杨景超
- 作品数：1 被引量：1H指数：1
- 供职机构：中山大学公共卫生学院更多>>
- 发文基金：广东省科技计划工业攻关项目更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 大鼠胚胎上胚层干细胞的分离培养研究被引量：1
- 2015年
- 目的获取SD大鼠胚胎中附植后的胚胎上胚层干细胞(Epi SCs),并就影响SD大鼠Epi SCs(SDEpi SCs)分离与培养的组织来源、胎龄、细胞因子等条件进行探讨,从而探索适宜SD大鼠Epi SCs分离培养的实验体系,为下一步SD大鼠Epi SCs的建系提供实验研究基础。方法以昆明小鼠胚胎成纤维细胞为饲养层,分别取5.5日胎龄的囊胚和7.5日胎龄囊胚上胚层(Epiblast),用添加白血病抑制因子(LIF)或活化素(activin)的基础培养基进行原代培养,分别采用机械法和胰酶消化法对克隆集落进行传代培养。最后通过碱性磷酸酶染色对克隆集落进行鉴定分析,并检测其体外分化能力。结果培养于LIF培养基和activin培养基中的囊胚均发生严重分化。培养于LIF培养基中的Epiblast也发生了严重的自发分化,而在activin培养基中,Epiblast形成SDEpi SCs原代集落。经机械法传代获得AKP染色阴性、能形成拟胚体的SDEpi SCs。结论利用细胞因子activin,结合机械传代法可从7.5日胎龄SD大鼠胚胎中获得SDEpi SCs。
- 邓新燕杨景超陆杰聂恩琼张应涛郭中敏
