于滨
- 作品数：11 被引量：3H指数：1
- 供职机构：西南大学更多>>
- 发文基金：中央高校基本科研业务费专项资金国家现代农业产业技术体系建设项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- BmOTP作为靶向肽在靶向家蚕卵母细胞中的应用
- 本发明提供了BmOTP作为靶向肽在靶向家蚕卵母细胞中的应用，属于基因编辑技术领域。本发明提供的家蚕卵母细胞靶向肽BmOTP，能够有效地将外源蛋白递送到卵母细胞中。本发明将BmOTP与CRISPR相关蛋白9(Cas9)融合...
- 于滨李春峰董思辰李田潘国庆周泽扬
- 家蚕ML家族基因的鉴定及病原诱导表达特征被引量：3
- 2019年
- MD-2相关脂类识别蛋白(MD-2-related lipid-recognition,ML)家族是一类广泛分布于动物、植物和真菌的含有ML单一结构域的蛋白家族,在先天免疫、脂类识别及代谢过程中发挥重要作用。通过同源检索在家蚕基因组数据库中比对获得4个ML家族成员基因,包括BmNPC2、BmML-1、BmML-2和BmEr-16,克隆其cDNA序列,生物信息学分析表明家蚕ML家族蛋白具有典型的ML结构域和信号肽,并至少含有4个保守的半胱氨酸残基。系统进化分析显示BmNPC2与黑脉金斑蝶的Promoting以及烟草天蛾的MsML-1亲缘关系较近,BmML-2、BmEr-16以及BmML-1与果蝇的NPC2家族蛋白亲缘关系较近。qRT-PCR结果显示ML家族基因在家蚕各组织中均有转录,其中在脂肪体和马氏管中的表达量相对较高。将大肠埃希菌以及球孢白僵菌、黑胸败血芽孢杆菌、核型多角体病毒和家蚕微孢子虫等家蚕病原通过注射或添食家蚕5龄幼虫进行免疫诱导,qRT-PCR结果显示家蚕ML家族成员在不同病原诱导之后均有不同程度的上调表达,推测ML家族成员可能参与到宿主对入侵病原物的免疫过程。
- 梅雄娥李致宏于滨仝超群潘国庆李春峰周泽扬
- 关键词：家蚕转录分析
- 柞蚕微孢子虫感染后柞蚕卵转录组及免疫相关基因功能分析
- 2023年
- 【目的】柞蚕微孢子虫Nosema pernyi引发柞蚕Antheraea pernyi微粒子病,威胁柞蚕种质资源的保育及生产安全,并且能够经卵垂直传播,因此需要寻找柞蚕体内应对柞蚕微孢子虫侵染后的免疫基因,为后续寻找和培育抗微粒子病新品种提供帮助。【方法】构建柞蚕微孢子虫侵染后柞蚕卵转录组,进行GO功能注释和KEGG分析确定免疫相关基因;PCR克隆柞蚕谷胱甘肽S-转移酶(glutathione S-transferase,GST)基因ApGSTo1并进行生物信息学分析;运用RT-qPCR检测ApGSTo1在柞蚕微孢子虫侵染柞蚕产出后0-10 d卵中的表达量。【结果】在感染与未感染柞蚕微孢子虫柞蚕卵转录组检测到的表达基因数为17453,其中显著差异表达基因数目为89个;GO功能注释中细胞解剖实体和催化活性相关基因数量最多,KEGG分析中参与运输和分解代谢、信号转导及消化系统这3个通路的基因数量最多。基于柞蚕微孢子虫侵染后柞蚕卵转录组数据分析,将ApGSTo1作为目的基因,PCR克隆及系统进化分析结果证明ApGSTo1属于omega家族GST;感染柞蚕微孢子虫柞蚕卵中ApGSTo1表达量比正常对照组的高,且在产卵后2 d时的表达量极显著高于正常对照组的。【结论】获得了柞蚕微孢子虫侵染后柞蚕卵转录组数据,找到了1个免疫相关基因ApGSTo1,从分子生物学和转录水平初步证明了ApGSTo1参与柞蚕卵内的抗柞蚕微孢子虫侵染,还发现了抗柞蚕微孢子虫侵染反应的关键时间为产卵后2 d时,这些结果为后续研究ApGSTo1在抗逆性和氧化还原等功能方面提供研究基础。
- 徐欣吴玉娇吴玉娇于滨陈杰陈杰张永君潘国庆
- 关键词：柞蚕柞蚕微孢子虫GST
- 家蚕微粒子虫诱导表达基因BmPUGT3的启动子及其应用
- 本发明属于家蚕转基因技术领域，具体涉及一种家蚕微粒子虫诱导表达基因BmPUGT3的启动子及其应用，所述启动子的核苷酸基因如SEQ ID NO：16所示，该启动子可以驱动外源基因在家蚕中经家蚕微粒子虫诱导下表达，不但适用于...
- 李春峰于滨潘国庆周泽扬
- 文献传递
- 家蚕微粒子虫诱导表达基因BmPUGT2的启动子及其应用
- 本发明属于家蚕转基因技术领域，具体涉及一种家蚕微粒子虫诱导表达基因BmPUGT2的启动子及其应用，所述启动子的核苷酸基因如SEQ ID NO：6所示，该启动子可以驱动外源基因在家蚕中经家蚕微粒子虫诱导下表达，不但适用于基...
