。结果:随着NB4细胞向粒系终末分化,WT1、IGFBP-rP1基因的表达水平迅速下降。0.5μmol/L全反式维甲酸(all transretinoic acid,ATRA)作用0、4、8、12、24与48 h后WT1N分别为1.91、1.21、0.60、0.44、0.18与0.04;IGFBP-rP1N分别为1.10、0.80、0.54、0.28、0.17与0.15。RbAp46基因的平均表达水平则下降缓慢,分别为2.65、1.86、1.40、1.27、1.48与0.49。NB4细胞处理组WT1基因的改变分别与RbAp46和IGFBP-rP1基因的变化存在相关性(r=0.829,P=0.021;r=1,P<0.001),三者均与CD11b的变化呈负相关(r=-1.0,P<0.001;r=-0.829,P=0.021与r=-1.0,P<0.001)。结论:WT1、RbAp46和IGFBP-rP1基因的高表达可能参与了阻滞NB4细胞分化的过程。
- 胡绍燕陈子兴顾伟英沈慧玲岑建农
- 关键词：NB4细胞
- 携载阿霉素磁性纳米Fe_3O_4颗粒的制备及逆转多药耐药的实验研究被引量：11
- 2007年
- 为了建立一种磁性纳米Fe3O4颗粒携载聚合阿霉素的制备方法,探讨载药纳米颗粒对K562及其耐药株K562/A02的作用,用机械吸附聚合法在4℃、37℃下以不同药球比聚合24、48小时合成载药纳米颗粒,用噻唑蓝比色法检测细胞与载药纳米颗粒悬液孵育48小时后的生存率,并计算细胞抑制率。结果表明:随着磁性纳米Fe3O4颗粒浓度增加,两种细胞抑制率均提高,聚合在4℃、48小时时的细胞抑制率分别高于37℃、24小时的细胞抑制率。结论:磁性纳米Fe3O4颗粒可通过机械吸附法携载阿霉素,聚合具有温度、时间依赖特性;载药纳米颗粒有逆转多药耐药作用。
- 孙茜陈宝安王雪梅高峰戴永援程坚丁家华高冲李景源许文林沈慧玲
- 关键词：磁性纳米颗粒阿霉素多药耐药
- 转染抗VEGF发夹状核酶基因白血病细胞模型的建立
- 2006年
- 目的建立转染抗血管内皮生长因子(VEGF)发夹状核酶基因的白血病细胞模型,探讨发夹状核酶对白血病细胞系K562VEGF基因表达的效应。方法采用脂质体介导的方法将抗VEGF发夹状核酶基因真核表达载体(pcDNA3-RZ)转染入人白血病细胞系K562,G418抗性筛选获得阳性克隆,转染VEGFpcDNA3-RZ和空载体(pcDNA3)的细胞组均有抗性细胞生长,分别命名为K562-RZ和K562-PC;抽提基因组DNA,用PCR方法验证核酶基因已转染入K562细胞,荧光定量PCR和westernblot方法分别检测白血病细胞VEGFmRNA和蛋白的表达量;同时测定K562-RZ,K562-PC和K562三组培养上清刺激内皮细胞生长的情况。结果抗VEGFpcDNA3-RZ成功转入白血病细胞系K562,G418筛选2周获得阳性克隆,PCR检测证实核酶基因整合入白血病细胞基因组DNA;与K562及K562-PC细胞相比,转染VEGF核酶基因的K562-RZ细胞VEGFmRNA和蛋白的表达量明显降低;K562-RZ组培养上清对内皮细胞的刺激作用明显弱于K562-PC组。结论建立了转染VEGF发夹状核酶基因的白血病细胞模型,抗VEGF发夹状核酶基因可明显下调白血病细胞VEGF的表达,为抗肿瘤治疗提供了新的线索。
- 许文林沈慧玲吴朝阳费霞
- 载阿霉素磁性纳米Fe3O4颗粒的制备及逆转多药耐药的实验研究
- 目的：为了建立一种磁性纳米 FeO颗粒携载聚合阿霉素的制备方法,探讨载药纳米颗粒对 K562及其耐药株 K562/A02的作用。方法：本研究用机械吸附聚合法在4℃、 37℃下以不同药球比聚合24h、48h 合成载药纳米颗...
- 孙茜陈宝安王雪梅高峰戴永援程坚丁家华高冲李景源许文林沈慧玲
- 关键词：阿霉素多药耐药
- 文献传递
- 急性白血病患者WT1基因外显子区域点突变的研究
- ＜正＞WT1基因（Wilm’s tumor gene）最早是作为一种肿瘤抑制基因在Wilm’s瘤中被发现的,与泌尿生殖系统的发育和Wilm’s瘤的发生、发展密切相关。研究发现在Wilm’s瘤中WT1基因可因点突变、小片段...
