曾思良
- 作品数：8 被引量：26H指数：3
- 供职机构：上海师范大学天华学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 肌动蛋白结合脂筏促进巨噬细胞摄入土拉弗朗西斯菌被引量：2
- 2011年
- 观察土拉弗朗西斯菌LVS借助脂筏以肌动蛋白为动力被鼠巨噬细胞摄入的过程。细胞胆固醇用菲律平Ⅲ染色,结合神经节苷酯GM1的霍乱毒素B亚基用键合了Alexa 594的兔抗霍乱毒素B亚基二抗显色;肌动蛋白用键合了Alexa 594的鬼笔环肽显色。免疫荧光显微镜观察到脂筏成分中的胆固醇、神经节苷酯GM1均可与细菌共定位;胆固醇可与肌动蛋白共定位。随着感染时间的延长,细菌可离开脂筏。离开脂筏的细菌囊泡可与肌动蛋白共定位。这些发现提示肌动蛋白与脂筏结合,在弗朗西斯菌早期进入巨噬细胞期间发挥重要作用。
- 潘欣曾思良蔡家麟吴鉴今杨光黄通来
- 关键词：巨噬细胞土拉弗朗西斯菌脂筏胆固醇肌动蛋白
- 基于Micro-CT分析补肾方干预骨质疏松症大鼠模型的疗效被引量：1
- 2022年
- 目的 基于Micro-CT探究补肾方对去卵巢骨质疏松大鼠股骨骨微结构、骨周围血管体积、骨力学和血清碱性磷酸酶(ALP)的影响。方法 选择3月龄雌性SD大鼠30只,随机分为对照组、补肾方干预组和戊酸雌二醇干预组,10只/组,摘除双侧卵巢。造模3月后,分别用注射用0.9%NaCl溶液、补肾方、戊酸雌二醇灌胃干预4周,通过Micro-CT扫描观察股骨微结构和骨周围血管体积,小动物骨骼强度测定仪测量骨折应力和压碎力,并检测大鼠血清ALP活性。结果 与对照组相比,Micro-CT扫描结果显示,补肾方干预组可明显改善骨密度(P=0.0114),提高骨体积分数(P=0.0006),增加骨小梁数目(P=0.0016),加厚骨小梁厚度(P=0.0050),血管体积(P<0.0001);骨骼强度检测显示,补肾方干预组股骨骨折应力增强(P=0.0044);同时ALP活性增加(P=0.0181)。结论 补肾方能显著改善股骨骨微结构,提升骨周围血管体积,增强骨折应力,提高ALP水平,提示其可能成为今后临床治疗骨质疏松患者的配方。
- 曾思良潘欣
- 关键词：补肾方卵巢股骨骨力学
- 结核分枝杆菌Rv0733-6His抗原羊驼单域重链抗体的筛选与鉴定
- 2013年
- 单域重链抗体是目前中和胞内病原体抗原的重要分子之一,研究以结核分枝杆菌Rv0733-6His融合抗原为靶标,对羊驼非免疫单域重链抗体库进行了3轮淘洗,通过ELISA和测序方法,从1 024个克隆中筛选出10个独立单域重链抗体序列,继而用原核表达并鉴定了1株Rv0733-VHH-Fc-6His抗体。免疫印迹和免疫荧光结果均显示Rv0733-VHH-Fc-6His抗体可以特异性地结合Rv0733抗原。提示Rv0733-VHH抗体可能具备结合胞内菌相关抗原的潜力。
- 潘欣蔡家麟王颖陈建霞曾思良方伟陈敏廖万清余秀珍张俊宋维
- 关键词：结核分枝杆菌表达纯化噬菌体抗体库
- 补肾方含药血清干预大鼠椎间盘软骨细胞miRNA的差异表达被引量：6
- 2016年
