吕立力
- 作品数:4 被引量:0H指数:0
- 供职机构:中国药科大学生命科学与技术学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域:生物学医药卫生更多>>
- 重组鲨肝活性蛋白的分泌表达及其体外对肝细胞葡萄糖激酶活性的影响
- 2008年
- 构建了鲨肝活性蛋白的原核分泌表达载体pET22b-S,经过周质蛋白的提取、DEAE Sepharose FF、MonoQ/AKTAexplorer、Bio-gel P10的分离纯化,获得可溶性重组鲨肝活性蛋白(rSHAP)。初步研究了rSHAP对肝细胞增殖以及肝细胞葡萄糖激酶活性的影响。结果显示rSHAP能够被成功分泌至细胞间质中,分离纯化后可获得纯度约95%的可溶rSHAP,产量约3.8 mg/L。所获得的rSHAP具有刺激SMMC-7721细胞株增殖活性,体外活性检测显示15~45μg/ml的rSHAP能够显著提高正常人肝细胞HL-7702葡萄糖激酶活性。
- 吕立力黄凤杰吴梧桐
- 关键词:分泌性表达葡萄糖激酶
- 重组鲨肝活性蛋白的分泌表达及其体外对肝细胞葡萄糖激酶活性的影响
- 文章构建了鲨肝活性蛋白的原核分泌表达载体pET22b-S,经过周质蛋白的提取、DEAESepharose FF、MonoQ/AKTA explorer、Bio-gel P10的分离纯化,获得可溶性重组鲨肝活性蛋白(rSH...
- 吕立力黄风杰吴梧桐
- 关键词:分泌性表达葡萄糖激酶
- 一种具有胰岛β-细胞保护作用的重组多肽
- 本发明提供一种具有胰岛β-细胞保护作用的重组多肽,该重组多肽根据鲨肝活性肽N端序列LVGPIGAVGP,以鲨肝cDNA为模板,通过PCR方法获得编码序列,并构建了重组多肽的分泌表达载体,获得的重组多肽于体外能够抑制STZ...
- 吴梧桐吕立力欧瑜
- 文献传递
- 鲨肝活性肽S-8300的克隆、分泌表达及重组产物活性研究
- 2010年
- 目的研究鲨肝活性肽S-8300的克隆、分泌表达及重组产物活性。方法根据从鲨鱼肝脏中分离纯化到的S-8300的N端氨基酸序列,设计了一套简并引物,利用RT-PCR方法从再生鲨肝组织的总RNA中扩增到一条cDNA片段,大小为342 bp。结果根据序列分析及氨基酸序列推测的结果,表明这个cDNA片段的N端与S-8300 N端15个氨基酸序列完全一致,genebank和NCB I的搜索结果表明这个cDNA片段是一个新的序列。将这个cDNA片段插入到信号肽pelB基因下游,成功构建了原核分泌表达质粒pET22b-S,将该质粒转化进大肠杆菌BL21(DE3)中成功构建了工程菌pET22b-S/BL21(DE3)。通过对重组菌诱导条件(诱导温度、诱导剂IPTG的浓度)的筛选,SDS-PAGE分析,结果表明,在25℃,0.4 mmol.L-1IPTG诱导条件下,rS-8300在信号肽pelB引导下能够高效的分泌至周质腔中。结论活性研究表明,该分泌表达产物具有与天然S-8300相似的减轻链脲霉素对NIT-1细胞损伤的作用。
- 黄凤杰吕立力钱璟吴梧桐
- 关键词:克隆分泌表达生物活性