- 赵晔陈子兴王玮沈慧玲
- 文献传递
- WT1基因转染增加白血病细胞凋亡的实验研究
- 2005年
- 为了探讨WT1基因异构体对急性早幼粒细胞性白血病细胞株NB4凋亡的影响及其分子机制,应用电穿孔的方法将携带WT1基因异构体WTA(-17AA/-KTS)全长cDNA的真核表达载体及其对照质粒pCB6+转导白血病细胞株NB4,建立WT1基因异构体表达比例改变的单克隆细胞株;用MTT、形态学观察、DNA凝胶电泳、AnnexinV结合力测定等方法观察WT1基因异构体表达比例的转变对白血病细胞NB4诱导凋亡的影响;用RTPCR方法检测细胞中p21、p53、bcl2、bclXL、和cmyc等凋亡相关基因表达的改变。研究结果表明,MTT显示NB4/WTA细胞对As2O3的IC50值较对照组明显降低;经As2O3作用48小时,NB4/WTA细胞AnnexinⅤ结合力较对照组细胞升高,出现更为典型的凋亡形态学改变;在DNA凝胶电泳可见更为明显的DNA梯形条带,RTPCR检测提示NB4/WTA细胞p21、cmyc基因的表达较对照组高,bcl2表达下降,p53、bclXL基因表达无明显改变。结论:增加外源性WT1基因异构体WTA的表达从而将WT1基因异构体表达的比例由+17AA/+KTS优势型转变为-17AA/-KTS优势型,能使NB4细胞对As2O3引起的凋亡更为敏感,这些改变可能与p21、cmyc等基因的表达上调和bcl2基因的表达下调有关。
- 沈慧玲陈子兴王玮岑建农胡绍燕赵晔
- 关键词：WT1基因基因转染白血病NB4细胞细胞凋亡
- 人端粒酶逆转录酶与肿瘤相关性的研究进展
- 2015年
- 1938年,Hermann Muller通过X射线照射果蝇产生突变体,发现了染色体末端的特殊结构并命名为端粒（telomere）。端粒是真核细胞染色体的末端物质。它作为一种保护性的结构单位,在维持染色体稳定性中起着重要的作用。人类的端粒由TTAGGG重复序列构成,长度大约2~15 kb[1]。端粒在染色体末端形成T环,不但可以防止染色体重排和末端融合,而且可以保护编码DNA序列,防止DNA在复制中丢失,起到了维持染色体稳定性的作用。
- 曹渊沈慧玲许文林
- 关键词：肿瘤端粒端粒酶人端粒酶逆转录酶
- WT1基因异构体对白血病细胞生物学行为影响的研究
- 目的:优化悬浮培养的白血病细胞电穿孔转染的条件.将携带WT1基因四种异构体全长cDNA的真核表达载体转导白血病细胞株NB<,4>,建立稳定表达的单克隆细胞株.探讨WT1基因及其异色体对急性早幼粒细胞性白血病细胞株NB<,...
- 沈慧玲
- 关键词：WT1基因异构体电穿孔基因芯片
- 文献传递
- RNA干扰YB-1表达对阿霉素诱导性耐药的K562细胞mdr1基因表达的影响
- 2011年
- 目的探讨Y-盒结合蛋白1（YB-1）对白血病细胞系K562细胞药物诱导性mdrl基因表达的调控作用。方法阿霉素间歇性长期作用于K562细胞，剂量逐渐增加，诱导细胞耐药。RT-PCR检测mdrl和YB-1基因表达，流式细胞术检测mdrl基因编码的P-糖蛋白（P-gP）表达，蛋白质印迹法检测YB-1蛋白核易位程度。通过RNA干扰技术使K562细胞中YB-1基因表达沉默，再用阿霉素处理YB-1基因沉默细胞，诱导细胞耐药，用RT-PCR、流式细胞术分别检测mdrlmRNA和P-gp的表达。结果经阿霉素作用后K562细胞mdrl基因转录上调，P—gP表达增加，同时YB-1基因转录也增强，且出现明显的核易位。YB-1基因沉默后，mdrl基因诱导性表达明显减少，阿霉素浓度为0．03、0．05μg／ml时 mdr1 mRNA表达水平分别较未行shRNA干扰组降低（53．7±0．1）％和（64．3±0．0）％，P-gP表达呈同样趋势。结论阿霉素诱导K562细胞耐药形成的过程中，YB-1对于mdr1基因的转录活化起一定的作用。
- 沈慧玲许文林陈巧云王法春费霞
- 关键词：转录调节
- K562细胞药物诱导性耐药的机制探讨被引量：1
- 2009年
- 在白血病细胞多药耐药（MDR）产生机制的研究中，mdr1基因编码的P糖蛋白（P—gp）高表达是研究最深入的机制之一。阿霉素是临床常用的化疗药物之一，属蒽环类，抗瘤谱广，它能抑制DNA和RNA的合成，属周期非特异性药物。临床工作中，化疗药物诱导的肿瘤细胞耐药时常发生，我们以阿霉素作用于人白血病细胞系K562细胞，观察阿霉素诱导细胞耐药产生的规律，初步探讨耐药形成的机制。
- 许文林秦茹娟陈巧云方丽丽陈琛房新建沈慧玲
- 关键词：白血病细胞多药耐药K562细胞药物诱导性肿瘤细胞耐药化疗药物诱导人白血病细胞系
