陈建
- 作品数：18 被引量：27H指数：3
- 供职机构：中国兽医药品监察所更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 小反刍兽疫诊断试剂盒
- 本发明涉及小反刍兽疫诊断试剂盒。本发明的检测试剂盒包括基底，以及独立地连接于所述基底上的特定多肽或特定多肽组合。
- 孙淼薛青红陈延飞陈建李岭
- 文献传递
- 小反刍兽疫诊断试剂盒
- 本发明涉及小反刍兽疫诊断试剂盒。本发明的检测试剂盒包括基底，以及独立地连接于所述基底上的特定多肽或特定多肽组合。
- 薛青红孙淼陈延飞陈建李岭
- 文献传递
- 犬细小病毒阳性血清的制备、鉴定和初步应用
- 2023年
- 犬细小病毒(Canine parvovirus,CPV)阳性血清在CPV疫苗制品的效力检验、外源病毒检验和鉴别检验中不可或缺,对CPV相关生物制品的质量控制至关重要,为了制备中和抗体效价高、特异性好的CPV阳性血清,试验用CPV DD株免疫健康易感比格犬2只,经4次免疫后采血分离血清,采用微量细胞中和试验法、免疫荧光法和《中国兽药典》三部附录中无菌检验、支原体检验和外源病毒检验法对血清进行鉴定,将该血清应用在犬类疫苗的外源病毒检验和鉴别检验中,建立了CPV间接免疫荧光检测法(IFA)并应用于疫苗的效力检验(病毒含量测定)中。结果表明制备的CPV阳性血清中和抗体效价高达1∶32768,中和指数>10^(6.2),对犬瘟热病毒、犬副流感病毒和犬腺病毒的中和抗体效价均<1∶4,狂犬病病毒中和抗体效价<0.03 IU/mL。用制备的阳性血清对3种CPV相关活疫苗进行外源病毒检验可完全中和10头份的疫苗毒;对2种CPV相关活疫苗进行鉴别检验,结果符合质量标准规定。利用CPV间接免疫荧光检测法对3种CPV相关活疫苗进行病毒含量测定,结果显示建立的IFA方法对3株疫苗株均有交叉免疫反应,与商品化CPV荧光单抗检测灵敏度差异不大。说明CPV阳性血清中和能力强、特异性好,可用于犬用活疫苗外源病毒检验、鉴别检验和效力检验。
- 陈延飞陈建薛青红李岭孙淼
- 关键词：犬细小病毒阳性血清间接免疫荧光法生物制品
- 基于小反刍兽疫病毒H蛋白的表达、纯化及其间接ELISA方法的建立被引量：1
- 2021年
- 为了建立快速、准确的检测小反刍兽疫病毒抗体的方法,试验从GenBank中下载小反刍兽疫病毒结构蛋白H基因序列,并对其进行分析设计,通过基因合成方法得到相应片段,进一步构建重组质粒,将目的片段插入酵母基因组中,利用酵母表达系统表达目的蛋白并纯化,以纯化后的H蛋白作为包被抗原,建立检测小反刍兽疫病毒抗体的间接ELISA方法,并用该方法对40份阴阳性血清和临床189份样品进行检测,将检测结果分别与中和试验和商品化试剂盒的检测结果进行比较。结果表明:成功构建并表达小反刍兽疫病毒H蛋白。基于H蛋白建立的间接ELISA抗体检测方法对40份阴阳性血清的检测结果与中和试验比较,总符合率为95%(38/40);对临床189份样品的检测结果与商品化试剂盒比较,总符合率为93.12%(176/189)。说明该方法与中和试验及商品化试剂盒检测结果有较好符合度,可以用于小反刍兽疫临床血清抗体的检测及流行病学调查。
- 薛晓茵朱文壮孙淼陈延飞陈建孟赓薛青红
- 关键词：小反刍兽疫病毒酵母表达蛋白纯化间接ELISA符合率
- 鸡传染性法氏囊病病毒BC6/85株VP2基因的原核表达、纯化及鉴定被引量：6
- 2015年
- 为获得可用于鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)抗体检测的重组抗原VP2蛋白,根据GenBank中发表的IBDV VP2序列设计一对特异性引物,应用RT-PCR技术克隆IBDV经典标准攻毒株(BC6/85株)的VP2基因,插入质粒pET-32a中构建重组表达质粒pET-32a-VP2,经IPTG诱导后获得了以包涵体形式表达的重组蛋白。重组蛋白纯化后,Western-blot检测表明具有良好的反应原性。本研究为下步建立IBDV抗体的间接ELISA方法及新型疫苗的研制奠定了基础。
