目的:观察长链游离脂肪酸对体外培养的角质形成细胞的作用,探讨其对TLR及NF-ΚB信号转导通路的影响。方法:①体外培养Hacat细胞,实验分为N、PA、SA、LPS四组,N组为正常对照组,软脂酸(Palmitic Acid,PA)750μmol/L、硬脂酸(Stearic Acid,SA)750μmol/L、脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)500 ng/L和Hacat细胞共培养72h组分别为N组、PA组、SA组、LPS组;②LPS、SA与角质形成细胞共培养72h检测LPS、SA对Hacat细胞NF-κB、p-IκBα、IκBα表达的影响。通过免疫印迹法(Weston blot)检测SA、LPS对Hacat细胞TLR2、TLR4、NF-ΚB、p-IκBα、IκBα表达的影响;Real Ti me PCR方法检测对Hacat细胞内NF-κB、TNF-αmRNA表达的影响。结果:SA、LPS激活细胞表面TLR后可以明显促进细胞表面TLR2、TLR4表达及细胞内NF-κB、TNF-α等促炎症因子的表达。PA促进Hacat细胞内NF-ΚB、p-IκBα、IκBα表达无明显影响(P>0.05)结论:SA可促进角质形成细胞分泌NF-κB、TNF-α等因子表达促进炎症反应;其机制可能为:SA可能通过TLR及NF-κB信号传导通路促进细胞释放NF-κB、TNF-α等促炎因子。
