陈立芳
- 作品数：2 被引量：2H指数：1
- 供职机构：吉林农业大学动物科学技术学院更多>>
- 发文基金：吉林省教育厅科研项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 大肠杆菌多重耐药调控基因evgS的克隆及其原核表达被引量：2
- 2011年
- 以大肠杆菌ATCC25922的基因组为模板,根据GenBank中大肠杆菌的evgS基因序列设计引物,PCR扩增出约894 bp的基因片段,将所得片段与pMD18-T simple vector连接,转化至大肠杆菌JM109中,筛选阳性克隆,其质粒中插入序列测序结果与GenBank中报道一致。提取阳性克隆质粒,经EcoRⅠ和XhoⅠ双酶切,回收目的片段,定向克隆到pET-28a原核表达载体中,提取阳性质粒,转化至大肠杆菌BL21(DE3)中,获得阳性克隆。经IPTG诱导阳性菌,收集表达产物,通过SDS-PAGE分析证实,pET-28a-evgS可成功地在大肠杆菌中表达EvgS蛋白。Western-blot检测证明,表达产物具有良好的反应原性。
- 刘树明马红霞陈立芳刘玉堂
- 关键词：大肠杆菌克隆原核表达
- 大肠杆菌多重耐药调控基因rob的原核表达及其表达蛋白多克隆抗体的制备
- 2010年
- 提取阳性克隆质粒pMD18-T-rob,经SacⅠ+XhoⅠ双酶切,回收目的片段,定向克隆到pET-28a(+)原核表达载体中,提取阳性质粒,转化至大肠杆菌BL21(DE3)中,获得阳性克隆。经IPTG诱导阳性菌,收集表达产物,SDS-PAGE分析证实pET-28a-rob可成功地在大肠杆菌中表达出Rob蛋白。Western-blot分析证明,Rob蛋白具有良好的反应原性。表达出的Rob蛋白经侧带法纯化后免疫獭兔3次,制备抗Rob蛋白的多克隆抗体。通过间接ELISA方法检测抗体效价,结果表明抗体血清1∶40稀释时抗体效价较高。
- 陈立芳马红霞刘玉堂刘树明
- 关键词：大肠杆菌原核表达多克隆抗体
