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排序方式：

SARS病毒受体ACE2的克隆、原核表达及其功能区鉴定被引量：2: 2006年; ACE2（angiotensin—converting enzyme 2，ACE2）是SARS冠状病毒（severe acute respiratory syndrome associated coronavirus，SARS-CoV）的主要受体。此研究旨在鉴定ACE2的SARS-CoV受体功能区，为进一步阐明SARS-CoV与细胞间的相互作用机制及研制抗病毒药物等提供理论依据。利用RT—PCR从Vero-E6细胞的mRNA中分两段扩增ACE2基因，其中N端片段ACE2A1-367（102～1210nt）不包括ACE2的酶活性位点（1223～1237nt，或374～378aa），而C端片段ACE28335-805（1101～2524nt）包括ACE2的酶活性位点。扩增片段克隆入pMD-18T，并进行测序鉴定。进一步构建与GST基因融合表达的原核表达质粒pGEX—ACE2A与pGEX—ACE2B，IPTG诱导表达。表达的融合蛋白分子量为65kD和77kD，主要以包涵体形式存在。Western blot证实表达产物具有免疫学活性。将纯化的包涵体蛋白质复性后进行Western blot分析，证实pGEX—ACE2A表达的蛋白（～65kD）能与SARS-CoV S1蛋白特异结合，而pGEX—ACE2B表达的蛋白（～77kD）不能与S1蛋白结合。结果表明，ACE2的受体活性与酶活性位点无关，受体功能区在ACE2N端367个氨基酸内。; 杨国良费小战陈焕春郭爱珍; 关键词：ACE2 克隆功能区

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杨国良