冯龙
- 作品数：7 被引量：25H指数：3
- 供职机构：上海海洋大学水产与生命学院更多>>
- 发文基金：上海市教育委员会重点学科基金国家科技支撑计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 黄鳝性逆转差异表达基因F25 cDNA的克隆和分析被引量：2
- 2013年
- 首先运用组织学手段对黄鳝性腺发育过程进行观察分析,然后运用cDNA末端快速扩增(RACE)技术克隆了差异表达基因(F25)cDNA,并利用半定量RT-PCR分析了该基因于各期性腺组织中的表达。结果表明,通过光镜观察到性腺发育的8个阶段:Ⅲ～Ⅵ期卵巢、间期性腺、早期精巢和晚期精巢。基因F25在卵巢发育早期不表达,即在Ⅱ、Ⅲ期卵巢中不表达,在Ⅳ期卵巢开始表达,同时随着卵巢发育成熟、排卵、退化及精巢发育,表达量明显升高,由此推测基因F25可能在性逆转过程中起到一定的作用。基因F25 cDNA全长为1 139 bp,共编码257个氨基酸,在线SignalP分析表明,基因F25肽链不存在信号肽,为非经典分泌蛋白,同源性分析结果显示该基因无同源性序列,视为新报道的基因。
- 冯龙许世杰李园园付官宝吴昊伟王倩曲宪成
- 关键词：黄鳝性腺发育差异表达基因RACE
- 黄鳝性逆转相关基因的克隆和表达被引量：6
- 2012年
- 运用cDNA末端快速扩增(Rapid-Amplification of cDNA Ends,RACE)技术和半定量RT-PCR技术,克隆了黄鳝(Monopterus albus)性腺差异表达基因(F64)的cDNA全长序列,分析了该基因于各期性腺组织的表达情况。结果表明,F64基因cDNA全长1 721 bp,含有142 bp的5’-UTR、268 bp的3’-UTR、1 311 bp的开放阅读框(ORF),共编码436个氨基酸;在线SignalP分析表明,F64亚基肽链不存在信号肽,为非经典分泌蛋白;同源性分析结果显示该基因无同源性序列,视为新报道的基因;F64在卵巢发育早期不表达,从排卵的Ⅴ期卵巢开始表达,随着卵巢的败育和精巢的发育,表达量明显升高。
- 蒋骄云冯龙许世杰李园园曲宪成
- 关键词：黄鳝性腺差异表达基因RT-PCRRACE
- 黄鳝性逆转相关基因的表达及定位分析被引量：3
- 2014年
- 为研究F25基因与黄鳝性逆转关系,首先利用荧光定量PCR技术对该基因在各期性腺组织中的表达量进行分析,然后利用原位杂交技术合成cRNA探针对F25基因进行杂交定位分析。结果显示,F25基因在II、III期卵巢中仅有微量表达,而在IV卵巢中表达开始迅速增加,同时随着卵巢发育成熟、排卵、退化表达量也呈现不同程度的升高,在精巢中该基因的表达量达到最大值;经定位分析发现,该基因在早期卵巢中基本不表达,在IV、V期卵巢中主要在体细胞中表达,而在精巢雄性生殖细胞中基本不存在F25基因的表达,由此推测F25基因可能在性逆转过程中起到一定的作用,且主要作用于性腺组织中的体细胞。
- 冯龙许世杰李园园付官宝吴昊伟王倩刘其根曲宪成
- 关键词：黄鳝性逆转荧光定量原位杂交
- 黄鳝性逆转相关基因F4的克隆和表达分析被引量：2
- 2013年
- 本文运用cDNA末端快速扩增(Rapid-amplificationofcDNAends,RACE)技术、半定量RT-PCR技术和原位杂交技术,克隆黄鳝Monopterusalbus性腺差异表达基因(F4)的cDNA全长序列,并分析该基因于各期性腺组织的表达情况。结果显示:F4基因cDNA全长2466bp,含有142bp的5′-UTR、596bp的3′-UTR、1728bp的开放阅读框(ORF),共编码575个氨基酸;在线SignalP分析表明,F4亚基肽链不存在信号肽,为非经典分泌蛋白;同源性分析结果显示该基因无同源性序列,视为新报道的基因;F4在卵巢发育早期不表达,从排卵的Ⅳ期卵巢开始表达,随着卵巢的败育和精巢的发育,表达量明显升高。性逆转过程中差异表达基因的克隆和鉴定,为进一步探究黄鳝性别调控机制奠定了基础。
