郝慧芳
- 作品数：37 被引量：90H指数：4
- 供职机构：河南省农业科学院更多>>
- 发文基金：国家生猪现代产业技术体系建设项目国家自然科学基金国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 马立克氏病病毒和禽网状内皮组织增生病病毒快速联检试纸条
- 发明公开一种一步法快速检测马立克氏病病毒MDV和禽网状内皮组织增生病病毒REV的试纸条，包括不吸水的支撑层、附着在支撑层上的吸附层，吸附层由样品吸附纤维层、金标抗体纤维层、纤维素膜层及吸水层依次拼接而成；纤维素膜层上标记...
- 罗俊滕蔓张改平崔治中邓瑞广江国托柴书军赵鹏邢广旭李学伍乔松林程娜郝慧芳李青梅金前跃
- 文献传递
- H5N1亚型禽流感病毒核衣壳蛋白(NP)基因的进化及原核表达被引量：4
- 2010年
- 参考GenBank上H5N1亚型禽流感病毒(AIV)的核衣壳蛋白(NP)基因序列设计引物,PCR扩增NP基因,对其进行序列分析并构建分子进化树。将克隆的NP基因插入原核表达载体pET32a,在大肠杆菌中进行诱导表达,对诱导表达的NP重组蛋白进行纯化、Western-Blot鉴定及免疫原性分析。结果表明,克隆的NP基因与GenBank上发表的另外2个河南AIV毒株亲缘关系较近,诱导表达的NP重组蛋白主要以可溶性形式存在,分子量约为70 kDa,并且能够与H5亚型AIV阳性血清发生特异性反应,具有良好的抗原性。
- 邬成业王爱萍郝慧芳史平玲游雷鸣李培培张改平
- 关键词：H5亚型原核表达
- 8株猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF5基因的变异分析被引量：1
- 2013年
- 本研究拟初步了解中原地区近期猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的变异情况。对2011—2012年间从河南及周边省份发病猪场分离的8株PRRSV毒株Nsp2基因变异区进行RT-PCR扩增,同时对主要结构蛋白GP5基因进行克隆测序并与GenBank中登录的中国历年来流行的PRRSV代表毒株的GP5蛋白序列进行遗传进化分析,对主要氨基酸基序进行比对分析。结果表明,2011—2012年在中原地区分离的8株PRRSV分离株均为Nsp2缺失变异株,GP5基因与2006年中国高致病PRRSV代表毒株JXA1同源性较高。
- 刘明阳张改平郝慧芳乔松林万博鲍登克郭成留王爱萍
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF5进化
- H5N1亚型禽流感病毒核衣壳蛋白原核表达条件的优化被引量：1
- 2010年
- 为了提高禽流感核衣壳蛋白(NP)在大肠杆菌中的表达量,试验研究了载体、培养基、温度、转速、诱导时间以及诱导剂IPTG浓度等不同条件对NP融合蛋白表达量的影响。结果:使用LB培养基于37℃培养3.5h后,采用终浓度为2mmol/L的IPTG在28℃、200r/min诱导培养5h,pET32a-NP融合蛋白表达量最大;SDS-PAGE检测结果表明pET32a-NP融合蛋白的分子质量与预计大小一致,约为70ku;Western-blot结果表明,pET32a-NP融合蛋白能与抗His标签的单克隆抗体发生特异性反应,说明NP蛋白得到正确表达。
- 邬成业史平玲张改平郝慧芳王爱萍祁艳华卜丹
- 关键词：禽流感核衣壳蛋白原核表达
- 猪瘟病毒E2蛋白B细胞识别基序的筛选被引量：1
- 2008年
