赵宏翠
- 作品数：2 被引量：0H指数：0
- 供职机构：东北林业大学生命科学学院林木遗传育种与生物技术教育部重点实验室更多>>
- 发文基金：国家林业科技支撑计划项目国家教育部博士点基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 绒毛白蜡NADH还原酶第二亚基(NDHB)基因片段的克隆及同源性分析
- 2009年
- 克隆并分析绒毛白蜡NADH还原酶第二亚基(NDHB)基因片段。根据GenBank上已发表的NDHB氨基酸序列,设计合成了一对简并引物,采用RT-PCR技术对绒毛白蜡NADH还原酶第二亚基基因进行扩增,将扩增的PCR产物与pMD18-T连接后转化至E.coli JM109感受态细胞,检测阳性克隆,测序并进行序列分析。克隆的绒毛白蜡NADH还原酶第二亚基基因cDNA序列长893bp,由288个氨基酸残基组成,命名为FvndhB。序列比对结果表明FvndhB与参考的8个物种的NDHB在核酸水平上表现出较高的同源性,其与桑树、银白杨、桉树、烟草、拟南芥、银杏、台东苏铁、日本柳杉NDHB核苷酸序列同源性分别为84.32%、83.88%、83.43%、82.86%、82.18%、78.82%、77.07%、71.23%。利用DNAMAN软件构建的系统进化树显示绒毛白蜡与其他植物亲缘关系较远。成功获得了绒毛白蜡FvndhB基因片段,并对其进行了同源性分析,为进一步克隆绒毛白蜡FvndhB全长基因及分析其表达特性奠定了基础。
- 赵宏翠曾凡锁詹亚光
- 关键词：绒毛白蜡
- 抗体夹心BGT-ELISA方法的建立及在转基因白桦中的应用
- 2010年
- 以蜘蛛杀虫肽与Bt-toxinC肽融合蛋白基因(bgt基因)的表达产物的定量分析为研究目标,采用原核表达及纯化出融合蛋白His-BGT作为抗原进行兔免疫,得到相应的抗血清,采用ELISA法检测效价在1:10000以上,并对抗血清进行了免疫亲和层析,获得了高纯度的IgG,Westernblot检测具有较好的特异性。采用过碘酸钠法将抗体标记辣根过氧化物酶(HRP),得到第二抗体即酶标抗体,标记率在85%以上。建立起检测BGT杀虫蛋白的快速、灵敏的方法。应用该检测方法,分析了不同转基因白桦(BetulaplatyphyllaSuk.)株系中BGT蛋白含量占叶片可溶性总蛋白含量的0.05%～0.3%,并利用Westernblot验证了此方法是可靠的。说明抗体夹心BGT-ELISA方法能够定量分析转基因植株中BGT蛋白的含量,为转bgt基因植物的检测和应用奠定了基础。
- 曾凡锁骆薇赵宏翠詹亚光孙东
- 关键词：转基因白桦多克隆抗体酶标抗体酶联免疫
