陆婷
- 作品数:7 被引量:1H指数:1
- 供职机构:苏州大学医学部更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金江苏省自然科学基金江苏省“青蓝工程”基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 人CD13基因克隆及其基因转染细胞株的构建
- 2012年
- 目的克隆人CD13全长cDNA,构建稳定表达人CD13分子的基因转染细胞株。方法提取人外周血单个核细胞总RNA,通过RT-PCR克隆人CD13基因,将人CD13基因重组入逆转录病毒表达载体pEGZ-Term。将重组逆转录病毒载体pEGZ-Term/CD13和辅助病毒载体用脂质体法共转染包装细胞293T,收集含有完整重组逆转录病毒颗粒的293T细胞培养上清感染L929细胞,筛选获得Zeocin抗性的基因转染细胞。结果成功克隆人CD13基因和构建逆转录病毒载体pEGZ。Term/CD13,并成功获得稳定表达人CD13的基因转染细胞株L929/CD13。结论成功克隆了人CD13基因及其逆转录表达载体,成功制备了稳定表达人CD13的基因转染细胞株,为研究CD13生物学功能奠定了基础。
- 杨鹏葛彦陆婷邓云蒋林华殷丽丽居颂文居颂光
- 关键词:CD13APN基因转染细胞株
- 肿瘤微环境因素CD40信号促进脑胶质瘤干细胞侵袭性生长及机制
- 目的:脑胶质瘤是中枢神经系统最常见的恶性肿瘤,易复发、预后差与其依赖肿瘤新生血管的侵袭性生长密切相关.肿瘤微环境因素与肿瘤干细胞共生和依赖对脑胶质瘤侵袭性生长的作用及机制有待阐明.本文探讨肿瘤微环境因素CD40信号对脑胶...
- 居颂光葛彦陆婷宋莉张学光
- 关键词:脑胶质瘤肿瘤干细胞CD40
- 过表达CD133对脑胶质瘤U251细胞生物学行为的影响
- 2013年
- 目的:构建稳定表达人CD133基因的脑胶质瘤U251细胞株,并探讨CD133对U251细胞生物学行为的影响。方法:将人CD133全长cDNA构建入逆转录病毒表达载体pEGZ-Term,包装成逆转录病毒pEGZ-Term-CD133,进而感染脑胶质瘤U251细胞株。流式细胞术及Real-time PCR检测感染后U251细胞CD133分子的表达。细胞计数法、神经球形成实验观察CD133过表达对U251细胞体外的增殖和神经球形成的影响。裸鼠皮下成瘤法检测感染后U251细胞的体内致瘤性。结果:成功构建pEGZ-Term-CD133逆转录病毒表达载体,并获得稳定表达CD133的U251细胞。相比U251-mock、U251细胞,U251-CD133细胞高表达CD133 mRNA[(7 400.2±5 003.4)vs(2.0±1.1)、(1.0±2.2),均P=0.0007)和蛋白。感染pEGZ-Term-CD133对U251细胞的体外增殖并无影响(P>0.05);但在无血清神经干细胞培养条件下,U251-CD133细胞所形成的神经球数量显著高于U251-mock和U251细胞[(34.0±7.5)vs(14.6±2.3)、(11.5±1.3)个,均P<0.01]。接种量为1×105个细胞时,U251-CD133细胞在裸鼠体内的成瘤时间(32 d)少于U251-mock细胞(38 d)、成瘤率更高(100%vs 30%),在第41天时,肿瘤体积显著增大[(180.3±146.8)vs(4.0±0.0)mm3,P=0.003]。结论:CD133分子不影响脑胶质瘤U251细胞的体外增殖,但可促进U251细胞神经球的形成和致瘤性。
- 马晓花葛彦陆婷邓云居颂光张学光
- 关键词:CD133脑胶质瘤U251细胞逆转录病毒致瘤性
- 人LGR5基因克隆及其基因转染细胞株的构建
- 2013年
- 目的克隆人LGR5分子并构建其稳定表达的基因转染细胞株.方法提取人宫颈癌细胞株HeLa细胞总RNA,通过RT-PCR克隆获得人LGR5全长cDNA,将人LGR5全长cDNA重组入逆转录病毒载体pEGZ-term,通过293T细胞的包装获得具有感染力的完整重组病毒载体,收集培养上清感染L929细胞,筛选构建稳定表达人LGR5分子的基因转染细胞株.结果成功克隆人LGR5全长cDNA和构建pEGZ/LGR5逆转录病毒表达载体,成功获得稳定表达人LGR5的基因转染细胞株L/LGR5.结论成功克隆了人LGR5基因并构建了稳定表达LGR5分子的基因转染细胞株,为进一步研究LGR5分子的生物学功能奠定了基础.
