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闭璟珊: 作品数：21 被引量：81H指数：4; 供职机构：广西动物疫病预防控制中心更多>>; 发文基金：国家自然科学基金公益性行业(农业)科研专项广西壮族自治区自然科学基金更多>>; 相关领域：农业科学更多>>

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牛乳头瘤病毒基因1型广西GX01流行株全基因组克隆及序列分析被引量：4: 2018年; 为了解牛乳头瘤病毒1型(bovine papillomavirus genotype 1,BPV-1)广西GX01株全基因组序列、结构特征及遗传变异情况,同时了解该毒株引起宿主产生的病理组织学变化情况,本研究选取广西贺州市患病牛皮肤肿瘤样物制作石蜡切片后镜检观察,提取病料DNA,以乳头瘤病毒L1基因的简并引物FAP59/FAP64进行PCR扩增以确定此病毒的基因型,根据GenBank中BPV参考株设计嵌套引物,对GX01株进行全基因组扩增、克隆测序及序列分析。病理组织学检查结果显示,可在病变部位发现表皮细胞增生、肿胀,角质过度及挖空细胞等乳头瘤病毒感染的特征性病变。序列分析结果表明,GX01株为BPV-1,其全基因组长为7 945bp,包含E1、E2、E4、E5、E6、E7、L1、L2 8个开放阅读框,符合BPV-1型基因组的结构特征;GX01与BPV-1参考株全基因组核苷酸序列同源性为98.6%~99.6%,与BPV-2型参考株(M20219.1)、BPV-13型参考株(JQ798171.1)同源性分别为86.9%和87.2%。GX01株为广西地区首次经检测确认并测定全基因组序列的牛乳头瘤病毒。本研究为广西地区乃至全国的牛乳头状瘤的病原鉴定、流行规律、遗传变异、疫源追溯及科学防控提供了基础数据。; 易驰喆孙文超郑敏涂悦进张红云闭璟珊梁晟韦显凯苏姣秀鲁会军李文杰罗廷荣; 关键词：全基因组

广西部分地区猪链球菌的分离鉴定及小鼠致病性研究: 对来自广西边境地区部分发病猪场及屠宰场的370份猪组织进行细菌分离鉴定,共分离到16株链球菌,对这16株链球菌进行了形态学观察、PCR鉴定以及小鼠致病性试验.结果表明,其形态、染色、生化特性均符合猪链球菌的特点,通过GD...; 韦显凯陈雯雯闭璟珊郑敏苏姣秀梁晟甘海霞曹慧慧张红云郑列丰李军; 关键词：猪链球菌形态学特征菌种鉴定

广西部分地区猪群中猪链球菌的分离鉴定及耐药性研究被引量：1: 2023年; 为探究广西部分地区猪群中猪链球菌(Streptococcus suis)的流行情况及耐药性,采集广西6个市县共527份猪组织及鼻腔拭子样品,通过选择培养基对样品中的猪链球菌进行分离和PCR鉴定,共分离到猪链球菌201株(38.1%)。其中大新县和那坡县猪链球菌分离率最高,分别为64.0%(64/100)和65.4%(70/107),而靖西市截获的越南走私猪中猪链球菌分离率达29.3%(44/150)。对分离到的猪链球菌进行血清型分型鉴定,结果显示201株猪链球菌血清型中2(1/2)型24株(11.9%),7型2株(1.0%),9型15株(7.5%),大新县、那坡县和东兴市主要流行2(1/2)型,靖西市的越南走私猪样品主要流行9型。采用纸片扩散法,测定41株广西猪链球菌分离菌株对临床上常见的34种9类抗生素的耐药性,其中有1株猪链球菌只对2类抗生素中度敏感,对7类抗生素不敏感;有12株(29.3%)细菌多重耐药;大多数猪链球菌(65.9%)对大环内酯类不敏感,对万古霉素(87.8%)、硝基呋喃(87.8%)、氟喹诺酮类(82.9%)敏感。由此可见广西地区猪链球菌分离株有较强的耐药性。; 马婷婷朱远致闭璟珊苏姣秀周庆安谢守玉邹联斌郑敏施开创李军罗廷荣韦显凯; 关键词：猪链球菌血清型耐药性

