刘腾飞
- 作品数：2 被引量：8H指数：2
- 供职机构：大连大学生命科学与技术学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金辽宁省大学生创新创业训练计划项目更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 托佩克猪SLA-2基因克隆与表达被引量：5
- 2013年
- 为提高托佩克猪SLA-2-TPK基因胞外区在pET-21a的表达量,对其5′端进行密码子优化,并设计表达引物,PCR扩增SLA-2-TPK胞外区,然后克隆入pMD○R19-T Simple Vector,经酶切鉴定后连接至pET-21a载体,转化BL21(Rosseta)进行诱导表达,SDS-PAGE检测目的蛋白。PCR结果显示,SLA-2-TPKe大小约为850bp,并成功克隆入pMD○R19-T Simple Vector,双酶切后大小为834bp。酶切后的SLA-2-TPKe成功与pET-21a链接,重组菌经诱导后目的蛋白大小为30.9ku,与密码子优化前重组菌相比,目的蛋白相对表达含量提高约40%。研究证明,密码子优化可明显提高蛋白的表达量,为进行其他蛋白表达研究提供了参考。
- 刘腾飞冯磊田永发刘畅姜巍严婷婷高凤山
- 关键词：密码子优化
- 托佩克猪SLA-2与β2m复合体的构建被引量：6
- 2011年
- 以托佩克猪重链基因SLA-2和轻链基因β2m为研究对象,体外通过剪接重叠延伸PCR(spli-cing overlap extension PCR,SOE-PCR)技术重构复合体,并将复合体基因链克隆入p2X表达质粒,导入受体菌TB1并进行表达。结果显示,体外重构的托佩克猪SLA-2与β2m复合体基因以融合蛋白MBP-SLA-2-(G4S)3-β2m的形式表达,大小为84.1ku。为进一步在体外进行该品系猪复合体与多肽结合研究奠定了基础。
- 陈兆华周巧妮刘昌华刘腾飞赵德高凤山
- 关键词：Β2M复合体
