康耀海
- 作品数：3 被引量：2H指数：1
- 供职机构：沈阳农业大学林学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金辽宁省教育厅高等学校科学研究项目更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 羽衣甘蓝SSR反应体系的优化被引量：1
- 2014年
- 为优化羽衣甘蓝(Brassica oleracea var.acephala)SSR反应体系,并利用优化的体系进行引物的筛选。采用单因素完全随机试验筛选各反应因素的最佳水平,并采用L16(45)正交设计进行试验优化,建立了羽衣甘蓝SSR-PCR最佳反应体系。结果表明,各因素不同水平浓度对扩增结果均有一定影响,羽衣甘蓝基因组DNA的最佳SSR反应体系为DNA模板量(50 ng/μL)1.0μL,10×PCR Buffer 1.0μL,引物量(2.0μmol/L)上下游各3.0μL,dNTPs(2.5 mmol/L)0.8μL,Taq聚合酶(5 U/μL)0.2μL,ddH2O 1.0μL,总体积10μL。检测了优化体系的稳定性,利用优化的反应体系对芸薹属植物20对SSR引物进行扩增并用聚丙烯酰胺凝胶电泳检测,在所选用的20对引物中,18对扩增出了清晰的条带,11对具有特异扩增条带,多态性引物比率为61%,验证了该体系可用于羽衣甘蓝SSR-PCR扩增和SSR引物的筛选。
- 刘畅祝朋芳房霞康耀海赵颖
- 关键词：OLERACEAVARSSR
- 羽衣甘蓝SRAP体系建立与优化
- 2014年
- 以羽衣甘蓝基因组DNA为模板,对相关序列扩增多态性聚合酶链式反应(SRAPPCR)体系的各影响因子进行了单因素梯度设置,并优化了反应程序,筛选和建立了可扩增多态性高、重复性好、带型清晰的最佳SRAP反应体系和程序。结果表明:羽衣甘蓝最佳SRAP-PCR反应体系总体积10μL,包含DNA模板50ng,1×buffer,dNTPs 0.20mmol/L,Taq酶1U,引物各0.60μmol/L。羽衣甘蓝最佳SRAP-PCR反应程序为94℃预变性5min,94℃变性30s,35℃退火30s,72℃延伸30s,5个循环;94℃变性30s,50℃退火30s,72℃延伸30s,35个循环;72℃终延伸7min,4℃保存。经22个羽衣甘蓝F2群体单株对上述优化的反应体系和程序进行验证,均获得了多态性丰富、条带清晰的扩增图谱,表明该程序和体系能很好地满足羽衣甘蓝基因组SRAP扩增要求。
- 祝朋芳康耀海黄娟娟房霞刘畅赵颖
- 关键词：羽衣甘蓝SRAP标记
- 粉色叶羽衣甘蓝花青素提取效应分析被引量：1
- 2012年
- 以粉色叶羽衣甘蓝自交系为试材,采用盐酸乙醇提取法,对粉色叶羽衣甘蓝花青素提取效应进行了研究。结果表明:粉色叶羽衣甘蓝花青素浸提液在波长536nm处有最大吸收峰;60℃恒温浸提60min效果最好;提取液pH对花青素影响明显,pH为2时效果最佳;最适宜的提取步骤是15mL提取液提取1次。
- 祝朋芳房霞黄娟娟康耀海富宇张健
- 关键词：羽衣甘蓝花青素
