曹旭晴
- 作品数：2 被引量：3H指数：1
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- Ficolin 3的表达、纯化及其对RAW264.7巨噬细胞的活化作用被引量：2
- 2014年
- 目的构建人ficolin-3基因的原核表达载体在大肠杆菌中表达后纯化,检测可溶性His-ficolin在诱导巨噬细胞系RAW264.7活化中的作用。方法从人外周血单个核细胞cDNA中扩增人ficolin-3基因的cDNA序列,将其插入pET22原核表达载体中,酶切鉴定并测序验证重组质粒pET22b-ficolin 3后,在大肠杆菌BL21中诱导表达并纯化His-ficolin 3。以His蛋白为对照,利用流式细胞术检测不同浓度可溶性His-ficolin 3对RAW264.7细胞吞噬鸡红细胞能力的影响,利用ELISA检测His-ficolin 3对RAW264.7细胞分泌IL-6、IL-12和TNF-α的影响。结果酶切鉴定获得预期目的片段,测序证实重组质粒pET22b-ficolin 3构建成功。SDS-PAGE提示相对分子质量(Mr)33 000处有可溶性目的蛋白His-ficolin 3表达,His柱纯化后产物纯度在90%以上。Western blot法检测证实纯化产物为His-ficolin 3。和His蛋白相比,His-ficolin 3对RAW264.7细胞的吞噬能力具有剂量依赖性,即His-ficolin3浓度越高,吞噬能力越强;此外,His-ficolin3能显著诱导RAW264.7细胞分泌IL-6、IL-12和TNF-α等炎性细胞因子。结论成功构建了pETb-Ficolin 3重组载体并获得了纯度为90%以上的His-ficolin 3。His-ficolin 3能够显著促进巨噬细胞RAW264.7的活化。
- 郭江涛曹旭晴王志军
- 关键词：原核表达
- 白塞氏病患者人类白细胞抗原亚型及免疫球蛋白D的临床分析被引量：1
- 2011年
- 目的探讨白塞氏病患者(BD)人类白细胞抗原亚型分类及免疫球蛋白D(IgD)的表达。方法对102例BD患者临床资料进行回顾性分析。结果①HLA-B51阳性29例,阳性率56.9%。②IgD阳性89例,阳性率15.7%。③恶性肿瘤5例,检出率8.5%,均为女性。结论和BD发病相关联的HLA-B51检查具有重要的临床意义。对于BD合并妇科癌症的高发病率,是否是受到BD的影响,还是各种药物的影响,今后有必要做进一步的探讨研究。
- 郭江涛曹旭晴马晓莉曹丽李红梅
- 关键词：白塞氏病人类白细胞抗原免疫球蛋白D
