张丽
- 作品数：2 被引量：2H指数：1
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- PEG10基因对FAK介导的肝癌CAM-DR耐药模型中PI3K/Akt通路的影响被引量：2
- 2015年
- 目的研究化疗药物顺铂(DDP)、5-氟尿嘧啶(5-Fu)、阿霉素(ADM)对PEG10基因稳定表达细胞LO2中FAK介导的肝癌CAM-DR耐药模型中PI3K/Akt通路的影响。方法选择PEG10基因稳定表达LO2细胞株,并构建细胞黏附介导的耐药LO2细胞模型(LO2/CAM-DR细胞),采用不同剂量的顺铂(DDP)、5-氟尿嘧啶(5-Fu)、阿霉素(ADM)作用LO2细胞、LO2/CAM-DR细胞,以及用FAK抑制剂预先干预的LO2/CAM-DR细胞,采用MTT法检测细胞存活率,比较各细胞组中药物的IC50及RI。Western blotting法检测药物作用后细胞中PI3K、AKT、p-AKT蛋白的表达水平;RT-PCR法检测药物处理后细胞中PI3K mRNA水平。结果 LO2细胞、LO2/CAM-DR细胞,以及用FAK抑制剂预先干预的LO2/CAM-DR细胞的存活率均与药物浓度呈负相关,LO2/CAM-DR细胞对药物的敏感性降低,各药作用后IC50均高于LO2细胞,DPP、5-FU和ADM的RI分别为1.345、2.551和2.643。采用FAK抑制剂预先干预的LO2/CAM-DR细胞对药物的敏感性高于LO2/CAM-DR细胞,差异有统计学意义(P<0.05),与LO2细胞相比,差异无统计学意义(P>0.05)。Western blotting检测结果:药物作用后LO2/CAM-DR细胞PI3K、p-AKT的表达水平均高于LO2细胞,差异有统计学意义(P<0.05),采用FAK抑制剂干预后,PI3K、p-AKT的表达水平下降,PI3K mRNA也下降。结论化疗药物与FAK抑制剂的联合使用可以提高化疗药物对肝癌耐药细胞的杀伤作用,下调FAK介导的肝癌CAM-DR耐药模型中PI3K/Akt通路。
- 张海朱燕莉常城李丹张丽余力群方春华胡亚华
- 关键词：FAKPI3K/AKT通路
- Peg10基因在黏着斑激酶介导的肝癌细胞耐药中的作用
- 2015年
- 目的初步探讨Peg10基因与黏着斑激酶(FAK)介导的肝癌细胞耐药(CAM-DR)的关系及分子机制。方法采用MTT法检测5-氟尿嘧啶(5-Fu)、阿霉素(ADR)对LO2细胞、ADR耐药的人肝癌细胞BEL-7404/ADR(7404/ADR)和Peg10基因沉默的siRNA-BEL-7404/ADR(siRNA-7404/ADR)细胞增殖的影响;建立7404/ADR和siRNA-7404/ADR裸鼠荷瘤模型,48只裸鼠随机分为6组,每组8只,A、C、D组注射7404/ADR细胞,B、E、F组注射siRNA-7404/ADR细胞;A、B组尾静脉注射生理盐水,C、E组给予5-Fu,D、F组给予尾静脉注射ADR,测量瘤块体积,RT-PCR检测Peg10基因的表达,Western Blot法检测PEG10、p-FAK、p-JNK、p-ERK和p38MAPK蛋白的表达。两组间比较采用t检验,多组间比较采用单因素方差分析。结果 ADR和5-Fu对siRNA-7404/ADR 24 h的IC50值均较7404/ADR的降低,差异均具有统计学意义(t值分别为7.641,7.560,P值均<0.01)。B、C、D组肿瘤体积较A组小,差异均有统计学意义(P值均<0.05),E、F组肿瘤体积较B组小,差异均具有统计学意义(P值均<0.01);E组与C组比较,F组与D组的肿瘤体积差异亦均有统计学意义(P值均<0.05)。B、E、F组Peg10的mRNA极少表达,C、D组Peg10的mRNA表达较A组有所降低。B组PEG10蛋白极少表达,与A组比较,差异具有统计学意义(P<0.01),其pFAK、p-JNK、p-ERK和p38MAPK蛋白表达与A组比较,差异均有统计学意义(P值均<0.05)。C、D组PEG10、p-FAK、pJNK、p-ERK和p38MAPK蛋白的表达较A组均降低,差异均有统计学意义(P值均<0.05)。E、F组p-FAK、p-JNK、p-ERK和p38MAPK蛋白表达与B组比较,差异均有统计学意义(P值均<0.01),而C组与E组、D组与F组相比,PEG10、p-FAK、p-JNK、p-ERK和p38MAPK蛋白的表达差异亦均有统计学意义(P值均<0.01)。结论 Peg10基因失活后可增加ADR耐药的BEL-7404细胞株对5-Fu和ADR的敏感性,其作用机制可能与其下调p-FAK、p-JNK、p-ERK和p38MAPK蛋白的表达有关。
- 张海常城朱艳莉李丹张丽余力群方春华胡亚华
- 关键词：肝肿瘤抗药性肿瘤RNA小分子干扰
