俞先峰
- 作品数:16 被引量:20H指数:2
- 供职机构:吉林大学更多>>
- 发文基金:国家教育部博士点基金国家自然科学基金国家现代农业产业技术体系建设项目更多>>
- 相关领域:农业科学医药卫生文化科学更多>>
- 猫多能性基因慢病毒表达载体的构建与鉴定被引量:2
- 2014年
- 从含有猫Oct4、Sox2、Klf4及c-Myc的质粒中获取目的基因,将目的基因与携带绿色荧光蛋白(GFP)的慢病毒载体LV5进行定向连接,构建慢病毒表达载体LV-Oct4、LV-Sox2、LV-Klf4、LV-c-Myc,将其连接产物分别转化至细菌感受态细胞中,经筛选阳性克隆、酶切鉴定后测序,通过lipofectamine2000介导转染293T细胞对慢病毒进行包装并测定病毒滴度,探讨猫多能性基因Oct4、Sox2、Klf4及c-Myc慢病毒载体的构建与包装。结果表明:经双酶切鉴定及测序分析,成功构建并包装出LV-Oct4、LV-Sox2、LV-Klf4及LV-c-Myc慢病毒载体,基因测序结果与目标序列完全一致,且病毒滴度均达到107 TU·mL-1以上。说明成功地构建了猫多能性基因慢病毒表达载体,获得稳定产生慢病毒颗粒的包装细胞株。
- 樊晓烨俞先峰袁宝陈健朱拓袁龙马云青栗楠谢珊姗刘殿峰张嘉保任文陟
- 关键词:慢病毒载体胚胎干细胞
- 延边黄牛活体采卵(OPU)及胚胎移植技术研究
- 牛活体采卵(OPU)具有能够在短期内大量扩繁遗传背景清楚的良种牛、大幅缩短世代间隔等诸多优点,因此越来越受到人们的关注.然而OPU作为多种技术的集成技术,其应用受到很多因素的影响,包括,采卵频率、品种、激素的调控等.怎样...
- 俞先峰张嘉保
- 关键词:延边黄牛活体采卵胚胎移植生产效率
- BTBD9基因作为牛超数排卵性状分子标记的应用
- 本发明公开了BTBD9基因作为牛超数排卵性状分子标记的应用,以提取的牛基因组DNA为模板,设计特异性引物一对,克隆牛BTBD9基因基因的部分DNA序列,通过测序及基因型分型并将不同基因型与超数排卵性状进行关联分析,为牛的...
- 姜昊张嘉保袁宝陈承祯张明军闫向民高妍金永勋俞先峰付旭煌罗丹
- 文献传递
- TETs蛋白在乌拉坦诱导小鼠肺癌模型中的表达模式被引量:1
- 2020年
- 目的探讨TET家族蛋白在小鼠肺癌模型中的表达模式。方法将小鼠分成3组,每组10只。分别设为对照组(Con),乌拉坦诱导组(Ure),以及羟基脲给药组(Ure-HU)。对Ure组和Ure-HU组连续10周给予800 mg/kg乌拉坦溶液,诱导建立小鼠肺癌摸型。10周后对Ure-HU组给予HU药物(500 mg/kg),连续21 d。观察肺部形态结节个数。利用q PCR和Western blot分析TETs在3组小鼠中的表达模式。结果与Con组相比,Ure和Ure-HU组体重下降明显。形态学观察显示,Ure组和Ure-HU组均有肺组织病变。q PCR结果显示,在Ure组,TETs表达显著降低(P<0.05)。经过HU处理后,Ure-HU组TET1和TET2表达上升(P<0.05)。Western blot与q PCR结果一致。结论在乌拉坦诱导的小鼠肺癌模型中,TETs蛋白表达模式异常,证明在肺癌发生过程中,TET1和TET2具有重要作用。
- 韩靓韩靓刘殿峰高伟高伟王玲任文陟俞先峰王东旭
- 关键词:小鼠肺癌模型基因表达
- VPA对3T3细胞中多能性转录因子和miR-367的影响研究
- 2015年
- 小分子化合物-丙戊酸(valproic acid,VPA)作为组蛋白去乙酰化酶抑制剂(histone deacetylase inhibitors,HDACIs),能够有效促进体细胞重编程的效率。为了探讨VPA对microRNA和多能性转录因子的影响,首先用MTT法确定VPA的浓度梯度,采用流式细胞术检测VPA对3T3细胞周期的阻滞情况,同时观察细胞形态的变化,并用荧光定量PCR法检测Oct4和Sox2以及miR-367表达量的变化。结果显示,VPA剂量依赖性地抑制3T3细胞的增殖,且随着浓度的升高抑制作用增强,并将细胞周期阻滞在G2/M期。此外,VPA能使Oct4和miR-367的表达量增加。这表明VPA在体细胞重编程中可能介导多能性转录因子Oct4和miR-367的表达来促进重编程效率。
- 许阁阁钟原袁宝陈健任文陟张嘉保刘殿峰俞先峰
- 关键词:重编程
- 超低温损伤诱发装置
- 本实用新型涉及一种超低温损伤诱发装置,属于动物实验领域。金属套与注射器针筒的套针端套接,隔热海绵与注射器针筒的外壁半包围套接,塞子与注射器针筒的活塞端塞接,注射器针筒为PP材质,塞子为透气的棉花纱布团。本实用新型的优点在...