- 目的筛选补肾方含药血清干预大鼠椎间盘软骨细胞后差异表达的miRNA,为补肾方治疗颈椎病提供可供选择的目标miRNA,以探讨其通过调控靶基因表达发挥治疗效应的机制。方法原代培养的大鼠椎间盘软骨细胞经Ⅱ型胶原酶免疫荧光染色和甲苯胺蓝染色鉴定后,分别用补肾方含药血清、空白血清干预椎间盘软骨细胞,在给定时间点收获细胞,抽提纯化总RNA,行miRNA芯片检测,通过芯片差异性分析,挑选差异表达4倍以上的miRNA行定量聚合酶链式反应(PCR)验证。结果二次酶消化法可简便高效培养大量原代椎间盘软骨细胞,所培养细胞具有典型的椎间盘软骨细胞形态和功能,Ⅱ型胶原酶免疫荧光染色和甲苯胺蓝染色均为阳性。补肾方含药血清干预组芯片数据分别与相应时间点的空白血清组芯片数据行组间比较后再行组内比较,与含药血清干预椎间盘软骨细胞1 d相比,干预3 d的共有121个2倍以上表达差异的miRNA,其中上调的53个,下调的68个。差异表达4倍以上的miRNA定量PCR结果与芯片数据一致。结论补肾方含药血清干预椎间盘软骨细胞获得了一套较为特异的miRNA,初步预测上调的miRNA可能通过靶向Opn、Col、Bcl212、Vdr、IGF-I、Mmp-13等基因在椎间盘营养代谢相关信号通路中发挥作用。
- 潘欣梁兴伦曾思良嵇承栋周文锐李琛朱敏洁许畅付强强万悦竹马瑜于德华
- 关键词：补肾方软骨细胞
- 急性阑尾炎炎性标志物联合CT分级与病理类型相关性研究被引量：7
- 2019年
- 目的:探讨急性阑尾炎病人术前血液炎性标志物联合腹部螺旋CT检查与阑尾炎病理类型的相关性,以提高急性阑尾炎的早期诊断水平。方法:回顾性分析133例急性阑尾炎病人的血液炎性标志物检测结果,并与腹部CT检查和病理组织分析结果进行分析比较。结果:急性阑尾炎病理检查为单纯性阑尾炎14例,化脓性108例,坏疽性或穿孔性11例。病理分级与腹部CT检查分级显著相关(R=0.374,P<0.001)。血液炎性标志物白细胞(white blood cell,WBC)计数、中性粒细胞百分比(neutrophil percentage,N%)、C反应蛋白(C reaction protein,CRP)浓度与CT检查阑尾直径同时升高(WBC≥12.45×109/L,N%≥81.80%,CRP浓度≥22.56 mg/L,阑尾直径≥8.75 mm)有助于鉴别诊断单纯性阑尾炎与坏疽性或穿孔性阑尾炎。CRP浓度高于截断值54.00 mg/L有助于鉴别诊断坏疽性或穿孔性阑尾炎与单纯性或化脓性阑尾炎。CT检查≥1级的病人,呈现WBC计数、N%、CRP浓度与阑尾直径任一指标升高的特征。CT检查≥2级病人,CRP浓度与阑尾直径都升高;CT检查≥3级病人,呈现WBC计数、N%与CRP浓度都升高。结论:检查坏疽性或穿孔性阑尾炎病人血液CRP浓度明显升高,有助于坏疽性或穿孔性阑尾炎与单纯性或化脓性阑尾炎的鉴别诊断。WBC计数、N%、CRP浓度联合CT检查阑尾直径,有助于急性阑尾炎的早期鉴别诊断。
- 王健潘欣唐翠马乐曾思良
- 关键词：急性阑尾炎腹部CT平扫病理类型
- 补肾方含药血清处理的大鼠成骨细胞miRNA差异表达被引量：3
- 2017年
- 目的筛选补肾方含药血清干预的大鼠成骨细胞中差异表达的miRNA,为补肾方治疗骨质疏松症提供可供选择的目标miRNA,以探讨其通过调控靶基因表达发挥治疗效应的机制。方法经细胞性状鉴定的原代大鼠成骨细胞用含药血清干预,采用miRNA芯片检测补肾方含药血清干预3d与干预1d的成骨细胞miRNA表达水平,并挑选差异表达2倍以上的miRNA进行定量PCR验证。结果培养的原代细胞具有典型的成骨细胞性状特征。与对照血清相比,补肾方含药血清干预3d的成骨细胞共有24个2倍以上表达差异的miRNA,其中上调的16个,下调的8个。差异表达2倍以上的miRNA定量PCR结果与芯片数据一致。结论补肾方通过成骨细胞中差异表达的miRNA调控靶基因改善骨质疏松症。
- 梁兴伦潘欣曾思良嵇承栋周文锐李琛朱敏洁刘传颂周文博许诚钱淑雯于德华张韶伟朱卫红
