涂微
- 作品数:4 被引量:2H指数:1
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- 人树突状细胞信号传导通路抑制因子1基因RNA干扰慢病毒载体的构建及鉴定
- 目的:构建人树突状细胞(hDCs)信号传导通路抑制因子1(SOCS1)基因RNA干扰(RNAi)慢病毒载体.方法根据人树突状细胞SOCS1基因(NM-0037),根据文献筛选出一个靶序列错误!未找到引用源.,设计并合成包...
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- 人树突状细胞信号传导通路抑制因子1基因RNA干扰慢病毒载体的构建及鉴定
- 目的:构建人树突状细胞(hDCs)信号传导通路抑制因子1(soCs1)基因RNA干扰(RNAi)慢病毒载体.方法:根据人树突状细胞SOCS1基因(NM-0037),根据文献筛选出一个靶序列,设计并合成包含正反义靶序列的互...
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- 关键词:细胞治疗人树突状细胞RNA干扰慢病毒载体抗肿瘤效应
- 文献传递
- 人树突状细胞SOCS1基因RNA干扰慢病毒载体的构建及鉴定被引量:1
- 2012年
- 目的构建人树突状细胞(hDCs)信号传导通路抑制因子1(SOCS1)基因RNA干扰(RNAi)慢病毒载体。方法根据人树突状细胞SOCS1基因(NM-0037),筛选出一个靶序列,设计并合成包含正反义靶序列的互补单链寡核苷酸,与经BamH和Xho酶切后的慢病毒载体质粒pRNA-Lenti-增强型绿色荧光蛋白(EGFP)(含U6启动子和EGFP)连接产生pRNA-Lenti-SOCS1-EGFP慢病毒重组质粒,与慢病毒包装混合物共转染293T细胞,包装产生慢病毒,收集病毒上清,采取系列稀释法测定慢病毒滴度。然后转染hDCs,通过荧光显微镜观察细胞转染情况,利用荧光实时定量PCR和Westernblot检测干扰组、阴性对照组、空白对照组SOCS1的表达情况。结果将目的序列成功连接到载体上,并经测序分析证实载体构建成功。荧光实时定量PCR及Westernblot检测显示慢病毒重组质粒感染hDCs后,与空白对照组及阴性对照组比较,siRNA组mRNA和SOCS1蛋白的表达量显著降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论构建的pRNA-Lenti-SOCS1-EGFP慢病毒载体可有效地抑制hDCs的SOCS1的表达,为进一步研究DCs增强抗肿瘤免疫应答效应奠定基础。
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- 关键词:人树突状细胞RNA干扰
- 人树突状细胞SOCS1基因RNA干扰慢病毒载体的构建及鉴定
- 一、研究目的和意义 人树突状细胞(hDCs)是专职的抗原提呈细胞,通过其表面的MHC类分子与肽类抗原结合,将抗原呈递给T细胞,促进T细胞的活化和增殖,另外,还可促进B细胞的活化和调节体液免疫。成熟DC的表面高表达MHC类...
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- 关键词:人树突状细胞SOCS1RNA干扰慢病毒载体
- 文献传递