李莹
- 作品数：4 被引量：10H指数：2
- 供职机构：沈阳师范大学化学与生命科学学院更多>>
- 发文基金：辽宁省自然科学基金国家自然科学基金辽宁省教育厅高校重点实验室项目更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 高粱微卫星两种PAGE银染方法的比较被引量：5
- 2010年
- 实验比较了高粱SSR-PCR产物聚丙烯酰胺凝胶电泳2种改良银染方法,为初次实验时选择银染方法提供参考。采用非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳,对高粱抗丝黑穗病(恢复系分离群体2381R/矮四)SSR-PCR产物进行检测,分别利用改良过的硝酸银染色方法和改良过的银氨染色方法进行染色,分析2种染色方法的特点。实验结果表明,改良过的硝酸银染色具有操作时间较短、背景颜色浅等优点,适合大量筛选引物时的染色方法;改良过的银氨染色方法具有灵敏度高,显像效果好等优点,适用于基因定位等研究。为今后利用SSR-PCR标记技术研究分析高粱抗丝黑穗病奠定了基础。
- 牛楠陆丹李莹
- 关键词：高粱微卫星非变性聚丙烯酰胺凝胶银染
- 水稻基因组DNA总甲基化水平测定方法被引量：2
- 2011年
- 对高效液相色谱法测定DNA总甲基化水平的关键因素进行研究,即基因组DNA的提取及纯化和高效液相色谱条件的选择。结果表明:CTAB法Ⅰ提取和纯化效果优于CTAB法Ⅱ;较优高效液相色谱条件为:采用Diamonsil C18(2)(250 mm×4.6 mm,5μm)的色谱柱,以甲醇-10 mmol/L磷酸二氢钾(10-90,v/v)为流动相构成,流动相pH为4.7,流速为0.5 mL/min,柱温为30℃,紫外检测器波长为285 nm时,是分离胞嘧啶和5-甲基胞嘧啶的较优条件。以试验优化的DNA提取方法和HPLC色谱条件,基因组DNA水解液的胞嘧啶(C)和5-甲基胞嘧啶(5 mC)可得到较好的分离效果。
- 陈强辛士刚王俊伟徐昕李莹李雪梅
- 关键词：DNA甲基化高效液相色谱法胞嘧啶流动相
- 小麦atpC基因植物超量表达载体的构建被引量：2
- 2011年
- 线粒体ATP合成酶是氧化磷酸化过程中ATP合成起关键作用的多亚基复合体,但近来发现它们在植物应对非生物胁迫反应中起着十分重要的作用。因此,对ATP合成酶的各亚基基因功能的研究有助于阐释其在植物逆境条件下的调节机制,并为研究植物抗逆和防卫反应提供新的途径。线粒体ATP合成酶是能量代谢的关键酶,参与氧化磷酸化反应。atpC基因所编码的线粒体ATP合成酶γ亚基是线粒体ATP合成酶的功能亚基。为了进一步研究它在胁迫反应中的功能,以小麦cDNA为模板,通过RT-PCR方法扩增出atpC基因。将该基因的cDNA编码序列连接到pCAMBIA1301中,成功构建了小麦pCAMBIA-atpC植物超量表达载体,为后续的转基因研究奠定了基础。
- 关尔鑫魏鑫李莹王凤涛蔺瑞明徐世昌
- 关键词：小麦ATP合成酶
- 高粱抗丝黑穗病基因SSR反应体系的优化被引量：1
- 2009年
- 目的:以高粱丝黑穗病2381(抗病)、矮四(感病)为材料,以优化SSR反应体系为目的。方法:采用CTAB法提取高粱基因组总DNA,用SSR分子标记技术对其进行多态性扩增,通过对体系中不同的Taq酶浓度、模板浓度、dNTP浓度和引物浓度的梯度分析。结果:建立并优化了的SSR-PCR反应体系为20μl反应体系:dNTP浓度为200μmol/L、Taq酶浓度为1.5U、DNA浓度为100ng和引物浓度为0.4μmol/L。达到了较理想的扩增效果。用该体系对94对SSR引物进行了筛选,其中47对引物扩增出了多态性谱带,其中Xtxp3和Xtxp13在抗感的品种间扩增出了差异谱带。结论:应用优化的SSR反应体系可以对高粱丝黑穗病基因进行分析。
- 李南珠李莹陶思源徐昕
- 关键词：高粱丝黑穗病SSR分子标记
