刘海霞
- 作品数：16 被引量：42H指数：4
- 供职机构：第四军医大学西京医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金陕西省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 转录因子KLF4与肿瘤EMT的分子机制研究进展
- 2016年
- 上皮间质转化(EMT)是一种在胚胎发育和损伤修复过程中的生理性改变,其是肿瘤发生和发展过程中的一种常见现象,但作用及机制尚不完全清楚。目前已经发现多个转录因子通过调控下游靶基因参与了EMT的发生过程,其中Krüppel样因子4(KLF4)能够活化上皮基因的表达,同时抑制间质基因的表达,在EMT发生过程中发挥着关键作用,可能是肿瘤治疗的新靶点。该文系统地总结了转录因子KLF4在肿瘤EMT发展过程中的作用及分子机制。
- 任晓丽陈丽君宋晖刘海霞陈必良
- 关键词：肿瘤上皮间质转化分子机制
- 热休克转录因子1与雌激素受体在子宫内膜癌中的表达及意义被引量：1
- 2014年
- 目的:探讨子宫内膜癌组织中热休克转录因子1(heat-shock transcription factor 1 HSF1)在子宫内膜癌组织中的的表达及临床意义。方法:应用免疫组织化学法检测17例正常子宫内膜、28例不典型增生及101例子宫内膜癌组织中HSF1和雌激素受体α、β(ERα、β)的表达情况,观察在子宫内膜组织中HSF1表达情况。分析其与年龄、临床分期、组织学分级、浸润程度、淋巴结转移间以及雌激素表达的关系。结果:HSF1在正常子宫内膜中的阳性表达率为52.9%,在不典型增生组织中的阳性表达率67.9%,在子宫内膜癌中的阳性表达率为77.2%,HSF1蛋白表达强度在正常、不典型增生和内膜癌组间比较有统计学差异(P<0.05)。HSF1表达与病理分型、肌层侵润深度、淋巴结转移以及雌激素表达有关(P<0.05),与年龄、临床分期无关。ERα正常子宫内膜中的阳性表达率为88.2%,在不典型增生组织中的阳性表达率85.7%,在子宫内膜癌中的阳性表达率为55.4%,ERα表达强度在正常、不典型增生和内膜癌组间比较有统计学差异(P<0.05)。ERβ正常子宫内膜中的阳性表达率为76.5%,在不典型增生组织中的阳性表达率71.4%,在子宫内膜癌中的阳性表达率为51.0%,ERβ表达强度在正常、不典型增生和内膜癌组间比较有统计学差异(P<0.05)。结论:HSF1在正常子宫内膜、子宫内膜不典型增生、子宫内膜癌中的表达逐渐增高并表现为促癌作用,ERα、β在正常子宫内膜、子宫内膜不典型增生、子宫内膜癌中的表达逐渐增高并表现为抑癌作用,在ERα、β阴性的癌组织中HSF1这种促癌作用更明显,这有助于为子宫内膜癌患者制定个体化治疗方案以及进一步研究诊治中提供依据。
- 刘海霞陈必良张建芳李佳许欣梁声茹
- 关键词：子宫内膜癌雌激素受体免疫组织化学
- siRNA干扰ΔNp63基因表达对人宫颈癌Siha细胞增殖及凋亡影响研究被引量：1
- 2016年
- 目的通过抑制宫颈癌细胞株Siha中ΔNp63的表达,探讨ΔNp63对宫颈癌细胞增殖及凋亡的影响。方法将宫颈癌细胞株Siha分为实验组和对照组,实验组转染ΔNp63的特异性siRNA,对照组转染阴性对照siRNA。实时荧光定量PCR(QRT-PCR)及蛋白质印迹法检测Siha细胞转染前后ΔNp63基因在mRNA及蛋白水平的变化;CCK8法检测细胞增殖,流式细胞仪测定细胞凋亡率。结果实验组Siha细胞转染siRNA后,ΔNp63的mRNA表达为0.32±0.06,低于阴性对照组0.95±0.08(t=10.92,P<0.05)。实验组Siha细胞转染siRNA后,ΔNp63的蛋白表达为0.32±0.09,低于阴性对照组1.00±0.06(t=9.78,P<0.05)。实验组Siha细胞生长速度明显低于阴性对照组,实验组Siha细胞凋亡率为2.13±0.75,低于阴性对照组14.19±1.36(t=15.36,P<0.05)。结论人宫颈癌细胞株中存在ΔNp63的表达,特异性siRNA可下调宫颈癌细胞株Siha中ΔNp63基因的表达,对细胞的增殖具有负性调节作用,并能诱导细胞凋亡。
- 李娜刘玉马芮周福兴刘海霞罗天爱陈必良
- 关键词：宫颈癌ΔNP63RNA干扰细胞增殖
- KLF4在肿瘤中的最新研究进展被引量：1
