梁小龙
- 作品数:1 被引量:3H指数:1
- 供职机构:海南大学海洋学院热带生物资源教育部重点实验室更多>>
- 发文基金:国家高技术研究发展计划海南省自然科学基金更多>>
- 相关领域:生物学更多>>
- 波纹唇鱼神经肽Y基因的克隆及原核表达被引量:3
- 2014年
- 以波纹唇鱼为实验对象,采用同源基因克隆技术和RACE技术得到神经肽Y基因的cDNA全长序列.波纹唇鱼npy的cDNA全长序列为645 bp,包含59 bp的5'UTR、300 bp的ORF和286 bp的3'UTR.分子进化的比对分析表明,波纹唇鱼NPY前体与斜带石斑鱼和锯隆头鱼的亲缘关系最近.波纹唇鱼ORF编码99个氨基酸,NPY前体多肽包括:信号肽、成熟肽、Gly-Lys-Arg翻译后加工位点和羧基末端侧翼肽段(CPON).该NPY前体的预测分子质量为11.27 kD,理论等电点为5.51.采用pET-32a(+)原核表达系统构建波纹唇鱼npy基因的原核表达重组子pET-32a(+)-NPY,并获得重组菌株.对重组蛋白表达菌株进行培养条件优化,结果表明:该菌株在30℃,0.6 mmol/L IPTG,培养时间8 h的条件下,重组蛋白的表达效率最高.
- 佘长宁黄飞文鑫梁小龙吴海武陈国华骆剑
- 关键词:波纹唇鱼CDNA克隆原核表达