杜锐
- 作品数：2 被引量：2H指数：1
- 供职机构：第四军医大学西京医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- ER-β基因RNA干扰重组表达载体的构建及鉴定
- 2007年
- 目的:构建针对人雌激素受体-β(estrogen receptor-β,ER-β)基因的小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)真核表达载体质粒。方法:根据GeneBank数据库提供的ER-β基因核苷酸序列,选择设计能转录小发卡结构RNA的DNA序列,将此双链DNA片段克隆至载体pSilencer3.1-H1-neo中构建重组表达载体,转化DH5α菌株,提取质粒进行序列测定。结果:经测序证明与设计的相同,获得人ER-β基因的siRNA表达载体质粒。结论:成功构建了针对ER-β基因的RNA干扰重组表达载体,为下一步ER-β基因的RNA干扰奠定了基础。
- 梁莉丁寅余继锋王燕杜锐王光
- 关键词：ER-ΒRNA干扰质粒小干扰RNA
- 雌激素受体β基因小干扰RNA表达载体的构建及表达研究被引量：2
- 2007年
- 目的构建针对人雌激素受体(estrogen receptor,ER)β基因的小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)真核表达载体,转染人牙周膜成纤维细胞(human periodontal ligament fibroblast cells,HPLFs)后观察其对ER-β基因表达的抑制作用。方法设计并合成针对ER-β基因siRNA的寡核苷酸序列,插入载体pSilencer3.1-H1-neo中形成重组载体。重组载体经测序鉴定后转染HPLFs,western blot检测转染前后ER-β蛋白的表达情况。结果测序结果与所合成的寡核苷酸完全一致,证实成功构建了针对ER-β基因的siRNA表达载体。Western blot检测显示转染HPLFs后可使其ER-β蛋白表达显著下调。结论针对ER-β基因的siRNA表达载体成功构建,并能有效抑制HPLFs中ER-β基因的表达。
- 梁莉丁寅王燕杜锐余继锋马兆峰
- 关键词：RNA干扰小干扰RNA牙周膜成纤维细胞
