吴洪波
- 作品数:2 被引量:3H指数:1
- 供职机构:河北农业大学生命科学学院更多>>
- 发文基金:河北省自然科学基金国家自然科学基金河北省应用基础研究计划更多>>
- 相关领域:生物学更多>>
- 小麦ATG8的原核表达及其抗血清制备被引量:3
- 2013年
- 提取小麦品种L10的总RNA,进行反转录,其产物用于探究自噬基因ATG8的生物学功能。用PCR方法克隆ATG8,将克隆的ATG8亚克隆至表达载体PMD19-T,酶切后切胶回收,然后把产物测序鉴定,转化宿主菌E.coliRosetta-gami B(DE3),构建原核表达系统,将融合蛋白纯化后制备其兔抗血清,然后利用Western Blotting技术对兔抗血清进行检测,鉴定了该抗血清的结合特异性。ATG8抗体的成功制备,为小麦中ATG8基因和自噬功能的研究奠定了基础。
- 吴洪波刘刚张路路王冬梅
- 关键词:免疫印迹抗血清融合蛋白原核表达
- 小麦自噬标志分子ATG6的原核表达及其抗血清制备
- 2011年
- 克隆小麦(Triticum aestivum L.)品种‘洛夫林10’(L10)中的ATG6(动物同源物为Beclin1)基因,并构建该基因的原核表达载体,在大肠杆菌中诱导表达融合蛋白,经纯化后制备其兔抗血清。结果表明:从小麦品种L10中克隆获得1个ATG6的片段,长为1326 bp,利用所构建的大肠杆菌表达载体,经IPTG诱导,实现了对ATG6片段在原核系统的特异性表达。经蛋白纯化后,制备了其兔抗血清并通过Western blot鉴定了其特异性。ATG6抗体制备的成功,为小麦中ATG6基因和自噬功能的研究提供了研究基础。
- 刘刚吴洪波王冬梅
- 关键词:免疫印迹抗血清融合蛋白原核表达