- 蒋骄云冯龙曲宪成田文斐
- 关键词：黄鳝性腺差异表达基因原位杂交
- 千岛湖细鳞鲴种群线粒体COⅠ基因变异及遗传分化研究被引量：7
- 2011年
- 首先利用鱼类线粒体COⅠ基因两端的保守序列设计简并引物,扩增测序获得了细鳞鲴COⅠ基因1 551 bp序列全长。然后利用COⅠ基因部分序列标记对千岛湖汾口(FK)、姜家镇(JJZ)、富文(FW)以及临岐(LQ)4个细鳞鲴群体84个样本的遗传多样性和遗传结构进行了分析,结果表明:在4个群体中共检测到4种不同单倍型。四群体的单倍型多样性(h)分别为0.500 0、0、0.142 5和0.128 7,核苷酸多样性(π)分别为0.001 9、0、0.000 2和0.000 2,其中FK群体的单倍型多样性(h)和核苷酸多样性(π)水平最高,另外3个群体单倍型多样性(h)和核苷酸多样性(π)水平都较低。AMOVA分析显示,群体间遗传变异占总变异的23.56%,群体内的遗传变异占总变异的76.44%,表明群体内变异是总变异的主要来源。研究结果表明千岛湖4个群体间没有明显的遗传分化。
- 曲宪成张勇刘其根张开岳蒋骄云冯龙
- 关键词：细鳞鲴
- 罗非鱼在保活运输中关键因子调控技术研究被引量：9
- 2011年
- 采用45′英尺标准冷藏集装箱,使用自行研发的可折叠集装化活鱼运输装备,构建"起捕-短途转运-暂养待运-长距离运输-暂养待售"的活体罗非鱼长距离运输工艺流程,探索活体罗非鱼长距离运输各关键因子的控制技术:温度(T)为20±2℃,溶解氧(DO)为3～7.0 mg/L,浊度<400度,总氨氮(NH3-N)<100 mg/L,亚硝酸盐氮(NO2--N)<0.5 mg/L、pH控制在6.5～7.5范围,游离二氧化碳(CO2)<80 mg/L。严格控制运输条件下水环境的各项关键因子,可以实现活体罗非鱼长距离运输。
- 何琳江敏马允李晓琴朱其建冯龙
- 关键词：罗非鱼保活运输水质指标调温存活率
- LR型微囊藻毒素对鲢鱼PEPCK基因表达的影响
- 2014年
- 在前期经LR型微囊藻毒素(MC-LR)处理后建立鲢鱼肝脏组织抑制差减杂交文库的基础上,利用RACE方法克隆了经MC-LR处理后差异表达明显的鲢鱼磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶PEPCK基因cDNA全长,并对其进行了序列分析,然后通过半定量分析了经MC-LR投与1、5、10 h鲢鱼肝脏组织PEPCK表达水平。结果显示:鲢鱼PEPCK基因cDNA全长2 605 bp,包括101 bp的5'端非翻译区、564 bp的3'端非翻译区、1 911 bp的开放阅读框,编码636个氨基酸。将鲢鱼PEPCK基因cDNA核酸及氨基酸序列与GenBank中已发表的其他几种鱼类的相应序列进行比对,表明鲢鱼PEPCK与翘嘴红鲌的同源性最高,其核酸及氨基酸序列的相似性分别达到97%和99%;其次为斑马鱼,同源性均达到90%以上;与星斑川鲽的同源性最差,但核酸及氨基酸序列的相似性也分别达到77%和84%,说明鱼类PEPCK在长期的进化过程中具有很高的保守性。鲢鱼PEPCK具有与草酰乙酯结合的特有结构域以及与GTP三磷酸链结合的激酶1和激酶2基序。另外,鲢鱼投予MC-LR后,肝脏组织PEPCK经过1、5、10 h的表达量均有显著升高,说明鲢鱼投予MC-LR 1 h内该基因即被诱导表达,且在10 h内皆维持较高的表达水平。这与微囊藻毒素作用有关,推测与微囊藻毒素解毒过程相关。
- 徐育强张开岳张勇蒋骄云冯龙许世杰曲宪成
- 关键词：磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶抑制差减杂交快速扩增CDNA末端
