刘文慧 作品数:3 被引量:8 H指数:2 供职机构: 浙江大学药学院 更多>> 发文基金: 中国博士后科学基金 国家自然科学基金 国家科技重大专项 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
人血清白蛋白融合技术研究进展 被引量:2 2015年 结合笔者所在课题组的实验研究成果,综述人血清白蛋白融合技术研究进展。人血清白蛋白融合技术是近些年来应用较多的用于改造小分子蛋白和多肽药物的手段。但是众多的研究结果发现将小分子蛋白/多肽和人血清白蛋白融合后会出现一些共性的问题,例如目标蛋白产率低、易降解等。这些共性问题可以通过融合蛋白的优化设计、蛋白酶缺陷宿主的构建、融合基因多拷贝以及与分子伴侣共表达得以解决。 刘文慧 吴敏 沈其 徐迎春 陈枢青关键词:多拷贝 分子伴侣 人CYP3A4与POR和cyt b_5的三重共表达及其条件优化 2013年 目的:研究人CYP3A4与POR和cyt b5用悬浮细胞共表达时的最佳条件。方法:悬浮培养Sf 9细胞,分别摸索摇床的温度、转速、摇瓶中细胞液的量、表面活性剂的加量、细胞的培养时间,以及3种病毒的加量比例等条件,并进行优化;然后,将表达产物制成微粒体后用于睾酮的代谢,并分别测其代谢活性。结果:当恒温摇床的温度为27℃,转速为90 r/min,每250 ml摇瓶中加入80~120 ml细胞密度为5×105个/ml的细胞液,并加入0.1%的PluronicF-68,细胞培养72 h时,最适合细胞的生长和目的蛋白的表达。此时,当3种病毒的加量比例为1∶1∶1时,表达条件最佳,其对底物睾酮代谢的Km值、Vmax和CLint分别为119.6μmol/L、0.52μmol/(min.g蛋白)和4.34 ml/(min.g蛋白)。结论:通过三重共表达CYP3A4、POR、cyt b5,以及对表达条件的优化,提高了目的蛋白的表达量,得到了较高代谢活性的CYP3A4,从而为新药代谢及药物-药物相互作用研究奠定了基础,为药物代谢酶的大量表达提供了可行的方案。 谢章明 刘文慧 徐迎春 陈枢青关键词:细胞色素P450酶系统 氧化还原酶类 药物设计 抗体偶联药物研究进展 被引量:6 2016年 抗体偶联药物(antibody drug conjugates,ADCs)是通过化学键将毒性小分子与单克隆抗体偶联的靶向抗肿瘤药物,其充分利用了抗体的特异性和毒性小分子的高抗肿瘤活性,达到了高效低毒的目的。抗体、连接物以及毒性小分子是ADCs的3个重要组成部分,文章介绍了ADCs制备中靶点选择,抗体小型化和人源化改造,高活性毒性小分子使用,可断开和不可断开连接物的特点以及越来越受关注的定点偶联策略,为ADCs临床前研发提供依据。 赵文彬 刘文慧 徐迎春 潘利强 陈枢青关键词:靶向抗肿瘤药物 抗体 靶点