刘欢
- 作品数：2 被引量：10H指数：2
- 供职机构：中国海洋大学医药学院海洋药物教育部重点实验室更多>>
- 发文基金：海洋公益性行业科研专项国家自然科学基金国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程生物学更多>>
- 琼胶酶AgaD在大肠杆菌中的高效表达被引量：3
- 2015年
- 【目的】构建琼胶酶Aga D的高效表达体系,优化发酵条件提高重组酶的表达量。【方法】首先根据大肠杆菌(E.coli)密码子偏好性,优化并合成Aga D的基因,使其适合E.coli表达系统;考察了不同的E.coli表达宿主;根据N端法则构建了突变体;评价了培养基中添加Ca Cl2和甘氨酸(Gly)对重组酶表达的影响。【结果】成功构建了琼胶酶Aga D的高效表达体系,确定了E.coli AD494(DE3)为最适表达宿主;利用N端法则提高了重组酶的稳定性,缩短了发酵时间;通过在培养基中添加Ca Cl2和甘氨酸(Gly)进一步提高了胞外酶产量。最终,发酵上清中重组酶的活力由20 U/L提高至11300 U/L,比优化前提高了500余倍。【结论】构建了琼胶酶Aga D的高效表达体系,为GH96家族琼胶酶的深入研究奠定了基础。
- 刘欢张伟宾刘丹于文功路新枝
- 关键词：琼胶酶密码子优化
- 海洋细菌Renibacterium sp.QD1产壳聚糖酶发酵培养基的统计优化被引量：7
- 2014年
- 目的:通过对发酵培养基的统计优化提高海洋细菌Renibacterium sp.QD1壳聚糖酶的产量。方法:通过Plackett-Burman实验筛选影响壳聚糖酶产量的显著性因素。在此基础上利用最陡爬坡路径逼近最大响应区域,利用响应面法进行回归分析。结果:确定了影响壳聚糖酶产量的3个显著因素,其最佳浓度分别是壳聚糖14.23g/L、酵母粉4.72g/L、p H6.42。经模型验证,预测值与验证实验平均值接近。结论:在最优培养基中壳聚糖酶活力达到608.11U/m L,比优化前提高了52.03%。
- 马靖峰郭晓凤刘欢邢培川于文功路新枝
- 关键词：壳聚糖酶PLACKETT-BURMAN设计
