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胰岛素及罗格列酮的长期作用对人脂肪细胞脂肪代谢的影响: 随着肥胖人群的增加,脂肪细胞功能的研究日益受到关注.脂肪细胞在脂代谢中发挥着重要作用,脂肪分解增加可导致游离脂肪酸(NEFA)升高,长期高游离脂肪酸可引起骨骼肌胰岛素捣和胰岛B细胞功能障碍.脂肪分解受多种激素的调节,胰岛...; 李晓华郑升刘优萍骆天红罗敏; 关键词：肥胖症脂肪代谢胰岛素罗格列酮; 文献传递

人脂肪细胞新乙二醛酶的发现及结构功能分析被引量：2: 2007年; 目的通过蛋白组学技术筛选人脂肪细胞新蛋白,并对新蛋白的结构及功能进行分析。方法利用双向电泳及质谱技术观察人脂肪细胞蛋白表达谱,对发现的新蛋白先通过RT-PCR及原核表达证实该蛋白在脂肪细胞的表达,再利用生物信息学对新蛋白的结构,同源性及结构域进行预测。结果发现了脂肪细胞表达的新蛋白My027,证实了该蛋白的表达,生物信息学分析显示该蛋白定位于胞浆,具有高度保守的结构域。141-253氨基酸之间有一个完整的乙二醛酶(glyoxalse,GLO)功能域,与GLO的同源性为96.7%,144-244氨基酸序列与GLO I的同源性为95.7%。结论脂肪细胞表达的蛋白My027具有与GLO I基本相同的功能域,很可能具有同样的生理功能。; 李晓华郑升刘优萍骆天红罗敏; 关键词：脂细胞

胰岛素的长期作用对人脂肪细胞代谢的影响被引量：7: 2005年; 目的探讨胰岛素的长期作用对人脂肪细胞脂代谢的影响。方法　检测不同浓度胰岛素作用24h后脂肪细胞甘油释放率的基础值和刺激值,并使用RT-PCR检测脂肪分解的关键酶激素敏感性脂酶(HSL)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达。结果胰岛素的长期作用可增加脂肪细胞的甘油释放率,并呈剂量效应和时间效应,100、500、1000nmol/L的胰岛素可使甘油释放率的基础值和刺激值分别增加17%～147%和28%～241%(P<0.01)。胰岛素的长期作用对脂肪细胞的HSLmRNA表达无影响,TNF-αmRNA的表达明显增加。结论在体外胰岛素的长期作用与其短期作用有所不同,可增加脂肪细胞的脂肪分解,具脂肪分解作用的TNF-α表达增加可能发挥了一定的作用。; 李晓华郑升刘优萍骆天红罗敏; 关键词：胰岛素脂肪细胞 TNF-Α 脂肪分解代谢 RT-PCR检测

My027融合蛋白表达载体构建及其在大肠杆菌的表达: 2008年; 目的探索My027蛋白的体外表达,通过原核表达获得大量可溶性My027融合蛋白。方法逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法扩增出My027片段,插入原核表达载体pGEX-4T-2,构建质粒pGEX-My027。转化BL-21菌,IPTG低温诱导表达融合蛋白,亲和层析法获得融合蛋白,采用十二烷基硫酸钠(SDS)-聚丙烯酰胺凝胶(PAGE)、Western印迹法及质谱进行鉴定。结果融合蛋白以水溶形式分泌于大肠杆菌BL-21胞质中,纯化后的目的蛋白经SDS-PAGE、Western印迹法及质谱证实高效表达,氨基酸序列正确。结论人脂肪细胞新蛋白My027在pGEX-4T-2原核表达载体可获高效表达,为进一步研究其功能奠定基础。; 李晓华郑升刘优萍骆天红罗敏; 关键词：融合蛋白原核表达

脂肪细胞新蛋白My027原核表达、纯化及生物活性研究: 2008年; 目的通过原核表达获得大量脂肪新蛋白质My027,并在体外初步研究其生物活性。方法RT-PCR法扩增出My027片段,插入原核表达载体pGEX-4T-2,构建质粒pGEX-My027。转化BL-21菌,IPTG低温诱导表达融合蛋白,经亲和层析法获得融合蛋白,利用SDS-PAGE、Western印迹及质谱进行鉴定。在还原性谷胱甘肽存在的条件下,将纯化得到的融合蛋白作用于乙二醛酶Ⅰ的底物甲基乙二醛,通过分光光度法检测产物乳酸谷胱甘肽的生成。结果融合蛋白以水溶形式分泌于大肠埃希菌BL-21胞浆中,纯化后的目的蛋白SDS-PAGE、Western印迹及质谱证实高效表达,氨基酸序列正确。结论人脂肪细胞新蛋白质My027在pGEX-4T-2原核表达载体中可获高效表达,所纯化蛋白具有类似于乙二醛酶Ⅰ的作用。; 李晓华郑升刘优萍骆天红罗敏; 关键词：原核表达生物活性

胰岛素及罗格列酮的长期作用对人脂肪细胞脂肪代谢的影响: 目的:随着肥胖人群的增加,脂肪细胞功能的研究日益受到关注。脂肪细胞在脂代谢中发挥着重要作用,脂肪分解增加可导致游离脂肪酸(NEFA)升高,长期高游离脂肪酸可引起骨骼肌胰岛素抵抗和胰岛B细胞功能障碍。脂肪分解受多种激素的调...; 李晓华郑升刘优萍骆天红罗敏; 文献传递

Cathepsin K在脂肪细胞分化中的表达及作用被引量：1: 2006年; 目的观察cathepsinK在脂肪细胞分化中的表达趋势，初步探讨其在脂肪细胞分化中的作用。方法 4～6周SD大鼠，酶消化法获得前脂肪细胞，黄嘌呤、胰岛素、地塞米松方案进行诱导，RT-PCR和Western blot方法检测cathepsinK在脂肪细胞分化过程中的表达。用不同浓度的cathepsinK抑制剂E-64进行干预，油红染色评估效果。结果前脂肪细胞汇合后经异丁基-甲基-黄嘌呤、地塞米松、胰岛素诱导，60％～70％的细胞分化为成熟的脂肪细胞表型，且与脂肪细胞分化紧密相关的转录因子——过氧化物增生激活物受体（PPAR-1）持续表达，可用于实验研究。在脂肪细胞分化的过程中cathepsin K mRNA和蛋白表达上升（P〈0．05）。加入不同浓度的E-64后，脂肪细胞分化进程受到抑制，且呈剂量依赖关系。结论脂肪细胞分化前后cathepsin K的表达存在差异，其抑制剂可以阻止脂肪细胞分化。提示cathepsin K在脂肪细胞分化过程中发挥作用。; 韩峻峰尹晓李晓华简蔚霞骆天红罗敏; 关键词：CATHEPSIN 脂肪细胞分化

人内脏与皮下脂肪细胞蛋白表达谱的差异分析被引量：1: 2007年; 目的比较人内脏与皮下脂肪细胞蛋白表达的差异。方法采用双向凝胶电泳及质谱技术筛选差异蛋白。结果两组蛋白点的匹配率为r=0·71。灰度值有显著性差异的有82个点(P<0·05)。选择差异相差5倍以上的10个点用于质谱分析,确认了6个差异表达的蛋白质,分别与胰岛素信号转导、细胞分化及脂代谢关系密切。结论差异蛋白可能在腹型肥胖相关疾病中发挥一定作用,为进一步明确内脏脂肪的危害性提供了研究思路。; 李晓华郑升刘优萍李华峰骆天红李果罗敏; 关键词：脂细胞差异蛋白

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李晓华