张晋超
- 作品数:7 被引量:3H指数:1
- 供职机构:军事医学科学院野战输血研究所更多>>
- 发文基金:国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域:医药卫生轻工技术与工程更多>>
- 发色底物法在酶促反应初速度内测定α1抗胰蛋白酶的活性
- <正>目的α1-抗胰蛋白酶(alpha-1 antitrypsin,AAT)是人血浆中最重要的蛋白酶抑制剂,临床上采用静脉注射补充AAT方法治疗先天性AAT缺乏所引起的肺气肿等肺部疾病,疗效显著。发色底物法是国内测定AA...
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- 文献传递
- 发色底物法在酶促反应初速度内测定α1抗胰蛋白酶的活性
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- 发色底物法在酶促反应初速度内测定α1抗胰蛋白酶的活性被引量:3
- 2015年
- 目的 优化发色底物法,使其在酶促反应初速度内测定α1抗胰蛋白酶(AAT)的活性并用于血浆蛋白纯化过程中各样品活性的检测。方法 采用酶标仪动态监测模式观察酶浓度和反应时间对酶促反应的影响;计算初速度并确定被底物饱和的最大酶浓度。将AAT与胰蛋白酶孵育,剩余靶酶和底物作用产生的光密度可反映AAT的活性。通过△D与AAT标准品活性进行拟合建立标准曲线,测定相关样品的活性,进行精密度和准确度验证。结果 胰蛋白酶浓度为0.0625 mg/ml,20 min内酶促反应处于初速度内。AAT标准曲线范围为200~1200 IU/ml,r〉0.99。该法测定CohnⅣ、前处理液、洗脱峰样品中AAT的活性分别为(720.59±18.63)、(601.84±19.18)、(568.09±24.83)IU/ml。每个样品之间的RSD〈10%,加样回收率均在90%~110%。结论 发色底物法经优化后,准确度和精密度大幅度提高,更适于实验室制备AAT或不同生产阶段样品的活性检测。
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- 关键词:发色底物法Α1抗胰蛋白酶活性测定
- 一种从Cohn组分Ⅳ沉淀中纯化α1-抗胰蛋白酶的方法
- 本发明公开了一种从Cohn组分Ⅳ沉淀中纯化α1‑抗胰蛋白酶的方法,将Cohn组分Ⅳ沉淀依次经过Cohn组分Ⅳ沉淀溶解浓缩、PEG沉淀、一次病毒灭活、一次超滤浓缩、三次层析精制、冻干、二次病毒灭活,最终得到α1‑抗胰蛋白酶...
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- 文献传递
- α1抗胰蛋白酶不同纯化工艺的比较
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- α1抗胰蛋白酶不同纯化工艺的比较
- 目的α1抗胰蛋白酶(alpha 1 antitrypsin,AAT)是一种重要的血浆蛋白,可维持体内蛋白酶-抗蛋白酶系统的平衡,具有细胞保护,免疫调节,控制炎症等多种生物学功能。早在1897年,FDA就批准了第1个血浆来...
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- 一种从Cohn组分Ⅳ沉淀中纯化α1‑抗胰蛋白酶的方法
- 本发明公开了一种从Cohn组分Ⅳ沉淀中纯化α1‑抗胰蛋白酶的方法,将Cohn组分Ⅳ沉淀依次经过Cohn组分Ⅳ沉淀溶解浓缩、PEG沉淀、一次病毒灭活、一次超滤浓缩、三次层析精制、冻干、二次病毒灭活,最终得到α1‑抗胰蛋白酶...
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