石艳秋
- 作品数：2 被引量：4H指数：2
- 供职机构：石河子大学医学院第一附属医院更多>>
- 发文基金：兵团博士基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 胰高血糖素对胰岛β细胞胰岛素分泌的调节作用及机制被引量：2
- 2017年
- 目的观察胰高血糖素对胰岛β细胞(MIN6细胞株)胰岛素(INS)分泌的调节作用,并探讨其作用机制。方法将培养好的MIN6细胞均转染对环磷酸腺苷(c AMP)敏感的荧光生物传感器DNA质粒ICUE3。转染48 h将细胞随机分为三部分,分别在无糖、低糖(葡萄糖2.8 mmol/L)、高糖(葡萄糖16.7 mmol/L)环境下培养400~600 s,之后各环境下的细胞随机分为四组:0、100、500、1 000 ng/L组,分别用不同浓度(0、100、500、1 000 ng/L)胰高血糖素处理350~600 s。采用荧光共振能量转移技术检测MIN6细胞中c AMP水平,ELISA法检测细胞INS分泌量。结果在无糖环境下,MIN6细胞内c AMP水平及INS分泌量1 000 ng/L组>500 ng/L组>100 ng/L组,各组两两比较差异有统计学意义(P均<0.05)。在低糖、高糖环境下,MIN6细胞内c AMP水平及INS分泌量1 000 ng/L组>500 ng/L组>100 ng/L组>0 ng/L组,各组两两比较差异有统计学意义(P均<0.05);且高糖环境下以上差异更明显。结论胰高血糖素可能以浓度梯度的形式通过升高胰岛β细胞内c AMP水平来促进INS分泌,且该作用有一定的葡萄糖依赖性。
- 石艳秋李军李思源张震孙侃王彦文
- 关键词：胰高血糖素胰岛素胰岛Β细胞环磷酸腺苷
- 荧光共振能量转移技术在检测环磷酸腺苷信号通路对于MIN6细胞胰岛素分泌机制中的作用被引量：2
- 2018年
- 目的探讨不同浓度的胰升血糖素(Glg)在无糖、低糖、高糖的环境下通过环磷酸腺苷(cAMP)信号通路对胰岛素分泌的直接调控作用及机制,基于荧光共振能量转移(FRET)的生物传感器技术可作为一种用来在活细胞上实时定量检测第二信使cAMP水平的方法。方法体外培养MIN6细胞,在葡萄糖0、2.8、16.7 mmol/L下予Glg 0、100、500、1000ng/L干预处理,ELISA检测不同处理下MIN6胞内cAMP量和胰岛素释放量;电转染法将质粒ICUE3转染进入MIN6细胞,用FRET技术检测细胞内cAMP水平。结果 ELISA与FRET技术检测的cAMP含量结果基本相同,印证了FRET检测cAMP的可行性;无糖、低糖及高糖环境下,cAMP含量及胰岛素的分泌量为1000ng/L组高于500、100、0ng/L组,500ng/L组高于100ng/L和0ng/L组;在低糖及高糖环境下,100ng/L组高于0ng/L组(P<0.05),且葡萄糖浓度越高趋势越明显。Pearson相关性分析结果显示,MIN6细胞内cAMP含量与胰岛素分泌量呈正相关(R2=0.559,P<0.01)。结论基于FRET的生物传感器技术可以作为一种用来在活细胞上实时定量检测第二信使cAMP水平的方法。Glg可能以浓度梯度的形式通过上调胰岛β细胞胞内cAMP浓度来促进Ins分泌,有一定的葡萄糖依赖性。
- 石艳秋李军李思源张震丁艳洁
- 关键词：胰升血糖素胰岛素MIN6细胞环磷酸腺苷荧光共振能量转移酶联免疫吸附法