- 刘丹杨承槐吴华伟李启红高金源陈建郎洪武
- 关键词：鸡传染性法氏囊病病毒VP2基因克隆原核表达
- 细胞源猪瘟活疫苗E2基因遗传稳定性和免疫原性分析
- 2023年
- 测定了中国4个细胞源猪瘟活疫苗(C株)E2基因全序列,将其与GenBank上13个猪瘟病毒的E2基因序列(含C株原始毒株、7个猪瘟病毒C株以及国际上5个主要猪瘟活疫苗毒株的E2基因全序列)进行了核苷酸序列、推导的氨基酸序列进行遗传变异分析,通过生物信息学手段对预测的E2蛋白N-糖基化位点、E2蛋白磷酸化位点和理化特性以及模拟的蛋白空间结构进行了比较,并通过免疫攻毒试验对4个细胞源猪瘟疫苗(C株)的免疫效果进行了验证。结果表明,与猪瘟病毒C株原始种毒相比,尽管中国4个细胞源猪瘟活疫苗的E2基因核苷酸序列、推导的E2蛋白氨基酸序列或模拟的三维结构等发生个别核苷酸变异、个别氨基酸位点突变或缺失,但均不影响猪瘟C株的免疫原性,猪瘟疫苗C株仍然是防控猪瘟的最有效武器。
- 吴华伟陈晓春黄小洁刘丹邓永秦义娴高金源薛青红孙淼陈建陈延飞
- 关键词：猪瘟细胞源活疫苗E2基因同源性免疫原性
- 我国宠物用病毒类生物制品质量情况分析与建议被引量：1
- 2021年
- 对2008-2020年我国宠物用病毒类生物制品质量情况进行总结,分析了宠物用病毒类生物制品质量检验中发现的问题,提出了完善兽用狂犬病灭活疫苗效力检验方法、加强纯净性检验方法研究、建立以单抗为基础的宠物用标准物质库、加快宠物用制品重点品种研制等提升宠物用病毒类制品质量和研究的建议。
- 吴华伟秦义娴陈晓春高金源孙淼薛青红陈建陈延飞高月异李岭
- 关键词：宠物
- 兔出血症病毒两种感染途径的致死性比较研究被引量：1
- 2015年
- 为提高猪瘟活疫苗的外源性兔出血症病毒(RHDV)的检测敏感性,进行了RHDV对家兔感染途径的致死性比较试验,以便筛选出具有较高致死性的感染途径。将RHDV通过皮下、静脉两种途径感染家兔,比较了家兔两种感染途径的半数致死量(LD_(50)),同时对1批污染RHDV的脾淋源猪瘟活疫苗采用皮下、静脉两种途径注射家兔进行RHDV检测。结果表明,静脉途径对家兔的LD_(50)是皮下途径的126倍;污染疫苗的检测应用也表明家兔感染的静脉途径比皮下途径更加敏感,提高了猪瘟活疫苗外源性RHDV污染的检出率;RT-PCR证实了注苗死亡家兔的肝脏组织含有RHDV。本试验可为《中国兽药典》的修订提供数据参考。
- 高金源陈建刘丹郎洪武徐少平蒋桃珍
- 关键词：兔出血症病毒半数致死量
- 一种对多种牛的疫病进行联检的基因芯片以及试剂盒
- 本发明涉及一种核酸序列，以及用于对牛的疫病进行检测的基因芯片，其包括反应孔板，其中在每个反应孔中点样针对多种牛的疫病的核酸序列、阳性对照、阴性对照和空白对照；本发明另外涉及包括该基因芯片的检测试剂盒。
- 薛青红孙淼才学鹏陈建陈延飞李岭
- 文献传递
- 猪圆环病毒2型田间分离株的全基因组克隆与基因亚型分析被引量：4
- 2014年
- 为了解我国猪圆环病毒2型（ PCV2）的流行态势和毒株的基因变异情况，从北京、江苏、湖北等地疑似断奶仔猪多系统综合征（ P MWS ）患病死亡猪中采集肺脏、脾脏和淋巴结等组织，将PCR鉴定为阳性的病料在PK－15细胞上进行增殖培养，成功分离到6株猪圆环病毒2型毒株，分别命名为B07、B12、HB、LHW、LPC和NJ。对其全基因组进行克隆和序列分析的结果显示，LPC基因组全长为1766 bp，其余均为1767 bp；6个毒株序列之间同源性高达96．0％～99．9％，6个毒株与参考毒株序列的同源性为94．4％～99．8％。 PCV2全基因组的进化分析结果表明，B12、HB、LHW、LPC和NJ为PCV2b亚型，B07为PCV2d亚型，从而证实PCV2b亚型毒株成为我国猪群中分离率较高的流行毒株，并且我国猪群存在PCV2d亚型毒株。
- 郎洪武刘丹陈晓春方超高金源吴华伟邓永陈建
- 关键词：猪圆环病毒2型全基因组