- 李春峰于滨潘国庆周泽扬
- 文献传递
- 家蚕微粒子虫分泌蛋白己糖激酶NbHK对家蚕基因表达及相关通路的调控作用
- 2024年
- 【目的】微孢子虫是一种营专性细胞内寄生的微生物,它可以感染几乎所有动物种类,包括人类和重要的经济动物。本研究对家蚕微粒子虫分泌蛋白己糖激酶(Nosema bombycis hexokinase,NbHK)在家蚕胚胎细胞中表达特征、亚细胞定位、调控作用和宿主互作蛋白质进行了系统分析,为阐明该蛋白在侵染中的作用与机理提供参考。【方法】利用原核表达蛋白免疫小鼠,制备NbHK的多克隆抗体,并利用Western blotting和间接免疫荧光法分析家蚕微粒子虫在感染的家蚕胚胎细胞(Bombyx mori embryo,BmE)中的表达和定位;通过过表达和RNA干扰实验,分析NbHK对病原增殖的作用;利用RNA-seq分析NbHK调控的家蚕基因表达和通路;利用生物素-链霉亲和素系统和质谱技术,从NbHK::APEX2转基因细胞中分离鉴定NbHK的互作蛋白。【结果】在感染家蚕微粒子虫的BmE中,NbHK持续上调表达,主要被定位于宿主细胞核内。过表达NbHK显著促进了病原增殖,而敲低NbHK则明显抑制了病原增殖,说明在NbHK感染过程中发挥关键作用。利用RNA-seq分析鉴定了94个差异表达基因(differentially expressed genes,DEGs),其中58个基因上调,36个基因下调。DEGs的富集分析显示,细胞寿命和内质网蛋白加工通路受到显著激活,而线粒体自噬途径受到明显抑制。互作蛋白鉴定分析发现,NbHK可能与宿主细胞核内的核蛋白易位启动子区(nucleoprotein translocated promoter region,NTPR)等蛋白间存在相互作用。【结论】NbHK主要被定位至家蚕细胞核中,调控家蚕细胞寿命等多个重要通路的基因表达,以利于病原增殖。本研究为深入解析NbHK在感染过程中的功能及其调控机理提供了新的参考。
- 文远邹子筠汪春霞于滨周泽扬李田
- 关键词：微孢子虫己糖激酶分泌蛋白
- 家蚕微孢子虫假定膜蛋白基因NBO_32g0046的克隆及表达分析
- 2020年
- 家蚕微孢子虫(Nosema bombycis)感染家蚕引发家蚕微粒子病,对养蚕业造成巨大危害,其防治是蚕业生产的重大技术难题之一。家蚕微孢子虫的膜蛋白在侵染过程中发挥着重要作用,也是开展防治研究的重要候选靶标。从感染家蚕微孢子虫的家蚕中肠转录组数据中筛选到一个高量表达的家蚕微孢子虫假定膜蛋白基因NBO32g0046,生物信息学预测NBO32g0046蛋白的分子质量为24.9 kD,等电点为9.57,存在4个跨膜结构域,含有1个N-糖基化位点和2个O-糖基化位点,不具有信号肽和已知的功能域;同源分析发现,NBO32g0046在Encephalitozoon、Ordospora及Nosema属的多种微孢子虫中存在同源序列。转录分析表明,NBO32g0046基因在家蚕微孢子虫增殖的各个阶段均有表达。通过RNAi敲低NBO32g0046的表达,能有效抑制家蚕微孢子虫的增殖。上述结果表明NBO32g0046在家蚕微孢子虫的增殖过程中起重要作用,可作为开展家蚕抗性素材构建研究的潜在靶标。
- 郑诗怡黄宇康于滨黄红云韦俊宏潘国庆李春峰周泽扬
- 关键词：家蚕微孢子虫RNAI
- 一种真核可溶表达家蚕微粒子虫极管糖蛋白的载体及方法
- 本发明涉及一种真核可溶表达家蚕微粒子虫极管糖蛋白的载体及方法，具体方法如下：构建含家蚕微粒子虫NbPTP1基因的重组载体，然后转染草地贪夜蛾sf9细胞进行表达，所述含家蚕微粒子虫NbPTP1基因的重组载体由IE2启动子调...
- 龙梦娴周泽扬李春峰谭瑶瑶于滨
- 文献传递
- 家蚕微粒子虫诱导表达基因BmPUGT2的启动子及其应用
- 本发明属于家蚕转基因技术领域，具体涉及一种家蚕微粒子虫诱导表达基因BmPUGT2的启动子及其应用，所述启动子的核苷酸基因如SEQ ID NO：6所示，该启动子可以驱动外源基因在家蚕中经家蚕微粒子虫诱导下表达，不但适用于基...
- 李春峰于滨潘国庆周泽扬
- 文献传递
- 家蚕微粒子虫诱导表达基因BmPUGT3的启动子及其应用
- 本发明属于家蚕转基因技术领域，具体涉及一种家蚕微粒子虫诱导表达基因BmPUGT3的启动子及其应用，所述启动子的核苷酸基因如SEQ ID NO：16所示，该启动子可以驱动外源基因在家蚕中经家蚕微粒子虫诱导下表达，不但适用于...
- 李春峰于滨潘国庆周泽扬
