卢俊文 作品数:5 被引量:7 H指数:2 供职机构: 上海理工大学医疗器械与食品学院食品科学与工程研究所 更多>> 发文基金: 上海市自然科学基金 国家自然科学基金 教育部留学回国人员科研启动基金 更多>> 相关领域: 轻工技术与工程 化学工程 生物学 更多>>
玻璃珠破碎毕赤酵母条件的优化 被引量:1 2016年 以毕赤酵母的醇氧化酶(AOX)为指标,以玻璃珠破碎法为对象,建立一种简单易行的毕赤酵母细胞的破碎工艺。考察玻璃珠用量、振荡时间、细胞液体积对毕赤酵母释放醇氧化酶的影响,进而利用Box-Behnken设计组合优化这3种因素,以响应面模型和一个2阶多项式方程拟合了这3种影响因素和醇氧化酶比酶活的关系。结果表明:玻璃珠破碎毕赤酵母的最佳条件为0.23 g玻璃珠、1.04 m L细胞液、103 s振荡时间。在最佳破碎条件下,醇氧化酶比酶活为8.86 U/mg。确定了玻璃珠破碎毕赤酵母细胞的条件,而且操作简便,可以同时处理多个样品,为重组毕赤酵母的筛选提供了有效方法。 卢俊文 傅梦月 张建国关键词:毕赤酵母 玻璃珠 响应面优化 重组大肠杆菌表达绿色气球菌丙酮酸氧化酶的条件优化 被引量:3 2018年 本文优化了表达绿色气球菌丙酮酸氧化酶的重组大肠杆菌的诱导条件。优化了诱导温度、诱导剂IPTG浓度、诱导时重组大肠杆菌的浓度、溶氧等条件后发现最佳的诱导条件为25℃、IPTG 0.5 mmol/L、OD_(600)0.5细胞浓度、250 m L摇瓶中50 m L发酵液。该条件下重组大肠杆菌诱导24 h后最终的丙酮酸氧化酶活力达到7 396.9 U/L,与优化前相比提高了4倍,是目前报道的最高水平。本研究结果为大肠杆菌大量表达有活性的丙酮酸氧化酶,以及丙酮酸氧化酶的生产应用奠定了基础。 卢俊文 张薷月 何宣贝 周紫薇 吕嘉猛 施沁怡 张建国关键词:丙酮酸氧化酶 大肠杆菌 发酵优化 米根霉孢子凝聚条件的研究 2017年 米根霉是食品工业中的一种重要微生物。米根霉能产生多种用于食品工业的代谢产物,其菌丝形态对产物的积累有重要影响。传统上,米根霉的菌丝球形成方式是非凝聚型。本研究通过改变培养基的pH值、糖含量等条件,探讨菌丝球的形成方式。利用不同生长状态下的米根霉孢子,测定相对应的电荷和疏水值,得到控制米根霉孢子凝聚的条件。研究结果表明培养基pH 3.0、葡萄糖320 g/L时,在34℃、200 r/min的培养条件下,米根霉孢子达到了最高的凝聚率88.62%。本研究改变了米根霉菌丝球形成的方式,为米根霉等丝状真菌菌丝球的研究提供了一定的基础和依据。 张建国 卢俊文关键词:米根霉 孢子 疏水作用 静电作用 响应面法优化表达丙酮酸氧化酶重组大肠杆菌培养基 被引量:2 2018年 本研究利用响应面法优化重组大肠杆菌的培养基提高了其表达丙酮酸氧化酶的产量。首先,单因素优化实验表明pH、甘油浓度、酵母粉浓度、胰蛋白胨浓度分别为pH 7、0. 3%、1. 2%、0. 6%时有利于重组大肠杆菌表达丙酮酸氧化酶。进而,利用Box-Behnken法对甘油、酵母粉、胰蛋白胨设计三因素三水平实验,通过响应面回归分析,得到模型预测的最优培养基条件。在0. 6%甘油、3. 18%酵母粉和0. 44%胰蛋白胨的培养基条件下重组大肠杆菌产丙酮酸氧化酶有最高活力。验证试验结果丙酮酸氧化酶活力达到(17 194. 9±504. 9) U/L,与模型的预测值相近,比未优化前提高了1. 7倍。本研究结果为丙酮酸氧化酶的大规模生产和工业化应用提供了基础。 姚兵莉 卢俊文 张建国关键词:丙酮酸氧化酶 培养基优化 响应面 静电作用和疏水作用对黑曲霉孢子凝聚的影响 被引量:2 2017年 真菌孢子的凝聚对真菌菌丝球的形成有重要作用,也影响真菌产物的产量。黑曲霉是一种生产多种代谢产物的重要工业微生物。本文以黑曲霉孢子为研究对象,通过磷酸缓冲液处理和溶胀手段改变孢子之间的静电作用和疏水作用,探究了静电作用和疏水作用对黑曲霉孢子凝聚的影响。用磷酸缓冲液处理孢子,去除孢子外层的部分黑色素,减少了孢子的羧基基团以及疏水蛋白,导致孢子间的凝聚增加。孢子的溶胀过程破坏了孢子最外部的疏水蛋白层,减少了孢子间的疏水作用,并使Zeta电位上升,增加孢子的负电荷,使得孢子聚集减少。而未处理的孢子一直展现出较强的凝聚,没有随着pH的升高而显示出显著差异。溶胀孢子的凝聚颗粒随着p H升高而明显变小,表明疏水性降低和电荷的增加导致孢子间凝聚程度减弱,且疏水作用对孢子凝聚的影响大于静电作用。本研究为真菌液态深层发酵过程中菌丝球的形成提供了理论依据。 卢俊文 张良慧 张建国关键词:黑曲霉 黑色素 ZETA电位