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不同生长时期罗汉果果实转录因子的转录组分析及酵母单杂交文库的构建被引量：1: 2016年; 目的:研究罗汉果果实中的转录因子(transcription factors,TFs)。方法:在授粉后3、50、70 d(days after flowering,DAF)的罗汉果果实转录组中查询注释为转录因子的所有非重复Unigene,并在表达谱中查找其表达情况;应用Matchmaker Yeast One-Hybrid Library Construction系统构建酵母单杂交c DNA文库。结果:罗汉果表达谱数据中共有38个家族的119个转录因子Unigene具有表达差异,其中以70 DAF/3 DAF和50 DAF/3 DAF组中具有差异表达的转录因子数目较多,且上调和下调的转录因子Unigene数目相近。此外,初步筛选到4个可能参与罗汉果甜苷合成调控的b HLH(basic helix-loop-helix,b HLH)转录因子Unigene(b HLH014、b HLH025、b HLH093、b HLH096)及8个可能参与黄酮类化合物合成调控的MYB转录因子Unigene;成功构建了酵母单杂交文库p GADT7-Rec2-Lib,其库容量为2.3×106 cfu,插入片段的平均长度约为1.5 kbp。结论:转录组数据分析和酵母单杂交实验有助于筛选罗汉果果实中具有调控作用的转录因子。; 张凯伦罗祖良郭玉华石宏武马小军; 关键词：转录因子转录组

一种罗汉果葫芦二烯醇合酶突变体及其构建方法和应用: 本发明涉及一种罗汉果葫芦二烯醇合酶突变体及其构建方法和应用，该突变体可在酵母宿主或植物宿主中将产物葫芦二烯醇的产量提高33.5％，满足了在工业化生产中的应用。; 马小军乔晶罗祖良石宏武崔晟榕廖晶晶

CRISPR/Cas技术及其在发酵菌株上的应用被引量：1: 2018年; 发酵菌株的改良在发酵工业生产上通常是一项非常重要的内容,而传统的驯化模式周期长、效率低、稳定性差且成本高,很难满足工业化快速生产的要求。规律成簇间隔短回文重复Cas(Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats/Cas,CRISPR/Cas)是细菌及古生菌中的一种适应性免疫系统,在此系统上改进的基因编辑技术能实行RNA导向的DNA精准编辑。因而利用CRISPR/Cas基因编辑技术对菌株的快速构建和优化,是一条快速获得高产菌株的新途径。本文综述了CRISPR/Cas系统组成、工作原理、分类以及该技术在发酵菌株上的应用研究进展,并探索了该技术存在的问题以及目前的解决办法,最后对CRISPR/Cas技术在发酵工程上的潜力进行了展望。; 石宏武乔晶崔晟榕马小军; 关键词：发酵菌株

罗汉果环阿屯醇合酶的同源建模、分子对接及催化环化的机理推测被引量：2: 2019年; 环阿屯醇为植物甾醇类化合物,也是诸多甾醇类化合物生物合成的关键前体物质之一,具有抗炎、抗氧化、抗肿瘤、调节胆固醇等多种药理活性。课题组前期克隆了罗汉果环阿屯醇合酶基因(Cycloartenol Synthase,CAS)并对其进行了功能验证(GenBank登录号:HQ128566)。但该酶的催化活性位点及催化机制尚不明确,阻碍了进一步的改造及应用。本研究利用同源建模预测CAS的三维结构,结合分子对接模拟技术分析该酶与底物的相互作用,结果表明,Asp491、Cys492、Cys570、Tyr540、His265是CAS酶上关键的催化位点,Asp491质子化2,3-氧化鲨烯引发四个环化反应形成C20正离子中间体,然后中间体经过一系列的碳正离子重排形成C11正离子中间体,最后通过His265与Tyr540去质子化使得C27与C11原子间形成单键生成产物环阿屯醇。此外,活性空腔内存在大量的疏水氨基酸,则通过疏水作用稳定反应物、中间体结合在活性空腔。该酶活性位点的发现,为今后通过定点突变技术改造酶的活性及调控代谢通路奠定了基础。; 乔晶崔晟榕石宏武罗祖良马小军; 关键词：同源建模分子对接活性位点

bHLH转录因子调控药用植物萜类化合物生物合成的研究进展被引量：15: 2017年; 萜类是种类最多的植物次生代谢产物,具有广泛的药理活性,但含量低是普遍存在的问题。转录因子(transcription factor,TFs)能在转录水平上调控次生代谢合成途径中多个基因的协同表达,与植物的生长发育、形态建成、次生代谢、抗逆反应和激素信号有着密切的关系,其中bHLH类转录因子是最大的转录因子家族之一。随着bHLH转录因子在不同药用植物中被陆续发现,如何在基因工程和代谢工程中应用,提高萜类化合物的产量,实现大规模工业化生产,满足广大患者的需要成为研究的热点。本文主要总结了近年来bHLH转录因子对萜类合成途径的调控作用。; 张凯伦罗祖良郭玉华石宏武马小军; 关键词：萜类化合物

植物药活性成分环阿屯醇药理、生理活性及其研究展望被引量：14: 2017年; 环阿屯醇为植物甾醇类化合物,也是诸多甾醇类化合物生物合成的关键前体物质之一,具有抗炎、抗肿瘤、抗氧化、抗菌、抗阿尔兹海默症等多种活性,且在植物的生长发育过程中扮演重要角色。该文综述了国内外文献关于环阿屯醇药理活性的研究进展,并对环阿屯醇及"环阿屯醇途径"中甾醇类化合物对植物生长发育的影响进行概述,以为其进一步研究与开发应用奠定基础。; 张忠廉罗祖良石宏武张丽霞马小军; 关键词：药理活性生理活性

一种罗汉果葫芦二烯醇合酶突变体及其构建方法和应用: 本发明涉及一种罗汉果葫芦二烯醇合酶突变体及其构建方法和应用，该突变体可在酵母宿主或植物宿主中将产物葫芦二烯醇的产量提高33.5％，满足了在工业化生产中的应用。; 马小军乔晶罗祖良石宏武崔晟榕廖晶晶; 文献传递

外源茉莉素调控植物中萜类化合物生物合成的研究进展被引量：2: 2017年; 萜类化合物是植物中的一类重要的次生代谢产物,在医药、工业和农业生产上扮演着重要的角色。由于一些重要的萜类具有复杂的化学结构以及在植物中的低含量,使其不能低成本地大量生产。因此,利用植物中普遍存在的茉莉素调控机制和外源介导相关转录因子,调控萜类生物合成途径关键酶基因表达,以达到提高目标萜类化合物含量,这已成为研究热点。本文综述了萜类化合物的生物合成途径、响应茉莉素信号且与次生代谢有关的转录因子以及应用茉莉素调控萜类化合物合成的研究进展,探讨了茉莉素调控萜类合成中所面临的问题,并对茉莉素调控萜类生物合成的潜在经济价值进行了展望。; 石宏武罗祖良崔晟榕马小军; 关键词：茉莉素萜类化合物转录因子

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石宏武