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慢病毒GFP质粒的构建及脂质体介导鸡胚细胞中瞬时表达动力学初步研究被引量：1: 2008年; GFP(green fluorescent protein)是一种用于检测细胞的基因表达和蛋白定位的报告基因,pLenti6/V5-D-TOPO是高效的慢病毒类表达载体。实验利用PCR(polymerase chain reaction)从质粒pEGFP-N1中扩增了EGFP基因片段,再利用高效、快速、定向的TOPO克隆法将扩增片段克隆到pLenti6/V5-D-TOPO载体中,构建了既能高效转染细胞又能方便观察蛋白表达情况的pLEGFP重组载体。通过PCR法鉴定及瞬时转染,结果显示,GFP基因正确地插入载体中,并能够在Hela细胞及鸡胚X期细胞中瞬时表达,但重组和对照质粒瞬时转染效果存在明显差异。通过该研究证实分子量大小、质粒和脂质体比例是影响转染的关键因素,也为转基因的研究提供了一种方法。; 李建国范睿蔡亚非; 关键词：慢病毒载体 GFP HELA细胞

生物膜融合研究进展: 2008年; 生物膜的融合是一个基本的生命过程,在生物的生长发育中有着重要作用。通过融合,两套独立的双层脂分子合二为一,完成一定的生物功能。膜融合分子机制的关键在于其主要成分融合蛋白。I、II类病毒融合蛋白形成"发夹",胞内囊泡与目标膜各提供的融合蛋白形成"类亮氨酸拉链"。这些结构将独立的膜拉近,继而促使他们合为一体。细胞与细胞间融合蛋白的作用机制目前还未明确。在各种膜融合中,脂双层的变化可能是类似的,但介导融合的分子机制应该是不同的。目前,对于膜融合很多方面的理解还停留在假说阶段。理解了膜融合的过程和分子机制不仅极大地促进生物学的发展,而且为相关的疾病治疗打下坚实的基础。; 李君李建国; 关键词：膜融合分子机制融合蛋白

镉诱导小鼠睾丸细胞凋亡与Caspase-3、Bcl-2和Bax mRNA的表达被引量：6: 2008年; 一个月大雄性小鼠24只,随机分为6组,用30μmol/kgCdCl2作用小鼠睾丸不同的时间(3h、6h、12h、18h、24h)后,利用DNA电泳、免疫组化和半定量RT-PCR技术,分析生殖细胞凋亡过程中三种关键物质Caspase-3、Bcl-2、Bax蛋白和mRNA的表达量变化。结果显示:1)DNA各组(除对照组外)均出现不同程度断裂。2)Caspase-3蛋白表达量一直上升,与对照组相比差异极显著;Bax蛋白在12h前一直上升,与对照组相比差异显著,12h后又开始下降,且与对照组相比无显著差异;Bcl-2蛋白在下降,与对照组相比差异显著。3)RT-PCR结果显示Caspase-3基因表达量减少;Bax基因表达量逐渐上升;Bcl-2基因表达量波动很大。综上所述,Caspase-3、Bcl-2和Bax三个基因可能参与了镉应激状态下小鼠睾丸组织细胞的凋亡过程。; 王小康蔡亚非张凯范睿李建国吴国良王根林; 关键词：CASPASE-3 BCL-2 BAX 镉细胞凋亡

含PGK启动子慢病毒表达质粒的构建与鉴定被引量：1: 2009年; 为了构建一个含有人源PGK1(human phosphoglycerate kinase 1)启动子的慢病毒表达载体pL-PGK-GFP.采用PCR从人组织中扩增PGK1基因的启动子部分,再用酶切-连接的方法将扩增的启动子区片段亚克隆入慢病毒表达质粒pL-EGFP中,再用测序、酶切和瞬时表达的方法进行鉴定.结果是下游的eGFP基因在PGK1启动子驱动下,在293FT细胞中表达绿色荧光蛋白报告基因,这表明成功构建了慢病毒表达质粒pL-PGK-GFP.扩增的537bp PGK1启动子片段具有一定的启动效率,能在HIV来源的慢病毒载体中驱动下游目的基因的表达.; 周军智邹永康李建国刘楠乔蔡亚非王根林; 关键词：慢病毒载体基因表达

膜融合机制研究进展: 2009年; 膜的融合是一个基本的生命过程,在生物的生长发育中有着重要作用。通过融合,两套独立的双层脂分子合二为一,完成一定的生物功能。膜融合分子机制的关键在于其主要成分:融合蛋白。Ι、Ⅱ类病毒融合蛋白形成"发夹",胞内囊泡与目标膜各提供的融合蛋白形成"类亮氨酸拉链",这些结构将独立的膜拉近,继而促使膜合为一体。细胞与细胞间融合蛋白的作用机制目前还未明确,在各种膜融合中,脂双层的变化可能是类似的,但介导融合的分子机制应该是不同的。目前,对于膜融合很多方面的理解还停留在假说阶段。理解了膜融合的过程和分子机制不仅将极大地促进生物学的发展,更重要是将为相关的疾病治疗打下坚实的基础。; 李建国王小康周军智蔡亚非; 关键词：膜融合分子机制融合蛋白

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李建国