- 中空纤维离心超滤-UPLC法测定人血浆中游离万古霉素的浓度
- 2024年
- 目的建立中空纤维离心超滤-超高效液相色谱(UPLC)法,用于测定人血浆中游离万古霉素的浓度。方法血浆样本经中空纤维离心超滤技术预处理后,取超滤液10μL直接进行UPLC分析,采用Acquity UPLC BEH C18柱(2.1 mm×50 mm,1.7μm),柱温40℃;检测波长236 nm;以0.3 mL·min^(-1)的流速洗脱,流动相为0.3%甲酸水溶液-乙腈,梯度洗脱。结果万古霉素血浆浓度在0.82~102.00μg·mL^(-1)内线性关系良好(r^(2)=0.9997),检测限为0.20μg·mL^(-1),定量限为0.82μg·mL^(-1),回收率为91.46%~103.06%,日内精密度及日间精密度均<7.0%。结论该方法简便、灵敏,适用于临床血样中游离万古霉素浓度的检测。
- 倪美萍许萌韩三峰许晓佩郭楠
- 关键词：中空纤维万古霉素
- pro-1基因通过DAF-16调控秀丽隐杆线虫的寿命被引量：2
- 2016年
- 目的·用秀丽隐杆线虫(Caenorhabditis elegans)作为模式生物,观察pro-1基因对寿命的影响,并初步探究其影响寿命的机制。方法·在线虫上以RNAi技术定向干扰pro-1基因的表达,随后对pro-1沉默表达后的线虫进行寿命分析,检测其在生长发育、运动、饮食以及生殖能力等方面的变化。进一步用RNAi方法结合线虫体内荧光定位技术以及RT-PCR技术等探究pro-1影响寿命可能的分子机制。结果·与对照组线虫相比,干扰pro-1表达后,沉默组线虫平均寿命延长了14.58%(P=0.002);在TJ356线虫中干扰pro-1表达后,DAF-16明显进入细胞核,且DAF-16下游靶基因如old-1、sod-3、hsp-16.1、mtl-1、ctl-2等的mRNA水平被上调。结论·pro-1基因通过促进DAF-16进入细胞核并上调其下游靶基因的mRNA水平,从而延长秀丽隐杆线虫的寿命。
- 毛玉琴韩三峰王立顺
- 关键词：秀丽隐杆线虫
- 蛋白激酶MPK-1通过DAF-16调控FAT-7抑制脂质累积被引量：1
- 2013年
- 目的探讨蛋白激酶MPK-1对脂质代谢的影响及可能的作用机制。方法用秀丽线虫(C.elegans)作为模式生物,采用RNA干扰(RNAi)技术定向干扰mpk-1,sbp-1、daf-2基因表达,油红O和苏丹黑染色观察线虫脂质含量的变化,洗脱脂肪进行定量分析确定脂肪含量的增减。采用RNAi技术结合对线虫体内特定位置绿色荧光蛋白表达变化的观察,分析MPK-1影响脂肪累积的可能机制。结果干扰mpk-1基因表达后,线虫体内脂肪含量明显增加。荧光显微镜观察发现:脂质合成酶fat-7∷gfp线虫干扰mpk-1基因表达后,荧光增强;表达调控fat-7的转录因子DAF-16荧光蛋白的线虫品系中干扰mpk-1基因表达,可促进DAF-16向核内转移。结论蛋白激酶MPK-1可能通过DAF-16调控FAT-7的活性,抑制脂肪的合成代谢,减少脂质累积。
- 韩三峰黄黎莹王立顺
- 关键词：蛋白激酶脂质RNA干扰秀丽隐杆线虫
- 秀丽隐杆线虫中与衰老相关的DAF-2/IGF-1信号通路研究进展被引量：7
- 2014年
- 衰老是诸多疾病发生的关键因素之一。目前,生物学界关于衰老遗传学的大部分知识和信息都来自于对秀丽隐杆线虫的研究。秀丽隐杆线虫在抗衰老研究中发挥着先锋和主力的作用。DAF-2/IGF-1信号通路是第一个为人类所认识的衰老基因调控机制。该文综述了秀丽隐杆线虫作为模式生物在DAF-2/IGF-1信号通路研究进程中的引领和推动作用,为抗衰老研究提供可借鉴的科研思路和方法。
- 毛玉琴韩三峰王立顺
- 关键词：秀丽隐杆线虫衰老IGF-1
