李坤
- 作品数：8 被引量：60H指数：5
- 供职机构：兰州理工大学生命科学与工程学院更多>>
- 发文基金：甘肃省自然科学基金甘肃省科技支撑计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生轻工技术与工程生物学更多>>
- 当归多糖的酶法提取新工艺研究被引量：24
- 2012年
- 目的:研究当归多糖的酶法提取新工艺,并就提取多糖的抗肿瘤活性进行评价。方法:采用生物酶辅助提取技术进行当归多糖提取工艺研究,选用单因素实验探索酶用量、酶解温度、酶解时间及pH值对当归多糖提取率的影响,在单因素实验的基础上,采用正交试验对工艺条件进行优化,并采用MTT法评价当归多糖对hela细胞的抗肿瘤活性。结果:各因素对提取效果影响由大到小依次为:酶浓度>酶解时间>pH值>酶解温度,最佳提取工艺条件为,纤维素酶浓度:0.4mg/mL、提取温度:60℃、提取时间:4h,pH=5.0,当归多糖得率为150.34mg/g,MTT结果证实提取多糖具有一定的抗肿瘤活性。结论:该工艺操作简单,成本较低,本研究为当归多糖的深度开发提供了科学依据。
- 张新国王强林李春雷张应鹏李坤胡淑娟任菁周莉智康康代兴超
- 关键词：当归多糖酶法提取MTT
- 蛋白质工程技术及其在生物药物研发中的应用被引量：5
- 2011年
- 蛋白质工程技术是在基因水平上通过分子设计和DNA重组技术合成自然界不存在的蛋白质的新技术。介绍定点突变、体外定向进化和tRNA介导蛋白质工程3类蛋白质工程技术,并综述其在生物药物研发中的应用。
- 张新国陈文洁曾艳龙王强林李坤
- 关键词：生物药物定点突变体外定向进化
- PHLD融合蛋白在毕赤酵母中的构建和表达
- 2018年
- δ-睡眠肽(delta sleep inducing peptide, DSIP)的相对分子质量较小,在体内半衰期较短,因此本研究将蛋白质转导结构域(protein transduction domain, PTD)、人血清白蛋白(human serum albumin, HSA)、连接肽(linker)以及δ-睡眠肽(DSIP)进行融合表达,以获得重组PHLD睡眠肽融合蛋白。研究以pPIC9K/HSA为模板,利用PCR技术进行扩增,将获得的PHLD基因连接到表达载体pPIC9K上,然后转入组氨酸缺陷型毕赤酵母GS115,经G418筛选获得了高表达PHLD融合蛋白的酵母工程菌株,并进一步获得了高纯度的融合蛋白。本研究将为DSIP的深入研究和应用提供技术资料。
- 张新国郭广君李坤孙巧云郭思佳马小弟马国艳
- 关键词：连接肽毕赤酵母融合蛋白
- RNAi在肿瘤基因治疗药物研究中的应用被引量：6
- 2011年
- 肿瘤是多种基因突变的累积以及这些基因相互作用形成的基因网络调控的结果,目前RNA干扰技术越来越多地拓宽到肿瘤医学的研究领域。本文就RNA干扰技术在肿瘤基因治疗、在候选基因的发现和筛选中的应用以及临床研究进展方面做一综述。
- 张新国曾艳龙陈文洁李坤
- 关键词：RNA干扰肿瘤基因治疗癌症
- 党参多糖钙的制备及鉴别被引量：7
- 2011年
- 目的:本实验以提取的党参多糖为原料,进行有机党参多糖钙初步合成及鉴别。方法:提取党参多糖,并以其作载体,CaCl2为钙源,常温下保持pH在11以上,党参多糖与金属钙离子配合反应生成党参多糖钙络合物;用EDTA配位滴定法与透析法结合进行鉴别;EDTA配位滴定法测党参多糖含钙量。结果:党参多糖得率为15.6%;党参多糖总含钙量为15.91%,游离钙含量仅为0.94%,说明党参多糖钙大部分是以络合形式存在。结论:本研究所得的党参多糖钙将有可能是一种潜在新型的补钙剂。
- 张新国曾艳龙陈文洁王亚丽王强林李坤
- 关键词：党参多糖
- 党参多糖铁的合成及鉴别被引量：18
- 2011年
- 目的:合成并鉴别一种有机补铁剂。方法:采用水提醇沉的方法提取党参多糖,用苯酚-硫酸法测多糖含量。党参多糖和三氯化铁在碱性条件下合成党参多糖铁,并对其合成温度进行考查,采用邻菲罗啉比色法配合透析法测定党参多糖铁的铁含量及存在形式,并用红外光谱法分析了铁的结合方式。结果:合成所得党参多糖铁的多糖得率为15.6%,党参多糖含铁量为19.9%。结论:红外光谱法解析多糖铁的结构说明党参多糖铁是以络合形式存在。
- 张新国陈文洁曾艳龙米世涛王强林李坤张琳琳
- 关键词：党参多糖
- 复合多糖提取工艺研究被引量：1
- 2012年
- 以酿酒酵母为出发菌株，通过化学-紫外-Co^60复合诱变获得一株（S010204）对无机铁具有高富集和转化性能的高抗性突变菌株。通过亚铁和维生素进行混合流加制备富铁酵母，采用原子吸收法（FASS）测定富铁酵母富铁含量。
- 张新国胡淑娟王鸣刚彭轶楠王强林于国庆李坤李百洋陈晓前
- 关键词：酵母复合诱变诱变育种
- 一种快速鉴别三聚氰胺毒奶粉蛋白质含量的检测方法被引量：1
- 2010年
- 为了建立一种快速检测含三聚氰胺奶粉蛋白质含量的简便方法,本研究分别用考马斯亮蓝法、双缩脲法以及纳氏法测定了三聚氰胺毒奶粉中蛋白质的含量,并对测定结果进行了比较。通过高温变性法、改良三氯乙酸法、Sevage法和透析法考察了去除蛋白氮和非蛋白氮-三聚氰胺的效果。结果表明,考马斯亮蓝和双缩脲不与非蛋白氮三聚氰胺发生反应,采用改良三氯乙酸法可以较好的实现蛋白氮与非蛋白氮三聚氰胺的分离。因此,用考马斯亮蓝法或者双缩脲法可以准确测出含毒奶粉中蛋白氮的含量,通过改良三氯乙酸法配合纳氏法可以检测奶粉中的非蛋白氮-三聚氰胺。
- 张新国李坤张琳琳王强林曾艳龙陈文洁
- 关键词：三聚氰胺蛋白含量
