董志民
- 作品数：35 被引量：95H指数：6
- 供职机构：天津市农业科学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金天津市科技计划天津市农业科技成果转化与推广项目更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生电气工程更多>>
- 一株猪链球菌8型菌株的分离鉴定及其生物学特性研究被引量：6
- 2021年
- 为明确天津市某猪场保育猪疑似发生猪链球菌病的病原菌及其致病力等生物学特性,将猪场一头发病猪扑杀,无菌采集病料于哥伦比亚血琼脂平板上划线培养,对分离的疑似菌株进行形态学观察、生化试验、16S rDNA序列分析和血清型鉴定,确定分离菌株为猪链球菌8型,命名为TJS31。药敏试验结果显示,TJS31株对8种受试药物耐药,4种受试药物中介,1种受试药物敏感。致病性试验结果显示,TJS31株经腹腔接种昆明小鼠,24 h内可以引起小鼠出现精神萎靡、扎堆、呼吸急促、发抖、运动迟缓、死亡等,LD50为1.8×10^(8) CFU/mL。毒力基因检测发现TJS31的毒力基因型为sly^(+)/gdh^(+)/orf2^(+)/gapdh^(+),不携带mrp、epf和fbps基因。研究结果丰富了我国猪链球菌病病原的生物学资料,为猪链球菌8型的防控提供了依据,也为深入开展猪链球菌8型的致病机制和耐药机理奠定了基础。
- 田向学董志民董志民任卫科李富强张莉任卫科崔尚金池晶晶
- 关键词：耐药特性毒力基因
- 贝莱斯芽孢杆菌对金霉素作用下肉鸡生长性能、肠道菌群及其耐药基因的影响研究
- 2024年
- 试验旨在研究在饲粮中添加贝莱斯芽孢杆菌H-7对金霉素作用下肉鸡生长性能、肠道菌群和耐药基因的影响。首先挑选体重相近,性别比例相同,健康状态良好的1日龄雏鸡360羽,分为4个试验组,每组6个重复,每个重复15只,分别饲喂含金霉素0、50、150、250 mg/kg的基础日粮,饲喂28 d,确定对肉鸡肠道菌群影响最大的金霉素剂量和作用。随后挑选1日龄雏鸡450羽,分为5个试验组,每组6个重复,每个重复15只。1~7日龄,前4组饲喂基含150 mg/kg金霉素的日粮,7~35日龄时,分别饲喂含0、10^(8)、10^(9) CFU/kg和10^(10) CFU/kg贝莱斯芽孢杆菌的日粮,同时以1~35日龄均饲喂基础日粮的为空白对照组。结果表明,肉鸡盲肠的菌群结构随着时间和金霉素剂量发生变化。尤其是在生命早期7日龄时,中剂量组(150 mg/kg)中有益菌属Bifidobacterium、Lactobacillus丰度显著降低(P<0.05),肠道常见条件致病菌Enterococcus、Enterobacter的丰度上升,且耐药基因(ARGs)丰度上升。金霉素作用7 d后,在饲粮中添加贝莱斯芽孢杆菌H-7可增加肉鸡体重,但对生长性能无显著影响(P>0.05)。显著增加21日龄肉鸡肠道中Firmicutes的相对丰度(P<0.05),降低Bacteroidetes和Proteobacteria的相对丰度,显著提高F/B值(P<0.05)。贝莱斯芽孢杆菌的添加促进Akkermansia、Ruminococcus、Blautia、Bacillus和Lactobacillus等有益菌属的富集,同时降低了四环素类耐药基因的丰度,有助于改善肉鸡肠道的健康水平。
- 张义楠闫雪赵晨田向学董志民李富强王素英李秀丽
- 关键词：肠道菌群
- ssc-miR-374b-3p在制备抗PDCoV增殖药物中的应用
- 本发明公开了ssc‑miR‑374b‑3p在制备抗PDCoV增殖药物中的应用。属于抗病毒药物技术领域。本发明将增加ssc‑miR‑374b‑3p表达的模拟物和降低ssc‑miR‑374b‑3p表达的抑制剂分别转染至猪小肠...
- 江珊李秀丽鄢明华张莉任卫科董志民李富强王利丽李程池晶晶
- 一种多功能拭子样品采集与收集装置
- 本发明公开了一种多功能拭子样品采集与收集装置，可折断采集装置容纳在过滤装置内，过滤装置卡接在收集装置内，可撕裂塑料膜包覆在收集装置的外壁。本发明公开了一种多功能拭子样品采集与收集装置，能够降低对样品和实验器械的污染，同时...