- 关键词：MIRNA芯片补肾方成骨细胞MIRNA
- 大鼠成骨细胞微小RNAs的筛选研究被引量：2
- 2017年
- 目的应用微小RNAs(microRNAs,miRNAs)芯片技术筛选补肾方含药血清干预大鼠成骨细胞后差异表达的miRNAs,与前期获得的软骨细胞差异miRNAs比较,筛选出共有差异miRNAs,以探讨补肾方通过共有miRNAs调控靶基因表达发挥治疗效应的机制。方法原代培养的大鼠成骨细胞经碱性磷酸酶染色、Ⅰ型胶原免疫荧光染色和矿化结节染色鉴定后,用补肾方含药血清干预成骨细胞,在给定时间点收获细胞,抽提纯化总RNAs行miRNAs芯片检测,并挑选差异表达4倍以上的miRNAs行实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应验证。结果所培养的原代细胞具有典型的成骨细胞形态和功能,碱性磷酸酶染色、Ⅰ型胶原免疫荧光染色和矿化结节染色均为阳性。与补肾方含药血清干预成骨细胞1 d相比,干预6 d的共有229个2倍以上表达差异的miRNAs,其中上调的52个、下调的177个。差异表达4倍以上的miRNAs实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应结果与芯片数据一致。与前期软骨细胞差异miRNAs芯片数据比较,miRNAs均上调2倍以上的有8个、下调4倍以上的2个。结论补肾方含药血清干预成骨细胞获得了一套较为特异的miRNAs,初步预测上调的miRNAs可能通过靶向Runx2、Wnt、Notch、Axin2等基因在骨发育、骨形态发生、骨吸收以及软骨内成骨形成等相关的信号通路中发挥作用。
- 潘欣曾思良梁兴伦嵇承栋周文博周文锐李琛朱敏洁沈琪
- 关键词：补肾方成骨细胞
- MicroRNA-195-5p调节Bmpr1α表达对骨髓间充质干细胞成脂分化的影响被引量：8
- 2017年
- 目的探讨miR-195-5p在补肾方含药血清干预大鼠原代骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cell,BM SC)中的表达及其对成脂分化的影响。方法体外贴壁法原代培养的大鼠BM SC细胞经流式细胞术、CD44和CD34免疫荧光染色鉴定后,与椎间盘软骨细胞和成骨细胞一起采用荧光定量RT-PCR方法检测细胞中rno-miR-195-5p的表达情况;采用荧光素酶报告基因实验验证骨形态发生蛋白受体-1α(Bmpr1α)是否为rno-miR-195-5p的靶基因,采用Western印迹法和油红O染色检测rno-miR-195-5p对Bmpr1α表达和BMSC成脂分化的影响。结果流式细胞术与免疫荧光分析显示所培养细胞具备BMSC特征。rno-miR-195-5p在补肾方含药血清干预的原代BM SC中表达明显升高(P<0.01),且在分化完成的软骨细胞和成骨细胞中高表达。双荧光素酶报告实验与Western印迹法证实Bmpr1α是rno-miR-195-5p的靶基因。转染rno-miR-195-5p mimics上调BM SC中rno-miR-195-5p可抑制Bmpr1α的表达(P<0.05),降低成脂分化能力;而转染rno-miR-195-5p inhibitor可显著增加BM SC中Bmpr1α的表达(P<0.01),增强成脂分化能力。结论补肾方含药血清干预BMSC上调rno-miR-195-5p,通过降低其靶基因Bmpr1α的表达而降低BMSC的成脂分化,改善骨质疏松症状。
- 潘欣曾思良梁兴伦嵇承栋刘晓东廖万清
- 关键词：骨髓间充质干细胞骨质疏松
