刘昊坤
- 作品数：4 被引量：17H指数：3
- 供职机构：中国人民解放军军事交通学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金河北省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 衰老大鼠睾丸组织受何首乌饮调控差异表达基因的筛选被引量：4
- 2017年
- 目的筛选出衰老大鼠睾丸组织受何首乌饮调控的差异表达基因。方法根据实验要求将雄性大鼠分为4组,每组各10只:青年对照组(12月龄);自然衰老组(18月龄);何首乌饮1组(何首乌饮4.8g/100g,灌胃60d,18月龄);何首乌饮2组(何首乌饮4.8g/100g,灌胃30d,18月龄),采用基因芯片技术筛选睾丸组织受何首乌饮调控的差异表达基因,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)进行验证。结果基因芯片共筛选出差异表达基因21260个,自然衰老组和青年对照组大鼠睾丸组织差异表达基因有2100个,其中受何首乌饮直接调控的基因有912个,其中衰老后691个基因表达明显上调,221个基因表达下调,用何首乌饮干预60d后,上调的691个基因明显下调,下调的221个基因明显上调;通过GO分析睾丸组织受何首乌饮调控的基因参与的生物学过程有繁殖,免疫代谢,细胞生长发育死亡等;Pathway分析,这些基因主要分布在59条通路上;经qRT-PCR检测结果与芯片结果一致。结论何首乌饮延缓大鼠睾丸组织衰老是一个多途径、多靶点协同作用的过程,但其具体作用机制尚不明确,有待进一步研究。
- 回陈红刘昊坤杜云帆秦瑄希徐天戎贺飞牛嗣云
- 关键词：何首乌饮睾丸组织基因芯片衰老
- 阿糖胞苷在大鼠皮质神经元细胞培养中的适宜介入时间被引量：8
- 2017年
- 背景:由于中枢神经系统疾病研究需求,实验室常用有毒性的阿糖胞苷获得纯度较高的神经元细胞,然而阿糖胞苷的介入时间鲜见研究。目的:验证终浓度为10μmol/L阿糖胞苷在大鼠皮质神经元原代细胞培养中的适宜介入时间。方法:采用神经元专用培养基Neurobasal+B27进行大脑皮质组织原代神经元培养,分别于接种细胞后12,24,36,48 h加入终浓度为10μmol/L阿糖胞苷。每48 h半量换液。于7 d后倒置的显微镜下观察神经元形态;采用免疫细胞化学的方法对神经元特异性烯醇化酶进行免疫化学染色,鉴定神经元细胞的纯度和成熟度;计算机多功能图像分析系统对所有神经元特异性烯醇化酶阳性细胞进行形态学计量分析。结果与结论:(1)接种细胞后24 h加入阿糖胞苷,神经元纯度在90%以上,分化成熟神经元细胞占比89.00%,神经元细胞胞体面积最大,突触最长,胞质透亮,核大而明显,细胞体周围折光性强,立体感强,突起三四个,具有三四级分叉,形成良好的网络结构,非神经元细胞较少,神经元纯度及细胞状态最佳;(2)结果表明,阿糖胞苷介入培养过程越早,神经元细胞纯度越高,但阿糖胞苷对神经元细胞分化成熟的影响也会越明显;采用neurolbasal培养基,于接种细胞后24 h加入阿糖胞苷,可以获得理想纯度,成熟度较好,生长状态较好的大脑皮质神经元。
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- 关键词：阿糖胞苷神经元培养国家自然科学基金
- 何首乌饮对衰老大鼠生精细胞凋亡的影响被引量：3
- 2017年
- 目的探讨何首乌饮对衰老大鼠睾丸生精细胞凋亡的影响。方法选用18月龄Wistar大鼠为自然衰老动物模型,以12月龄大鼠作为青年对照,采用原位末端标记法和流氏细胞术分别检测何首乌饮灌胃用药60 d和30 d的18月龄大鼠睾丸组织细胞凋亡率变化和DNA含量的变化。结果与青年对照组相比,自然衰老组睾丸细胞凋亡率明显增高,单倍体和4倍体细胞明显减少并以二倍体为主,G_1/G0期细胞明显增多(P<0.05),细胞增殖指数明显降低(P<0.05);而何首乌饮用药后与自然衰老组相比,细胞凋亡率明显降低(P<0.05);4倍体和单倍体比例明显增加(P<0.05),与青年对照组无显著性差异(P>0.05);细胞增殖指数明显升高(P<0.05),G_1/G_0期细胞明显减少(P<0.05)。结论何首乌饮可以抑制生精细胞凋亡,促进细胞增殖,达到延缓睾丸组织衰老的效果,但其具体作用机制有待研究。
- 王建明回陈红刘昊坤杜云帆秦瑄希牛嗣云
- 关键词：何首乌饮睾丸组织细胞凋亡衰老
- 何首乌饮对衰老大鼠生精细胞线粒体凋亡通路关键基因表达的影响被引量：5
- 2017年
- 目的探讨何首乌饮对衰老大鼠睾丸生精细胞线粒体凋亡通路关键基因表达的影响。方法选用12月龄Wistar雄鼠45只,随机分为3组:青年对照组、自然衰老组、何首乌饮组,每组15只,何首乌饮组和自然衰老组于16个月开始分别灌胃何首乌饮和等量蒸馏水,连续60d。青年对照组于12月龄,其余两组于18月龄分别进行实验,通过Real-time PCR、免疫荧光染色和免疫印迹法,观察各组大鼠睾丸组织线粒体凋亡通路关键基因DR6、BAX、Caspase-3、Cyt-C、14-3-3σ的表达变化。结果自然衰老大鼠线粒体凋亡通路关键基因14-3-3σ表达明显低于青年对照组,DR6、BAX、Caspase-3、Cyt-C表达明显高于青年对照组;而何首乌饮用药后能明显逆转上述现象。结论何首乌饮提高衰老大鼠精子质量与线粒体凋亡通路有关。
- 安福丽王玉娟刘昊坤杜云帆秦瑄希牛嗣云高福禄
- 关键词：何首乌饮实时定量聚合酶链反应免疫荧光免疫印迹法衰老
