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陈靖
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氯胺酮诱导小鼠脑皮质神经细胞的凋亡及其机制
2016年
目的探究氯胺酮诱导脑皮质神经细胞的凋亡及其机制。方法分别用30、60、80、100mg/ml氯胺酮分别处理小鼠脑皮质神经细胞6、12、18、24h,采用MTT法检测氯胺酮处理后小鼠皮质神经细胞的凋亡率;用100mg/ml氯胺酮不用时间处理小鼠皮质神经细胞,乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒检测处理前后皮质神经细胞LDH释放率的变化;将不同处理后的神经细胞进行总蛋白提取,Western印迹法检测GSK-3B蛋白的表达;用100mg/ml氯胺酮处理后的小鼠皮质神经细胞18h后采用流式细胞仪检测处理后皮质神经细胞的凋亡。结果30mg/ml的氯胺酮处理6h,细胞的凋亡率仅为(12.4±2.47)%,对照组没有出现细胞凋亡,随着浓度的增加和作用时间的延长,凋亡率逐渐增加;100mg/ml氯胺酮处理24h时小鼠神经细胞的抑制率达到最大值为(58.7±5.86)%。100mg/ml的氯胺酮不用时间处理皮质神经细胞后LDH释放率与氯胺酮作用时间呈正相关,其中18h释放率较大,24h皮质神经细胞的LDH释放率为(192±4.39)%,在6~24h达到最大,约为6h处理的1.8倍。6hGSK-3β蛋白表达量升高,约为对照组的(105.4±4.13)%,12h的GSK-3β蛋白表达量呈现较低水平为(118.7±3.56)%,18h表达量明显升高为(144.7±3.72)%,24h为对照组的(197.3±4.36)%。与对照组相比,氯胺酮处理后的皮质神经细胞出现了大量的凋亡。结论高剂量氯胺酮能够诱发小鼠脑皮质神经细胞凋亡,可能与GSK-3β蛋白激活相关。
肖莉
陈靖
盛崴宣
冯枫
陈立芳
关键词:
氯胺酮
GSK-3Β
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