- 2016年
- 上皮锌指蛋白4(KLF4)是一个在多种组织中表达的锌指结构转录因子,包括肠上皮及皮肤组织,它在细胞变异及细胞周期停滞都发挥着重要作用。首先,根据靶基因功能,KLF4既可以激活也可以抑制转录作用;其次,在不同的细胞微环境中,KLF4既可以作为肿瘤抑制因子,也可以作为癌基因;再者,KLF4在重组已分化成纤维母细胞为类似胚胎干细胞的可诱导多能干细胞中发挥重要作用。该综述目的是总结KLF4的生物特性及其与肿瘤发生发展的分子机制最新进展。
- 刘海霞宋晖马芮李娜周福兴陈必良
- 关键词：肿瘤增殖分化上皮间质转化
- 高血糖通过HBP途径增加SD大鼠子宫内膜细胞内β-catenin稳定性
- 2016年
- 目的：探讨高血糖通过HBP途径增加子宫内膜细胞内β-catenin稳定性的相关机制。方法50只SD雌性大鼠随机分为正常对照组、禁食组、高糖高脂组、葡萄糖胺组和葡萄糖组。高糖高脂组给予高糖高脂饲料喂养，其他组普通饲料喂养。8周后将高糖高脂组和正常对照组大鼠处死；禁食组禁食24h后处死；葡萄糖胺组禁食24h后给予葡萄糖胺2．50g／kg灌胃，3h后处死；葡萄糖组禁食24 h后给予葡萄糖5 g／kg灌胃，3 h后处死。分别取各组大鼠子宫内膜组织，检测相关蛋白和基因表达水平。结果 HSHF组和NC组相比，各饲养周空腹血糖水平均明显升高（t值2．34～2．78，均P＜0．05）。 GLU组和FASTING组相比，血糖水平明显升高（t＝3．46，P＜0．05），而GLN组和FASTING组相比血糖水平无统计学差异（t＝0．84，P＞0．05）。 Western blot检测结果相对表达量分析显示， GLN组和GLU组子宫内膜组织内β-catenin、O-GlcNAc表达量均明显高于FASTING组（ t值3．44～5．08，均P＜0．05），而GLN组和GLU组之间β-catenin、O-GlcNAc表达量均无统计学差异（t值分别为0．75、0．66，均P＞0．05）。 RT-PCR检测HSHF组Ctnnb1表达水平与NC组相比无统计学差异（t ＝0．43，P＞0．05），而β-catenin特异性靶基因CyclinD1和Axin2表达水平HSHF组明显高于NC组（t值分别为4．48、5．26，均P＜0．05）。结论高血糖能够通过HBP途径，使β-catenin的O-GlcNAc化增加，从而增加其稳定性，使进入细胞核内的β-catenin增多，持续作用于下游靶基因引起细胞异常增殖分化。
- 周福兴陈颖刘高伟刘海霞李娜马芮陈必良
- 关键词：高血糖内膜癌WNT/Β-CATENINO-GLCNAC
- KLF4 siRNA慢病毒载体构建和鉴定
- 2016年
- 目的:构建上皮锌指蛋白4(Krüppel-like factor 4,KLF4)siRNA慢病毒载体并进行初步鉴定,为研究KLF4在宫颈细胞癌中的分子机制奠定基础。方法:利用公用网站中提供的RNA干扰序列设计原则,设计4个RNA干扰靶点序列,合成含干扰序列的单链DNA oligo,然后退火配对产生双链,再通过其两端所含酶切位点直接连入酶切后的RNAi慢病毒载体上;将连接产物转入制备好的细菌感受态细胞,PCR鉴定阳性重组子后,送测序验证,测序结果经比对确认正确的克隆,制备编码慢病毒颗粒的重组病毒质粒及其两种辅助包装原件载体质粒,共转染293T细胞,收集富含慢病毒颗粒上清液,对其浓缩后得到高滴度的慢病毒浓缩液,在293T细胞中测定并标定病毒滴度。收集上清液感染宫颈癌He La细胞,通过q RT-PCR及Western Blot鉴定KLF4 siRNA慢病毒干扰效果。结果:成功构建KLF4 siRNA慢病毒载体。KLF4 siRNA慢病毒感染He La细胞后,q RT-PCR及Western Blot测定结果显示,KLF4表达明显降低。结论:KLF4 siRNA慢病毒载体构建及包装成功,可有效抑制KLF4表达,为研究KLF4生物学功能奠定基础。
- 刘海霞魏莉任晓丽宋晖陈必良
- 关键词：慢病毒载体SI宫颈癌
- siRNA抑制S100A4表达对卵巢癌细胞CP70生物学特性的影响被引量：2
- 2014年
