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高温α-淀粉酶基因突变体在大肠杆菌、毕赤酵母中的表达被引量：13: 2006年; 对地衣芽孢杆菌（Bacillus licheniforrnis）高温α-淀粉酶（amyE）基因进行改造获得的基因突变体（amyEM），通过PCR扩增，将此基因分别克隆至大肠杆菌表达载体pBV220和毕赤酵母表达载体pPIC9K上，并分别转化大肠杆菌DH5a和毕赤酵母GS115感受态细胞，获得重组大肠杆菌和重组毕赤酵母。通过表达产物的酶活性检测和SDS-PAGE分析，证明突变α-淀粉酶（AmyEM）在大肠杆菌、毕赤酵母中获得有效表达。对重组大肠杆菌产生的α-淀粉酶的粗酶性质分析表明，此酶分子量约为55kDa。其最适反应温度为80℃～90℃，与野生型基因相比，其最适pH均为6．0，但不同的是突变体在pH5．0—5．5时表现出较高的酶活力；在毕赤酵母细胞的表达产物可分泌至胞外。由于酵母可对蛋白进行糖基化，酶分子量增加到60kDa，最适pH也改变为5．5。此高温α-淀粉酶突变体所具有的在微酸性环境具有较高酶活力的性质，具有重要的潜在工业应用价值。; 杜冰冰郝帅李运敏岳丽丽矫庆华; 关键词：高温Α-淀粉酶基因突变体酶活力最适PH

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杜冰冰