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朱和鸣

作品数：1 被引量：1H指数：1
供职机构：山东省滨州畜牧兽医研究院更多>>
相关领域：农业科学更多>>

合作作者

文献类型

  • 1篇中文期刊文章

领域

  • 1篇农业科学

主题

  • 1篇基因
  • 1篇Γ基因
  • 1篇RT-PCR
  • 1篇IFN-Γ
  • 1篇IFN-Γ基...
  • 1篇MRNA

机构

  • 1篇福建农林大学
  • 1篇西北农林科技...
  • 1篇山东省滨州畜...

作者

  • 1篇王茹
  • 1篇谢印乾
  • 1篇高云英
  • 1篇张锋钢
  • 1篇沈志强
  • 1篇管宇
  • 1篇朱和鸣

传媒

  • 1篇中国兽医科学

年份

  • 1篇2006
共 1 条 记 录，以下是 1-1
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排序方式：
猪IFN-γ mRNA竞争性RT-PCR定量检测方法的建立被引量：1
2006年
无菌分离的猪外周血单个核细胞(PBMC),经ConA体外刺激培养15 h后提取细胞总RNA。以此总RNA为模板,采用RT-PCR技术扩增到了435 bp的IFN-γ基因。把扩增到的IFN-γ基因与pMD18-T载体连接,构建了pMD-IFN435重组质粒。用另一对引物对重组质粒pMD-IFN435内部进行PCR扩增,得到了257 bp(含PstⅠ酶切位点)的基因片段,将此基因片段连接到pMD18-T载体上构建了pMD-IFN257重组质粒。将pMD-IFN257双酶切(PstⅠ+SalⅠ)后回收的目的片段与pMD-IFN435双酶切(PstⅠ+SalⅠ)后回收的目的片段连接,得到了含有367bp目的片段的重组质粒pMD-IFN367,即内标准DNA模板。以定量后的pMD-IFN367与2倍梯度稀释的pMD-IFN435进行竞争PCR扩增,建立了能够准确、方便定量检测猪IFN-γmRNA的标准竞争曲线的线性回归方程(y=0.414x-1.864)。
谢印乾高云英沈志强朱和鸣管宇王茹张锋钢
关键词：IFN-Γ基因RT-PCR
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