重组禽流感病毒(H5+H7)二价灭活疫苗在肉鹅中的应用效果评价被引量：3: 2018年; 为评价重组禽流感病毒二价灭活疫苗(H5N1 Re-8株+H7N9 Re-1株)在商品肉鹅中的安全性和有效性,各取200只肉鹅进行单剂量和大剂量安全试验,另取500只进行免疫效力试验。结果显示:接种大剂量疫苗试验组的鹅,采食、饮水及精神状况正常,未见有不良临床反应,注射部位肌肉均未观察到炎症、疫苗残留现象,疫苗吸收良好,增重差异不明显。效力试验中,加强免疫后2周,抗体合格率达70%以上,病毒分离均为阴性。结果表明,该重组禽流感病毒二价灭活疫苗具有较好的安全性和有效性。建议对2周龄雏鹅进行首免,每只注射0.5 mL,5周龄时加强免疫1次,每只1.5 mL,这样可取得较好的免疫保护效果。; 谢向萌韦显凯梁晟覃小柳梁仕增闭璟珊袁湖业胡茂快; 关键词：重组禽流感病毒灭活疫苗

广西部分地区猪群中猪链球菌分离株的毒力基因检测及毒力测定被引量：1: 2023年; 为了解广西部分地区(玉林市、大新县、那坡县、东兴市、靖西市和百色市)猪群中猪链球菌(Streptococcus suis,SS)毒力基因的流行情况和毒力水平,试验采用PCR方法检测分离到的201株(经鉴定猪链球菌2&1/2型24株,猪链球菌7型2株,猪链球菌9型15株,一共41株)猪链球菌的毒力基因orf2、sly、ef和mrp,并通过斑马鱼模型筛选毒力较强的菌株,测定菌株的半数致死剂量(LD50)。结果表明:从广西部分地区分离的201株猪链球菌的4种毒力基因携带率从高到低依次为orf2(85.6%,172/201)>sly(55.2%,111/201)>ef(33.8%,68/201)>mrp(26.4%,53/201);6个市县主要流行的毒力基因不同,玉林市、大新县、那坡县、东兴市、靖西市和百色市分离的猪链球菌携带最多的毒力基因分别为orf2(100%)、orf2(89.2%)、orf2(91.5%)、ef(44.4%)、orf2(86.7%)、orf2(40.0%);经鉴定分型的41株猪链球菌中,有7株(17.1%,7/41)同时携带了4种毒力基因,有11株(26.8%,11/41)同时携带了3种毒力基因,有17株(41.5%,17/41)同时携带了2种毒力基因;斑马鱼模型筛选出7株致病力较强猪链球菌,LD50为4.2×10^(7)~3.8×10^(8)cfu/mL,且猪链球菌2型菌株毒力和猪链球菌9型菌株毒力差别不大。说明广西部分地区分离的猪链球菌毒力基因携带率较高,各地区流行的毒力基因多样,对斑马鱼有明显的致病性,但毒力不强,未来应当更加关注猪链球菌9型的流行情况和毒力水平。; 马婷婷朱远致闭璟珊苏姣秀周庆安谢守玉赵子欣邹联斌郑敏李晓宁罗廷荣韦显凯; 关键词：猪链球菌毒力基因半数致死量

犬圆环病毒Cap蛋白的生物信息学分析及原核表达被引量：2: 2020年; 犬圆环病毒(CanineCV)是近年被发现的圆环病毒属新成员,获取CaineCV Cap蛋白,为研究Cap蛋白的功能以及抗原表位奠定了基础。本研究以CaineCV GX2017株基因组作为模板,使用PCR方法扩增出Cap蛋白的基因序列,对其进行生物信息学分析,并克隆至pET-28a原,进行原核表达。结果表明:GX2017的N端2~26位氨基酸存在一个核定位信号,同时含有3个B细胞表位(aa7~aa14;aa150~aa174;aa233~aa253);第134位氨基酸为N-糖基化位点,第169和第238位氨基酸为O-型糖基化位点;进化分析表明,本研究的CanineCV Cap蛋白基因序列与欧美株同源性较低,且处在不同的分支;SDS-PAGE结果显示,重组Cap蛋白在E.coli BL21(DE3)中不能正确表达,切除了NLS的d(1-26)Cap蛋白能在E.coli BL21(DE3)中大量表达;Western blot 分析表明,该重组蛋白能与Anti-His 标签抗体发生特异性反应。本研究成功构建了pET-d(1-26)Cap重组原核表达质粒,并在大肠杆菌中获得高水平表达,为进一步制备Cap蛋白的抗体奠定了基础。; 汪伟辛佳亮杜倩韩知晓易驰喆闭璟珊闭璟珊庄忻雨张赫郑敏郑敏鲁会军孙文超; 关键词：CAP蛋白生物信息学原核表达

