刘云芬
- 作品数：2 被引量：8H指数：2
- 供职机构：云南农业大学农学与生物技术学院更多>>
- 发文基金：云南省自然科学基金云南省社会发展科技计划云南省科技厅重点产业创新工程项目更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 岩白菜ISSR-PCR反应体系的优化被引量：5
- 2012年
- 目的:优化岩白菜ISSR-PCR反应体系,为利用ISSR标记进行岩白菜遗传多样性研究服务。方法:采用5因子4水平正交设计法优化岩白菜ISSR-PCR反应体系。结果:五个因子从大到小的影响力排序结果为:dNTPs>Mg2+>模板DNA>引物=Taq酶。岩白菜ISSR-PCR最佳反应体系为:总体积25μL,内含10×PCR缓冲液2.5μL、2.5 mmol.L-1Mg2+、2.0 U Taq酶、0.2 mmol.L-1dNTPs、0.48μmol.L-1ISSR引物、125 ng模板DNA。结论:研究获得的最佳反应体系具有标记位点清晰、反应系统稳定、检测多态性能力强、重复性好等特点,为利用ISSR标记技术研究岩白菜遗传多样性奠定了基础。
- 刘芸君王仕玉郭凤根刘云芬杨正安张应华
- 关键词：岩白菜ISSR-PCR反应体系
- 云南岩白菜资源的DNA提取和ISSR引物筛选被引量：3
- 2012年
- 提取滇产岩白菜资源的基因组DNA并进行ISSR引物的筛选,为用ISSR标记研究云南岩白菜资源的遗传多样性奠定基础。DNA提取采用改良的CTAB法,质量检测采用琼脂糖凝胶电泳法和紫外分光光度计法,ISSR引物选用加拿大哥伦比亚大学开发的100条引物。结果表明,从18份云南岩白菜资源的幼叶中提取了基因组DNA,浓度在1 387.5～12 000 ng/μL之间,A260/A280的值在1.61～1.85之间,琼脂糖凝胶电泳检测呈一条带;从100种ISSR引物中筛选出了22种扩增结果好的引物。所提DNA质量较高,该提取方法适用于从酚类和蛋白质含量高的植物材料中提取DNA;22个ISSR引物可用于岩白菜资源的遗传多样性研究。
- 王仕玉郭凤根刘芸君刘云芬杨生超张应华
- 关键词：岩白菜DNA提取
