闵凯
- 作品数：3 被引量：8H指数：1
- 供职机构：东北林业大学林学院更多>>
- 发文基金：黑龙江省自然科学基金博士后研究人员落户黑龙江科研启动基金博士后科研启动基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 香菇gpd启动子引导的云芝漆酶基因真核表达载体的构建被引量：1
- 2009年
- 根据Genbank中提交的云芝(Coriolus versicolor(L.)Quel.)漆酶(lcc1)基因cDNA序列设计引物,利用RT-PCR获得云芝漆酶基因cDNA完整编码框,与GenBank中云芝漆酶基因同源性为96%;以pCAM-BIA1381xb为初始载体,利用引物两端的酶切位点,将克隆得到的云芝漆酶基因cDNA序列分别连接到香菇gpd启动子Lg1和Lg2的下游,构建成香菇启动子引导的云芝漆酶基因真核表达载体pC-XG1-YZ-Lac和pC-XG2-YZ-Lac,利用冻融法将其转到了农杆菌EHA105中。
- 邓勋宋瑞清宋小双闵凯孙海珍
- 关键词：白腐菌漆酶表达载体构建
- 毛栓菌漆酶基因克隆及其酵母表达载体的构建被引量：1
- 2009年
- [目的]研究毛栓菌漆酶基因克隆及其酵母表达载体的构建,为研制高品质酶制剂,实现其工业化生产和规模化应用奠定了基础。[方法]以毛栓菌总RNA为模板,通过RT-PCR克隆去信号肽的漆酶基因;通过BLAST比对,对毛栓菌漆酶基因序列的同源性进行分析;对质粒pPIC9K进行EcoRⅠ和NotⅠ进行酶切,构建其酵母表达载体p9K+Lac。[结果]去信号肽的漆酶基因编码框全长为1 512bp,编码506个氨基酸,分子量为54 KDa;毛栓菌漆酶基因与NCBI中提交的毛栓菌基因序列同源性达到了99%。[结论]通过RT-PCR得到了漆酶基因全长,重组毕赤酵母表达载体p9K+Lac的构建是完全正确的。
- 闵凯宋瑞清邓勋
- 关键词：毛栓菌漆酶基因克隆表达载体构建
- 高效选择性降解稻草木质素的菌株及其产酶特性的研究被引量：6
- 2009年
- 采用变色圈试验和木质素降解试验,对19株木材腐朽菌对稻草生物降解能力进行定性及定量筛选,获得了毛革盖菌(Coriolus hirsutus)、东方栓菌(Trametes orientalis)、彩绒革盖菌S2(Coriolus versicolor)和白干酪菌(Tyromyces albidus)4株高效降解稻草木质素的菌株。在15 d的培养中,各菌株对稻草木质素的降解率分别为36.71%、33.59%、22.46%和21.90%。在基础培养基发酵培养中,4菌株的漆酶活性分别在8 d和14 d达到峰值,其中白干酪菌的漆酶活性最高,为147.73 U/L,毛革盖菌、东方栓菌和彩绒革盖菌S2的漆酶活性最高分别为113.00,133.65,122.65 U/L;4菌株的木质素过氧化物酶和锰过氧化物酶的酶活性均不高,可能与缺少必要的诱导剂有关。4菌株的胞外蛋白含量和菌丝重增加变化曲线基本一致,只是峰值略有提前。4株不同来源的彩绒革盖菌在木质素降解能力上存在一定的差异,这与菌株的地域差异和菌株的多次转接有直接的关系。
- 邓勋宋瑞清闵凯宋小双孙海珍
- 关键词：白腐菌木质素降解酶