- 董志民邵家日张莉李秀丽鄢明华任卫科仝雅娜田向学王利丽李富强池晶晶路超江珊李程朱琪
- 文献传递
- 2型猪链球菌天津分离株的鉴定及其遗传特征分析
- 2024年
- 为了解天津市某猪场引起育肥猪神经症状的病原及其特性和遗传特征,本研究采集8份患病猪脑组织样品经细菌分离、形态学观察、gdh基因和cps2J基因的PCR扩增及序列分析,确定8份样品中的分离株均为同一2型猪链球菌(SS2),命名为TJS75。测定其生长曲线、并按照文献方法进行溶血性试验、黏附/侵入试验和对小鼠的致病性试验,分析该SS2分离株特性。结果显示,TJS75菌株经TSB培养6 h~15 h可达对数生长期,对绵羊血红细胞(RBC)具有崩解效果,可黏附并侵入PK-15细胞(黏附率和侵袭率分别为5.16%和7.90%),且感染TJS75株的BALB/c小鼠出现不同程度的行动迟缓、呼吸急促、精神萎靡和神经症状等,经测定其LD50为2.15×107cfu/mL。进一步采用高通量测序,并预测其毒力基因,分析该菌株的遗传特征,结果显示,TJS75菌株基因组全长2368195 bp,GC含量40.88%,含有2299个编码基因,其中有1822、1830和1077个基因分别注释于GO、COG和KEGG数据库,携带的16S r RNA基因序列与国内分离的SS强毒株98HAH33和05ZYH33的亲缘性较近,毒力基因的预测结果显示该菌株携带499种毒力相关基因(编码173种毒力相关因子),依据功能分类,这些毒力基因参与SS2的黏附和侵袭、溶血、促进铁转运、自溶酶的合成、降解胶原酶、唾液酸的合成等。本研究首次分离到携带MRP毒力因子的ST25型SS2,为深入开展SS2 TJS75株的致病机制研究提供了科学依据。
- 董志民李秀丽李秀丽杨春蕾田向学王利丽田向学张莉王利丽张万江池晶晶张东超张莉
- 关键词：猪链球菌2型致病力
- 同时检测猪德尔塔冠状病毒、呼肠孤病毒和猪嵴病毒的核酸组合物、试剂盒及检测方法
- 同时检测猪德尔塔冠状病毒、呼肠孤病毒和猪嵴病毒的核酸组合物、试剂盒及检测方法。本发明属于猪病原检测技术领域，具体涉及同时检测猪德尔塔冠状病毒、呼肠孤病毒和猪嵴病毒的核酸组合物、试剂盒及检测方法。本发明提供的所述核酸组合物...
- 王利丽李秀丽江珊鄢明华路超张莉任卫科董志民田向学朱琪李富强
- 同时检测鸡毒支原体和鸡滑液囊支原体的引物组及应用
- 本发明公开了一种同时检测鸡毒支原体和鸡滑液囊支原体的引物组和应用，属于鸡毒支原体和鸡滑液囊支原体检测技术领域，包括SEQ ID NO.1～SEQ ID NO.6所示的序列，将该序列应用于以上2种病原的检测，具有操作简便、...
- 董志民鄢明华王利丽田向学张莉李秀丽朱琪池晶晶
- PEDV、TGEV与PDCoV S蛋白表位基因三联疫苗的构建及其鉴定
- 2024年
- [目的]构建一种同时预防猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)和猪德尔塔冠状病毒(PDCoV)的三联表位疫苗,以预防上述病原导致的猪的相关疾病。[方法]本研究运用免疫信息学在线软件对3种猪肠道冠状病毒(SeCoVs)的S蛋白B、T细胞表位进行预测分析,构建新的表位肽段,命名为PPT,通过ExPASy、VaxiJen、TMHMM、SOPMA、SOLpro和AlphaFlod2等在线软件对PPT进行生物信息学分析,并利用C-IMMSIM在线软件对其免疫反应进行模拟。通过T2A将PPT与PEDV的COE序列、TGEV的SAD序列及PDCoV的CTD序列连接并构建至真核表达载体pEGFP-N1,经PCR和双酶切鉴定正确后,将获得的重组质粒转染HEK293A细胞,经DAPI染色、CCK8、RT-PCR及Western blotting试验验证重组质粒在体外表达情况。[结果]构建的表位蛋白PPT由17条表位肽段组成,经生物信息学软件分析,该蛋白为非跨膜蛋白,结构稳定,具有抗原性和可溶性,亲水性高,无过敏性。C-IMMSIM结果显示,PPT能引起机体树突状细胞(DC)增加,B、T细胞免疫反应,刺激免疫球蛋白IgG、IgM和细胞因子γ-干扰素(IFN-γ)、白细胞介素-2(IL-2)水平升高。重组质粒经PCR和双酶切鉴定结果显示,分别在3359、2375、1064、944、764和467 bp出现特异性目的条带,与预期相符;重组质粒转染HEK293A细胞后,可见绿色荧光;RT-PCR扩增分别在3359、2375、1064、944、764和467 bp处获得与目的基因大小相符的条带;CCK-8检测结果表明,重组质粒对细胞均无明显毒性作用;Western blotting检测结果显示,分别在31.7、16.1、37.9和27.5 ku处出现与目的蛋白分子质量大小一致的条带,重组质粒成功在HEK293A细胞中表达。[结论]本研究基于计算机软件分析设计的PPT表位蛋白成功构建三联疫苗,且在体外表达,为评价PEDV-TGEV-PDCoV三联表位疫苗的免疫效果提供依据。
- 刘青顾天越包利霞朱凡杰王鑫源刘婷婷朱晓琛鄢明华鄢明华王利丽董志民金天明
- 关键词：S蛋白表位疫苗
- 同时检测猪德尔塔冠状病毒、呼肠孤病毒和猪嵴病毒的核酸组合物、试剂盒及检测方法
- 同时检测猪德尔塔冠状病毒、呼肠孤病毒和猪嵴病毒的核酸组合物、试剂盒及检测方法。本发明属于猪病原检测技术领域，具体涉及同时检测猪德尔塔冠状病毒、呼肠孤病毒和猪嵴病毒的核酸组合物、试剂盒及检测方法。本发明提供的所述核酸组合物...
- 王利丽李秀丽江珊鄢明华路超张莉任卫科董志民田向学朱琪李富强
- 文献传递
- 猪链球菌9型天津株的分离鉴定及其致病性研究
- 猪链球菌是一种重要的人兽共患病原,可引起各日龄段猪群患病,为养殖业带来巨大的经济损失.本实验室人员对天津某猪场送检的病猪进行剖检,采集新鲜病料分离细菌,通过形态学观察、16S rRNA基因序列分析、血清型鉴定、致病力试验...
- 董志民杨春蕾燕晓翠田向学任卫科谭世旭池晶晶李秀丽鄢明华
- 关键词：猪链球菌菌株分离菌株鉴定
