高燕萍
- 作品数：1 被引量：1H指数：1
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- 微RNA-129表达对食管鳞癌细胞增殖、凋亡和细胞周期的影响及其分子机制被引量：1
- 2016年
- 目的分析微RNA-129(mi R-129)表达对食管鳞癌(ESCC)细胞增殖、凋亡和细胞周期的影响及可能的分子机制。方法构建mi R-129过表达载体(p GCMV/EGFP/mi R-129)和对照载体(p GCMV/EGFP/mi R-NC),分别稳定转染ESCC细胞Eca109和EC9706,实时定量PCR检测mi R-129表达水平;MTT法、克隆形成实验和流式细胞术分别检测mi R-129表达对食管癌细胞体外增殖活性、细胞凋亡率和细胞周期的影响;构建含有Bcl-2基因3′-UTR野生和突变序列的荧光素酶报告基因载体,分别与p GCMV/EGFP/mi R-129共转染人ESCC细胞Eca109,双重荧光素酶报告基因实验分析荧光素酶活性变化;Western蛋白质印迹法检测Bcl-2、激活型胱天蛋白酶3及总胱天蛋白酶3蛋白表达水平。结果 mi R-129过表达可显著抑制食管癌细胞增殖(P<0.01),增加细胞凋亡率(P<0.05),并诱导细胞G0/G1期比例增加和S期比例降低(P<0.05),G2/M期比例则无显著变化。荧光素酶报告基因实验分析结果表明,mi R-129可显著降低含有Bcl-2基因3′-UTR野生序列的荧光素酶活性,而不降低含有Bcl-2基因3′-UTR突变序列的荧光素酶活性。Western蛋白质印迹法检测结果提示,mi R-129过表达可显著降低ESCC细胞中Bcl-2蛋白表达,增加激活型胱天蛋白酶3蛋白水平(P<0.05),总胱天蛋白酶3蛋白表达水平无明显变化。结论 mi R-129可能通过靶向调控Bcl-2表达而影响ESCC细胞增殖活性、凋亡和细胞周期的变化,为mi R-129成为ESCC临床治疗的分子靶标提供了实验依据。
- 李青峰高燕萍吴勉华
- 关键词：MI食管鳞癌BCL-2
