张乐民 作品数:4 被引量:9 H指数:2 供职机构: 云南大学生命科学学院云南省生物资源开发与利用重点实验室 更多>> 发文基金: 云南省教育厅科学研究基金 国家自然科学基金 陕西省教育厅科研计划项目 更多>> 相关领域: 生物学 农业科学 轻工技术与工程 更多>>
紫外激光交联和染色质免疫沉淀技术及其应用 2007年 紫外激光交联和染色质免疫沉淀技术(UV laser crosslinking and chromatin immunoprecipitation,UV-X-ChIP)是研究蛋白质与DNA的相互作用及鉴定转录因子靶DNA的一条新途径。该技术结合DNA芯片、Southern杂交及DNA文库的构建可用于研究蛋白质与DNA的相互作用及高通量筛选已知转录因子在全基因组范围内的结合位点,这为转录因子调控网络的绘制奠定基础。笔者对紫外激光交联和染色质免疫沉淀技术及应用作一综述。 刘开辉 丁小维 邓百万 陈文强 张乐民关键词:染色质免疫沉淀 转录因子 拟南芥热激因子HsfA1a部分氨基酸的表达与纯化 被引量:2 2009年 以构建的表达拟南芥热激因子HsfA1 a C端氨基酸331到氨基酸486(简称ΔHsfA1 a)的大肠杆菌E coliM15为材料,用异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达ΔHsfA1 a,再通过N i-NTA-Agarose亲和层析纯化表达的ΔHsfA1 a,通过SDS-PAGE电泳分析表达蛋白和纯化蛋白,获得了表达纯化的ΔHsfA1 a. 郭丽红 王定康 袁燕 刘开庆 张乐民关键词:纯化 拟南芥热激因子HSF1的表达与纯化 被引量:8 2009年 [目的]表达和纯化拟南芥热激因子HSF1。[方法]以构建的能表达热激因子HSF1的大肠杆菌Escherichia coliM15(pQE32/His6-HSF1,pREP4)为材料,用异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达HSF1,再通过镍亲和层析纯化表达的HSF1,通过变性的聚丙酰胺(SDS-PAGE)电泳分析表达蛋白和纯化蛋白。[结果]试验获得了表达的HSF1,并且进一步获得了纯化的HSF1。[结论]该研究为探讨拟南芥HSF1在基因组的结合位点提供了试验材料,为全面认识HSF1作用机理和生理功能奠定了基础。 郭丽红 王定康 袁燕 刘开庆 张乐民关键词:纯化 应用UV-X-IP分析酿酒酵母HSF和靶DNA的相互作用 2008年 利用紫外激光交联和免疫沉淀技术(UV laser crosslinking and immunoprecipitation,UV-X-IP)分析原核表达的酿酒酵母热激因子(heat shock factors,HSFs)和片段化的基因组靶DNA的相互作用。分别在ScSSA1、ScSSA4启动子区和编码区设计引物对免疫沉淀的DNA进行PCR分析。结果发现,紫外激光交联和免疫沉淀DNA库中富集了ScSSA1、ScSSA4启动子区HSF结合的DNA片段,而没有编码区DNA,表明HSF特异结合了靶DNA。从未经紫外激光交联样品的免疫沉淀DNA库中未获得相应PCR扩增产物,说明紫外激光在酿酒酵母HSF与靶DNA之间形成共价结合中起重要作用。 刘开辉 丁小维 邓百万 陈文强 张乐民关键词:免疫沉淀 酿酒酵母 热激因子