- 邓云陆婷葛彦居颂文居颂光
- 关键词:LGR5克隆基因转染细胞株
- Rspo1基因转染间充质干细胞株的构建及生物学活性鉴定
- 2013年
- 目的:构建稳定表达Rspo1的基因转染间充质干细胞株。方法将人Rspo1全长cDNA重组入逆转录病毒载体pEGZ-Term,通过与辅助病毒载体共转染293T细胞,包装为具有感染力的完整重组病毒载体,收集培养上清感染间充质干细胞C3H10 T1/2细胞株,筛选获得G418抗性的基因转染细胞,通过RT-PCR与流式细胞术检测感染后C3H10 T1/2细胞Rspo1分子的表达,并采用细胞计数法观察其上清对SW480结肠癌细胞增殖能力的影响。结果成功构建pEGZ-Term/Rspo1逆转录病毒表达载体,获得了稳定表达人Rspo1的基因转染细胞株C3H10/Rspo1,该细胞株上清能促进SW480结肠癌细胞增殖。结论建立了稳定表达Rspo1的基因转染间充质干细胞株,为进一步利用Rspo1和间充质干细胞靶向作用于肠道干细胞救治肠上皮损伤的研究奠定了基础。
- 陆婷葛彦邓云陈伟宋莉曹莎莎居颂文居颂光
- 关键词:间充质干细胞基因转染细胞
- 腹部照射对小鼠肠上皮损伤病理的研究被引量:1
- 2017年
- 目的 建立放射性肠上皮损伤小鼠模型,观察肠上皮损伤病理变化规律.方法 分别以10,12,14,16和18 Gy剂量单纯照射小鼠腹部,筛选最小致死剂量.进而采用18 Gy剂量照射Lgr5-EGFP-ires-CreERT2转基因小鼠,每日观察小鼠体重,并在辐照后0.5、3.5和6d取小鼠小肠,观察小肠的病理学改变规律,如小肠绒毛长度、隐窝数目和G蛋白耦联受体5(LGR5)+肠道干细胞的数量变化.结果 18 Gy为单纯腹部照射建立放射性肠上皮损伤小鼠模型的最小致死剂量;与未处理组相比,腹部照射后小鼠体重逐步减轻、小肠绒毛变短、隐窝数目减少、LGR5+肠隐窝干细胞数量在短时间内迅速减少.结论 实验采用18 Gy剂量单纯辐照小鼠腹部,建立了放射性肠上皮损伤小鼠模型,初步探讨了放射性肠上皮损伤病理规律,为急性放射损伤救治的研究提供了良好的研究模型.
- 陆婷葛彦居颂光居颂文
- 关键词:肠上皮LGR5
- Rspo1基因转染间充质干细胞修复小鼠肠上皮辐射损伤
- 随着核工业的发展,核科学技术的广泛应用以及核恐怖袭击的威胁,如何救治急性辐射损伤成为了当今迫切的需求。肠道对电离辐射十分敏感,肠上皮结构和功能受损是急性辐射性病难以救治的关键因素之一。肠隐窝干细胞及其干细胞龛遭受严重破坏...
- 陆婷
- 关键词:间充质干细胞基因转染肠道干细胞
- 文献传递