- 根据猪瘟病毒(classical swine fever virus,CSFV)E2蛋白的序列设计并人工合成18条重叠多肽,与载体蛋白BSA偶联后,利用抗CSFV E2蛋白单克隆抗体SWmAb8筛选该蛋白上的B细胞表位;同时用12肽噬菌体随机肽库淘选E2单抗识别多肽序列。结果显示,多肽序列VSPTTLRTEV能被单抗SWmAb8识别;含SPTxLR基序的噬菌体能被单抗SWmAb8结合,且能被病毒抗原竞争性抑制。证实SPTxLR基序很可能是E2蛋白的线性表位之一,可诱导机体产生中和抗体。
- 王爱萍马丽平李姣邓瑞广邢广绪郝慧芳
- 关键词：猪瘟病毒E2蛋白B细胞表位噬菌体随机肽库
- 2014年第1季度猪伪狂犬病流行病学调查及防控建议被引量：3
- 2014年
- 2014年1-3月份,笔者实验室为147个猪场提供了检测技术服务,其中对138个猪场进行了伪狂犬病相关检测。采用gEELISA（美国IDXX试剂盒）方法对3 281份血清进行野毒抗体鉴别诊断,使用PCR方法对61份组织进行病原检测。通过对检测数据的汇总和分析,与2013年相比,2014年第1季度伪狂犬病感染率有上升趋势,防控形势依然严峻。详细情况汇总如下。
- 解伟涛郝慧芳梁跃王楠楠苏运芳乔松林郭成留
- 关键词：伪狂犬病流行病学调查病原检测抗体检测野毒感染
- 禽网状内皮组织增生病病毒快速检测试纸条
- 本发明公开一种快速检测禽网状内皮组织增生病病毒REV的试纸条，包括不吸水的支撑层、附着在支撑层上的吸附层，吸附层由样品吸附纤维层、金标抗体纤维层、纤维素膜层及吸水层依次拼接而成，纤维素膜层上标记有抗羊IgG或抗小鼠IgG...
- 张改平罗俊滕蔓崔治中邓瑞广江国托赵东赵鹏柴书军程娜胡骁飞职爱民杨苏珍卢清侠郝慧芳
- 文献传递
- 口蹄疫3D蛋白N端T细胞表位重组蛋白的表达、纯化及鉴定
- 2012年
- 为获得具有抗原性的口蹄疫病毒(FMDV)3D蛋白N端T细胞表位的重组表达蛋白,根据FMDV3D蛋白前115位氨基酸序列,设计优化并人工合成相应的核酸序列,将其克隆至pET-28a中,构建原核表达质粒pET28a-115,并将重组质粒转化至BL21(DE3)细胞。经IPTG诱导后,收集菌液进行SDS-PAGE和Western-bolt鉴定,结果显示,在16kD处有一条明显的蛋白表达条带。对表达产物进行可溶性分析,结果表达蛋白50%为可溶性蛋白,经Ni-NTA亲和层析纯化后获得了较高浓度和纯度的目的蛋白。研究结果表明,含FMDV 3D蛋白前115位氨基酸的重组蛋白在大肠杆菌中得到了高效可溶性表达,并具有较好的抗原活性,为开发口蹄疫诊断试剂和基因工程疫苗奠定了基础。
- 卢清侠王世红金前跃李清州郝慧芳张改平
- 关键词：口蹄疫原核表达疫苗佐剂
- 一条与猪瘟E0蛋白相结合的多肽序列及其应用
- 本发明主要涉及猪瘟病毒E0结合多肽及其应用，该多肽序列为WRYDQ，是一种线性结合多肽，以多肽序列为核心，可以对此多肽序列的延长和修饰，修饰材料包括但不局限于纳米材料、荧光材料、酶类、生物素及特定蛋白质。本发明借助噬菌体...
- 张改平王方雨赵东郝慧芳滕蔓邓瑞广
- 文献传递
- 鸡B淋巴细胞cDNA T7噬菌体表达文库的构建与鉴定被引量：2
- 2007年
- 目的:构建鸡B淋巴细胞cDNAT7噬菌体表达文库并对文库质量进行鉴定。方法:利用oligo(dT)-纤维素亲和层析从SPF雏鸡法氏囊细胞制备mRNA,合成的双链cDNA定向克隆到T7EcoR I/HindIII载体臂,包装并构建cDNA表达文库。对文库进行滴度测定和重组子测定。扩增文库并进行PCR鉴定插入序列的长度及分布。结果:文库初始滴度为5×107pfu/mL,扩增后滴度达到1.88×1010pfu/mL。插入片段平均长度1440bp,主要分布在750～2000bp之间。结论:构建的鸡B淋巴细胞cDNAT7噬菌体表达文库具有很高的质量,为进一步研究鸡B细胞发育以及传染性法氏囊病毒(IBDV)的分子致病机制奠定了实验基础。
- 张改平张红郭军庆王选年乔松林郝慧芳王丽
- 关键词：CDNA表达文库
