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张晶晶
作品数:
2
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供职机构:
内蒙古科技大学
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发文基金:
国家自然科学基金
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相关领域:
生物学
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合作作者
李斌
内蒙古科技大学
张学明
内蒙古科技大学
虞飞
内蒙古科技大学
丁海麦
内蒙古科技大学
席海燕
内蒙古科技大学
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作者
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丁海麦
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虞飞
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张学明
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李斌
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张晶晶
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席海燕
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2015
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重组人gdnf乳腺特异表达载体转染牛胎儿成纤维细胞的研究
2014年
为了制备重组人GDNF牛乳腺生物反应器,采用组织块贴壁法分离培养雌性牛胎儿成纤维细胞,连续继代培养75d,进行形态观察和染色体分析,在此基础上,转染带有新霉素抗性和红色荧光蛋白双重筛选标记的重组人gdnf乳腺特异表达载体pNR-GDNF,G418筛选阳性抗性克隆,进行PCR法鉴定。结果表明,分离培养的牛胎儿成纤维细胞具有正常的形态、分裂增殖特性和染色体数目;目的基因已整合到转基因细胞的染色体上。
虞飞
李斌
张晶晶
丁海麦
张学明
关键词:
牛胎儿成纤维细胞
转基因
GDNF
重组人gdnf在人乳腺肿瘤上皮细胞中表达的研究
2015年
为了在人乳腺肿瘤上皮细胞系中表达重组人胶质细胞源性神经营养因子( GDNF ),本研究构建了牛β-casein基因启动子驱动的重组人GDNF乳腺上皮细胞特异表达载体,用脂质体介导法将其导入人乳腺肿瘤上皮细胞系Bcap-37细胞中,经G418抗性筛选8~10 d后,分离稳定表达红色荧光蛋白的转染细胞,PCR鉴定转基因细胞,用催乳素、胰岛素及氢化可的松诱导培养转基因细胞,RT-PCR和Western Blot检测重组人GDNF的表达分泌。结果表明:重组人GDNF乳腺上皮细胞特异表达载体被成功构建,转染Bcap-37细胞后,稳定整合到细胞染色体中,转基因细胞经激素诱导后能够表达分泌糖基化的 GDNF,为高效制备与天然人GDNF蛋白结构完全一致的重组人GDNF蛋白用于帕金森病临床治疗研究奠定了基础。
张学明
丁海麦
席海燕
李斌
张晶晶
虞飞
关键词:
胶质细胞源性神经营养因子
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