边金铎
- 作品数：2 被引量：16H指数：2
- 供职机构：浙江中医药大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：浙江省教育厅重点资助项目国家自然科学基金浙江省科技厅新苗人才计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 丹参素对H_2O_2诱导的内皮细胞氧化损伤的保护作用研究被引量：13
- 2012年
- 目的:探讨丹参素对H2O2诱导人脐静脉内皮细胞(HUVEC)氧化损伤的保护作用。方法:采用MTT法测定丹参素对正常和H2O2损伤HUVEC活性的影响,筛选出最低有效剂量,并确定丹参素保护HU-VEC氧化损伤的浓度。通过活体探针标记、流式细胞术定量分析丹参素对损伤HUVEC细胞内活性氧(ROS)和线粒体膜电位的影响。结果:丹参素对正常HUVEC的活性无影响;而丹参素(25、50、250μmol/L)能显著降低H2O2诱导的HUVEC活性,具有一定的剂量依赖性,细胞活性分别为H2O2损伤组的120.72%、177.48%和736.48%(P<0.01)。丹参素可明显降低H2O2诱导的HUVEC内ROS水平(P<0.01)和提高线粒体膜电位(P<0.05,P<0.01)。结论:丹参素对H2O2诱导HUVEC损伤的保护作用可能是通过抑制细胞内ROS产生、减少线粒体膜损伤而发挥抗氧化作用。
- 边金铎邓同乐许健
- 关键词：丹参素内皮细胞H2O2ROS线粒体膜电位
- 大蒜鳞茎蒜氨酸酶基因克隆及其在毕赤酵母中的表达被引量：3
- 2012年
- 目的从大蒜鳞茎中克隆蒜氨酸酶基因,构建蒜氨酸酶真核表达载体,并在毕赤酵母系统中表达,进一步探讨重组蒜氨酸酶的生物学活性。方法利用RT-PCR方法克隆大蒜鳞茎蒜氨酸酶基因,通过pPIczαC载体构建pPIczαC-蒜氨酸酶真核表达质粒,电转化法导入毕赤酵母X-33,筛选阳性克隆,经甲醇诱导后取表达上清进行SDS-PAGE和Western blotting分析。利用丙酮酸法检测重组蒜氨酸酶和提取的天然蒜氨酸酶的活性,Lowry法测2种蒜氨酸酶蛋白质量,通过比活力比较2种酶活性大小。结果从大蒜内克隆出蒜氨酸酶基因,大小为1 500 bp,重组蒜氨酸酶相对分子质量约为5.5×104,存在于毕赤酵母表达上清液中。重组蒜氨酸酶比活力为(82.09±3.89)U/mg,天然蒜氨酸酶比活力为(176.49±5.06)U/mg。结论蒜氨酸酶基因可以在毕赤酵母表达系统中获得表达,重组蒜氨酸酶具有酶活性,但是其活性低于提取的天然蒜氨酸酶。
- 吴晓莉张婷边金铎许健
- 关键词：蒜氨酸酶克隆毕赤酵母RT-PCR