- 目的:探讨人卵巢癌顺铂耐药细胞株CP70沉默S100A4基因后,CP70细胞对顺铂敏感性、凋亡及细胞迁移的影响。方法:设计并合成S100A4基因特异性的siRNA并转染入卵巢癌细胞CP70,48 h后应用RT-PCR和Western Blot检测在mRNA和蛋白水平siRNA对S100A4的影响,MTT法检测转染siRNA后卵巢癌细胞CP70对顺铂敏感性的变化。用流式细胞术检测顺铂(40μM)对转染S100A4 siRNA后对卵巢癌细胞CP70凋亡的影响,Transwell法观察siRNA抑制S100A4后对卵巢癌CP70迁移能力的影响。结果:与空白对照组、阴性对照组相比,S100A4siRNA转染组CP70细胞的S100A4基因和蛋白表达降低(P<0.01)。MTT法检测顺铂敏感性发现S100A4 siRNA转染组CP70细胞顺铂敏感性增强。在顺铂刺激下,siRNA转染组细胞凋亡率高于其他各组,差异具有统计学意义(P<0.05)。Transwell发现CP70细胞迁移能力明显下降(P<0.05)。结论:S100A4 siRNA能够明显抑制CP70细胞S100A4的表达,从而增强细胞对顺铂的敏感性,促进细胞凋亡,减弱细胞的迁移能力。S100A4有望成为逆转卵巢癌铂类耐药的治疗靶点。
- 许欣辛晓燕李佳刘海霞魏翻艳
- 关键词：S100A4小分子干扰RNA卵巢癌顺铂耐药
- 人组织激肽释放酶4在子宫内膜癌中的表达和预后的关系被引量：2
- 2014年
- 目的 探讨人组织激肽释放酶4（ KLK4）在子宫内膜癌中的表达和对预后的影响，为改善子宫内膜癌的预后提供新的思路。方法 免疫组化法检测81例子宫内膜癌、30例不典型增生的子宫内膜和30例正常子宫内膜中KLK4的表达情况，收集患者临床病理资料，结合随访资料做生存分析，并分析KLK4的表达和子宫内膜癌预后的关系。结果 KLK4在正常内膜、不典型增生内膜和子宫内膜癌中的高表达率分别为30％、53％、67％，差异有统计学意义（χ^212．059，P＝0．002）；KLK4的高表达和子宫内膜癌的分化程度及深肌层浸润相关（χ^2=7．985，P＝0．021；χ^2=4．629，P＝0．031），与年龄、临床分期、淋巴结转移无关（χ^2分别为0．266、1．761、0．277，均P＞0．05）；KLK4高表达组的5年无进展生存率较低表达组更低，差异有统计学意义（P＝0．032）。结论 KLK4的高表达可能与子宫内膜癌细胞的分化和局部侵袭有关，其高表达提示早期复发，KLK4有可能作为预测子宫内膜癌早期复发的标志物。
- 张千峰李佳刘海霞邸曼周卓陈必良
- 关键词：子宫内膜癌免疫组化预后
- 子宫移植的外科应用技术现状被引量：4
- 2013年
- 对于不可治愈的永久性子宫不孕者而言，子宫移植被认为是其唯一解决的方法。目前，通过不同的实验动物模型研究已证明子宫移植应用于临床是具有可行性的。现已有2例人类子宫移植，第1例以失败告终，第2例至今已建立12个月经周期。这些发现毫无疑问地为子宫移植将来运用于临床打下了坚实的基础。在实验性子宫移植技术领域的最新进展为人类临床性子宫移植试验方案的进行提供了安全有效的依据和背景。该综述系统地总结了子宫移植外科技术的最新进展。
- 刘海霞陈必良
- 关键词：子宫外科技术不孕
- siRNA沉默KLF4表达促进HeLa细胞上皮间质化被引量：1
- 2016年
- 目的:探讨Klf4表达水平对Hela细胞上皮间质转化的影响。方法:设计合成针对Klf4的siRNA和阴性对照siRNA,并转染至Hela细胞。用含10ng/ml TGF-β1和10%胎牛血清的DMEM培养液诱导Hela细胞发生上皮间质转化,对照组使用不含TGF-β1的培养液。倒置显微镜下观察记录细胞的形态学改变。Western blot法和细胞免疫荧光法检测Klf4、上皮标志分子E-cadherin、ZO-1及间质标志分子N-cadherin的表达变化。结果:在TGFβ1的诱导作用下,Hela细胞呈现出梭形、类成纤维细胞的形态,发生了上皮间质转化。Western blot和细胞免疫荧光检测结果显示,Hela细胞在TGFβ1诱导作用下,Klf4、上皮标志分子E-cadherin、ZO-1表达减少,间质标志分子N-cadherin表达增多。转染了si Klf4的Hela细胞经TGFβ1诱导后,与转染了阴性对照siRNA的细胞相比,上皮标志分子E-cadherin、ZO-1表达略有减少,而间质标志分子N-cadherin的表达则明显增多。结论:抑制Klf4表达可以促进Hela细胞的上皮间质转化。
- 任晓丽宋晖刘海霞魏莉陈必良
- 关键词：上皮间质转化HELA细胞转化生长因子Β1
