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抗菌肽MagaininⅡ多拷贝串联体的设计与构建被引量：1: 2014年; 目的:分析设计抗菌肽MagaininⅡ多拷贝串联体表达质粒并进行构建验证。方法:根据GeneBank中提供的抗菌肽MagaininⅡ氨基酸序列,结合表达菌株毕赤酵母密码子偏爱性,设计出MagaininⅡ的表达序列,并于其两端插入一对同尾酶SalⅠ和XhoⅠ的酶切识别序列及裂解位点AGA,人工合成后插入质粒载体pUC19中,利用同尾酶法构建抗菌肽MagaininⅡ多拷贝串联体。结果:经M13引物进行PCR及SalⅠ/PstⅠ双酶切进行鉴定,成功构建出抗菌肽MagaininⅡ1-5拷贝串联体重组质粒。结论:该研究设计的MagaininⅡ串联体构建方法可行。; 成娟丽李锋王红林金水; 关键词：抗菌肽同尾酶串联体

谷氨酸棒杆菌中苯酚羟化酶的鉴定及功能研究: 2015年; 【目的】鉴定谷氨酸棒状杆菌中ncgl 2588基因编码的苯酚羟化酶,并验证其在苯酚降解中的作用。【方法】构建谷氨酸棒状杆菌ncgl 2588基因缺失突变株,比较突变株和野生型菌株利用苯酚能力的差异;同时将ncgl 2588基因克隆到表达质粒pET28a中并转化入大肠杆菌BL21(DE3),利用IPTG诱导重组菌株原核表达,纯化并测定重组蛋白对苯酚的羟化作用。【结果】成功构建了谷氨酸棒状杆菌ncgl 2588基因缺失突变株,其在以苯酚为惟一碳源和能源的培养基中不能生长,而野生型谷氨酸棒状杆菌能正常生长;pET28a-ncgl 2588重组质粒在大肠杆菌BL21(DE3)中成功表达分子质量为73ku的目的蛋白,此蛋白酶活为0.37mmol/(min·mg);在以苯酚为惟一碳源和能源培养谷氨酸棒状杆菌时,苯酚羟化酶得到最高表达,用其他芳香族化合物培养则苯酚羟化酶表达较少;进化树分析发现,谷氨酸棒状杆菌中的苯酚羟化酶与酵母Trichosporon cutaneum中的苯酚羟化酶序列同源性高达43%,远远高于与细菌中苯酚羟化酶的同源性。【结论】谷氨酸棒状杆菌中的ncgl 2588基因编码苯酚羟化酶,且该酶为可诱导酶,在苯酚降解中发挥着重要作用。; 杨志方肖潇司美茹成娟丽沈锡辉王瑶; 关键词：谷氨酸棒状杆菌基因敲除苯酚羟化酶

细菌烯脂酰ACP还原酶抑制剂的筛选方法: 本发明公开了一种细菌烯脂酰ACP还原酶抑制剂的筛选方法，包括以下步骤：将粪肠球菌的fabK在大肠杆菌中表达，用三氯生抑制和不抑制大肠杆菌重组菌的FabI，构建针对FabK的双平板敏感差异筛选模型；构建绿脓杆菌的fabI基...; 成娟丽林金水王红

辣椒疫霉NPP效应子基因家族生物信息学分析被引量：2: 2014年; NPP（necrosis—inducingPhytophthoraprotein）是一类效应子，在卵菌疫霉属病原菌中普遍存在，该类蛋白能够激发植物的防御反应，如引起植物细胞死亡、促使寄主防御基因表达及产生乙烯。利用生物信息学方法对辣椒疫霉（Phytophthoracapswi）基因组内的NPP基因家族存在状况进行分析，并对其氨基酸序列组成、基本理化性质、蛋白质三级结构等进行预测分析，旨在了解其结构特征，进而发掘辣椒疫霉的致病相关基因。结果表明：NPP基因家族有25个成员，其中大部分成员存在多个拷贝。对25个NPP氨基酸序列进行分析发现，其分子量在12．45—88．9ku之间；对其中15个NPP蛋白进行三级结构预测发现，它们的三维结构类似，其主要的结构元件为“一螺旋和β-片层；构建了25个NPP蛋白的进化树，进行了分子进化分析。; 冯宝珍李培谦成娟丽刘缙; 关键词：辣椒疫霉生物信息学

细菌烯脂酰ACP还原酶抑制剂的筛选方法: 本发明公开了一种细菌烯脂酰ACP还原酶抑制剂的筛选方法，包括以下步骤：将粪肠球菌的fabK在大肠杆菌中表达，用三氯生抑制和不抑制大肠杆菌重组菌的FabI，构建针对FabK的双平板敏感差异筛选模型；构建绿脓杆菌的fabI基...; 成娟丽林金水王红; 文献传递

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