- 权福实张嘉保严永峰李东哲袁宝俞先峰丁瑜高妍
- 文献传递
- ATG10基因作为牛超数排卵性状分子标记的应用
- 本发明公开了ATG10基因作为牛超数排卵性状分子标记的应用,以提取的牛基因组DNA为模板,设计特异性引物一对,克隆牛ATG10基因基因的部分DNA序列,通过测序及基因型分型并将不同基因型与超数排卵性状进行关联分析,为牛的...
- 张嘉保姜昊袁宝陈承祯张明军王鹏高妍金永勋俞先峰付旭煌闫向民罗丹
- 文献传递
- ARHGAP26作为牛超数排卵性状分子标记的应用
- 本发明公开了ARHGAP26作为牛超数排卵性状分子标记的应用,以提取的牛基因组DNA为模板,设计特异性引物一对,克隆牛ARHGAP26基因的部分DNA序列,通过测序及基因型分型并将不同基因型与超数排卵性状进行关联分析,为...
- 姜昊张嘉保袁宝闫向民陈承祯张明军高妍俞先峰金永勋付旭煌罗丹
- 猫实验动物标准化的研究进展及探讨被引量:15
- 2015年
- 猫作为实验用动物在医学、生物学等研究领域的应用越来越广泛,在某些实验中,如降压实验、作为弱视动物模型及高眼压动物模型等方面具有不可替代的作用。随着国内科研对猫使用量的增多,实验用猫多是从商贩或"收购型饲养场"购买,其来源混杂,遗传、年龄、微生物和寄生虫等携带情况不明,实验重现性差,实验结果存在未知因素的影响。我国在猫标准化方面建设缓慢,已经无法适应实验动物学科的发展及人们对实验动物伦理与福利的需求。本文结合吉林省实验用猫使用情况,对猫实验动物标准化的研究进展及应用前景进行探讨。
- 刘明慧袁宝陈健高巍胡进平俞先峰刘殿峰任文陟
- 秋水仙素条件优化及其对牛卵细胞c-mos基因表达水平的影响
- 2013年
- 为探讨秋水仙素对牛卵母细胞产生细胞膜突起的最适条件与对减数分裂纺锤体组装起重要调控作用的母源基因c-mos表达量的影响,设计如下试验:比较试验组(Deme+sucrose处理)与对照组1(Deme单独处理)和对照组2(sucrose单独处理)的卵母细胞细胞膜突起率变化。用荧光定量检测最适合秋水仙素浓度处理的卵母细胞与空白组和对照组母源基因c-mos基因表达量的差异。结果表明,用0.6mg/L秋水仙素+0.05mol/L蔗糖处理牛卵母细胞1h细胞膜突起率达72.0%,要显著高于对照组1(13.0%)和对照组2(P<0.05);0.6mg/L秋水仙素浓度优于其他质量浓度(P<0.05)。秋水仙素加蔗糖处理的卵母细胞的母源基因c-mos表达高于蔗糖处理组和空白组c-mos基因的表达(P<0.05)。
- 任久生邓琼刘慧玉徐靖博柳思源李付娟俞先峰张嘉保
- 关键词:秋水仙素牛卵母细胞