邓晓洁
- 作品数：4 被引量：0H指数：0
- 供职机构：重庆大学更多>>
- 发文基金：重庆市自然科学基金国家重点基础研究发展计划国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生轻工技术与工程更多>>
- 一种具有趋化作用的人类RANTES蛋白的异源表达和纯化方法
- 本发明涉及一种具有趋化作用的人类RANTES蛋白的异源表达和纯化方法。采用具有高表达、高稳定、高分泌和低成本的毕赤酵母表达体系，通过RT-PCR克隆人RANTES基因、人RANTES融合蛋白表达载体构建、人RANTES融...
- 陈国平胡宗利邓晓洁刘志昭顾峰
- 文献传递
- 趋化因子RANTES在毕赤酵母中的表达研究
- 趋化因子(chemokine)是指对于炎性细胞具有趋化作用的一类小分子蛋白，根据其分子结构中4个位点上的半胱氨酸残基的分布以及附近氨基酸残基的结构分为CXC、CC、C和CX3C四种类[1]。趋化因子RANTES是趋化性细...
- 邓晓洁
- 关键词：炎性细胞趋化因子毕赤酵母
- 趋化因子RANTES在毕赤酵母中的表达、纯化与鉴定
- 2008年
- 背景:RANTES是典型的趋化性细胞因子,参与很多炎症反应以及器官移植免疫排斥反应。从天然组织中分离RANTES数量有限,难以满足对其生物学功能研究和临床应用的需要;运用基因工程方法生产RANTES具有一定的应用价值。目的:观察人体趋化因子RANTES基因在毕赤酵母体系中的分泌表达,获得重组RANTES蛋白。设计、时间及地点:基因水平的实验观察,于2006-07/2007-10在重庆大学生物工程学院313实验室完成。材料:新鲜人外周血取自志愿者,用以分析人体RANTES基因序列设计引物;质粒pPIC9K、毕赤酵母菌珠Pichia Pastoris GS115均由重庆大学生物工程学院313实验室保存。方法:将人体趋化因子RANTES基因插入含AOX1启动子和α分泌信号肽序列的酵母表达载体pPIC9K中,用SalⅠ将重组质粒线性化,电击转化毕赤酵母GS115感受态细胞,筛选阳性整合子进行甲醇诱导表达。主要观察指标:趋化因子RANTES在毕赤酵母中的表达、纯化与鉴定结果。结果:人体趋化因子RANTES在酵母培养基BMGY中实现了分泌表达,表达产物经SDS-聚丙烯酰氨凝胶电泳及Western blot鉴定为重组RANTES蛋白。结论:在毕赤酵母真核系统中实现了人体趋化因子RANTES的分泌表达,为RANTES蛋白进一步的结构和功能研究打下了基础。
- 邓晓洁胡宗利张宁赵志平陈国平
- 关键词：RANTES毕赤酵母分泌基因表达
- 一种具有趋化作用的人类RANTES蛋白的异源表达和纯化方法
- 本发明涉及一种具有趋化作用的人类RANTES蛋白的异源表达和纯化方法。采用具有高表达、高稳定、高分泌和低成本的毕赤酵母表达体系，通过RT－PCR克隆人RANTES基因、人RANTES融合蛋白表达载体构建、人RANTES融...
- 陈国平胡宗利邓晓洁刘志昭顾峰
- 文献传递
