朱丽伟
- 作品数：3 被引量：4H指数：2
- 供职机构：南京医科大学更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- HAP1对乳腺癌细胞MCF-7生物学特性影响的观察被引量：2
- 2013年
- 目的:探讨亨廷顿相关蛋白1(HAP1)基因过表达对人乳腺癌细胞株MCF-7增殖、体外迁移侵袭和细胞凋亡的影响及其可能机制。方法:通过转染的方法将逆转录病毒pBabe-puro(嘌呤霉素)HAP1质粒和pBabe-puro质粒导入人乳腺癌细胞系MCF-7,用嘌呤霉素筛选稳定表达两质粒的细胞系,荧光定量PCR和蛋白质印迹法鉴定是否成功构建HAP1过表达细胞系;细胞增殖-毒性检测试剂盒(CCK-8)和克隆形成实验检测细胞的生长增殖,Transwell小室法检测细胞的侵袭和迁移,流式细胞仪检测细胞的凋亡。结果:成功构建稳定表达pBabe-HAP1的MCF-7-pBabe-puro-HAP1细胞模型。CCK-8检测72h细胞增殖率,MCF-7-pBabe-puro-HAP1为(75.97±6.76)%,明显低于MCF-7-pBabe-puro细胞(93.98±6.63)%(P=0.03)及MCF-7细胞(100.00±0.00)%,P=0.004;MCF-7-pBabe-puro-HAP1细胞克隆形成率为(22.67±1.26)%,明显低于MCF-7(35.00±0.50)%(P=0.000)和MCF-7-pBabe-puro细胞(33.83±0.76)%,P=0.000;Transwell小室侵袭和迁移实验表明,MCF-7-pBabe-puro-HAP1组的侵袭(3.33±0.58,P=0.000)和迁移(50.00±3.61,P<0.01)能力明显降低;流式细胞仪检测细胞凋亡,MCF-7-pBabe-puro-HAP1凋亡率为(8.03±0.15)%,高于MCF-7-pBabe-puro(3.13±0.25)%(P=0.000)和MCF-7细胞(3.33±0.35)%,P=0.000。结论:HAP1基因能够抑制肿瘤细胞增殖和迁移侵袭,并能诱导细胞凋亡,其可能作为一个抑癌基因在肿瘤发生发展中发挥重要作用。
- 宋雪朱丽伟唐金海吴建中马蓉曹海霞
- 关键词：乳腺肿瘤MCF-7
- 亨廷顿相关蛋白1对MDA-MB-231细胞生长抑制及其机制的探讨被引量：2
- 2013年
- 目的:探讨HAP1基因过表达对人乳腺癌细胞株MDA-MB-231增殖、体外迁移侵袭和细胞凋亡的影响及其可能机制。方法:使用实时荧光定量PCR检测30例女性乳腺癌患者肿瘤组织与癌旁组织中HAP1的表达情况。通过转染的方法将逆转录病毒pBabe-puro(嘌呤霉素)HAP1质粒和pBabe-puro质粒导入人乳腺癌细胞系MDA-MB-231,嘌呤霉素筛选稳定表达两质粒的细胞系,荧光定量PCR和蛋白质印迹法鉴定是否成功构建HAP1过表达细胞系;细胞增殖-毒性检测试剂盒(CCK-8)和克隆形成实验检测细胞的生长增殖,Transwell小室法检测细胞侵袭和迁移,流式细胞仪检测细胞凋亡和周期,荧光定量PCR检测凋亡相关基因表达情况。结果:荧光定量结果显示,约75%正常组织中HAP1表达比相应癌组织表达高3倍以上。成功构建稳定表达pBabe-HAP1的MDA-MB-231-pBabe-puro-HAP1细胞模型。CCK-8检测72h的细胞存活率MDA-MB-231-pBabe-puro-HAP1为(74.9±6.0)%,低于MDA-MB-231细胞(100.0±0.0)%,P=0.019,也低于MDA-MB-231-pBabe-puro细胞(99.8±6.0)%,P=0.007;细胞克隆形成实验结果显示,MDA-MB-231-pBabe-puro-HAP1组的克隆形成率为(9.3±1.9)%,明显低于MDA-MB-231细胞组(16.0±2.6)%,P=0.024,也低于MDA-MB-231-pBabe-puro细胞组(15.8±2.5)%,P=0.022;Transwell小室侵袭和迁移实验表明,MDA-MB-231-pBabe-puro-HAP1组的侵袭(F=0.339,P=0.725)和迁移(F=0.844,P=0.475)能力无明显改变;流式细胞仪检测细胞凋亡结果显示,MDA-MB-231-pBabe-puro-HAP1凋亡率与MDA-MB-231和MDA-MB-231-pBabe-puro细胞组差异无统计学意义,F=0.564,P=0.596;细胞周期结果发现,HAP1组细胞周期中G2M期所占比例为(14.84±0.90)%,与pBabe组(11.76±0.93)%和MDA-MB-231组(11.19±0.94)%相比明显增加。3组细胞中凋亡相关蛋白Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9、Bcl-2、Bax和Survivin的表达差异无统计学意义,F=0.564,P=0.596。结论:HAP1可能通过细胞周期阻滞抑制乳腺癌细胞的生长,其降低或缺失可能引起乳腺癌�
- 朱丽伟宋雪唐金海吴建中马蓉曹海霞
- 关键词：乳腺肿瘤凋亡MDA-MB-231
- 亨廷顿相关蛋白1对乳腺癌细胞MCF-7生物学特性的影响
- 亨廷顿氏病(HD)是一种遗传性神经退化性疾病,HD患者体内可能存在着某些抑制肿瘤发生的生物活性物质.本实验探讨亨廷顿相关蛋白1(HAP1)基因过表达对人乳腺癌细胞株MCF-7增殖以及体外迁移侵袭和细胞凋亡的影响及其可能机...
- 朱丽伟宋雪
- 关键词：乳腺癌病理机制蛋白表达生物学特性
- 文献传递