鉴别牛结节性皮肤病病毒双重荧光定量PCR检测方法的建立及应用: 2023年; 为实现牛结节性皮肤病病毒(LSDV)和羊痘病毒属(CaPV)其他成员的鉴别诊断,针对LSDV 010基因保守区域设计特异性引物及TaqMan探针,与文献报道的CaPV 068基因的通用引物及探针组合,通过优化反应体系和条件,建立了一种可同时鉴别检测LSDV和CaPV其他成员的双重荧光定量PCR检测方法。结果显示:本方法可以特异性扩增LSDV和CaPV其他成员,并且与其他牛、羊病毒无交叉反应,特异性好;对pLSDV-010和pCaPV-068质粒标准品的最低检测限均为15 copies/μL,具有较高的灵敏性;组内和组间变异系数均小于1.75%,重复性良好。应用本试验建立的方法与荧光定量PCR方法同时检测542份临床样品,发现CaPV的样品符合率为98.52%,LSDV为99.63%。本试验建立的方法为CaPV鉴别筛查、LSDV精准防控及流行病学调查提供了快捷有效的技术手段。; 赵钟毅闭璟珊尹德玮吕荞吴健皓韦正吉邹联斌苏姣秀汪伟辛佳亮彭久青李文静郑敏胡传活; 关键词：TAQMAN探针

羊凋亡细胞因子Fas、FasL、TNFR1和TNF-α实时荧光定量检测方法的建立被引量：1: 2018年; 为探讨羊痘病毒感染后机体的凋亡细胞因子mRNA表达水平的变化,深入探讨羊痘病毒免疫机制,本研究设计针对羊凋亡细胞因子Fas、FasL、TNFR1和TNF-α特异性引物,建立羊凋亡细胞因子实时荧光定量方法。分别建立荧光定量PCR反应体系并进行优化。结果表明:Fas、FasL、TNFR1和TNF-α的SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR各基因的溶解曲线均呈单一溶解峰。组内变异系数均小于2.00%。本研究建立的羊凋亡细胞因子SYBR Green Ⅰ荧光定量RT-PCR检测方法为凋亡细胞因子mRNA表达水平提供了技术平台。; 易驰喆孙文超汪伟张红云韦显凯韦显凯郑敏闭璟珊; 关键词：SYBR

口蹄疫O型、A型二价3B表位缺失灭活疫苗在奶水牛的免疫效果观察: 2022年; 为了评价口蹄疫(FMD)O型、A型二价3B表位缺失灭活疫苗在奶水牛临床应用的安全性及免疫效果,本试验选择90~100日龄健康奶水牛犊牛24头,平均分为2个组,试验组接种表位缺失疫苗,在首免后30 d,二免后180 d加强免疫,对照组按照相同的免疫程序接种常规疫苗;在不同时间点采集血清进行口蹄疫O型、A型抗体效价和非结构蛋白3ABC抗体检测,采集食道-咽分泌液(OP)进行口蹄疫病原学检测。结果显示:在抗体平均滴度方面,试验组抗体比对照组高1.4~2.8个滴度,在9个免疫后时间点试验组O型抗体平均滴度全部显著(P<0.05)甚至极显著(P<0.01)高于对照组,7个免疫后时间点试验组A型抗体平均滴度显著(P<0.05)甚至极显著(P<0.01)高于对照组;试验组抗体合格率比对照组高出25%~41%;口蹄疫非结构蛋白3ABC抗体标记疫苗免疫动物均为阴性。综合分析表明,口蹄疫O型、A型二价3B表位缺失灭活疫苗具有良好的免疫保护效果,在感染抗体水平上也能保证非结构蛋白抗体阴性。本试验为口蹄疫净化和口蹄疫无疫小区、无疫区建设探索可行的方法。; 赵钟毅吕荞闭璟珊文崇利朱远致韦正吉邹联斌郑威苏姣秀尹德玮郑敏胡传活; 关键词：口蹄疫灭活疫苗

2016年广西部分地区猪群五种疫病感染情况监测分析: 为探明2016年广西猪群主要疫病的感染情况,本研究小组从发病猪场和屠宰场采集猪组织样品共340份,应用RT-PCR方法检测猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪流行性腹泻病毒(PEDV),并应用P...; 韦显凯郑敏闭璟珊蒋晓霞苏姣秀梁晟张步娴甘海霞郑列丰李军; 关键词：猪群流行病学调查

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